湖羊瘤胃微生物GH9家族葡聚糖酶基因IDSGLUC9-25的表达与功能表征

【目的】葡聚糖酶是饲用添加剂的重要成分,本研究旨在从湖羊消化道微生物中挖掘性质优良的GH9家族葡聚糖酶基因,用于研发新型饲用酶制剂。【方法】从湖羊瘤胃微生物cDNA中扩增IDSGLUC9-25基因,在大肠杆菌中进行异源表达,对重组蛋白进行诱导表达和纯化,研究重组蛋白的酶学性质和底物水解模式。【结果】IDSGLUC9-25基因编码527个氨基酸,包含一个CelD_N结构和一个GH9家族催化结构域;重组蛋白rIDSGLUC9-25分子量约为62.7 kDa,最适反应温度和pH分别为40℃和6.0,在30-50℃下活性较高,在pH 4.0-8.0范围内能够保持较高的稳定性,经pH 4.0-8.0缓冲液处理1 h后残余活性均大于90%;底物谱分析表明,rIDSGLUC9-25能催化大麦β-葡聚糖、苔藓地衣多糖、魔芋胶和木葡聚糖,比活性分别为(443.55±24.48)、(65.56±5.98)、(122.37±2.85)和(159.16±7.73) U/mg;利用薄层色谱法(thin layer chromatography, TLC)和高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)分析水解产物发现,rIDSGLUC9-25降解大麦葡聚糖主要生成纤维三糖(占总还原糖64.19%±1.19%)和纤维四糖(占总还原糖26.24%±0.12%),催化地衣多糖主要生成纤维三糖(占总还原糖78.46%±0.89%)。【结论】本研究报道了一种来自密螺旋体属细菌的内切β-1,4-葡聚糖酶IDSGLUC9-25 (EC 3.2.1.4),能高效催化多糖底物生成纤维三糖和纤维四糖,为研发饲用酶制剂和制备低聚寡糖建立基础。     

茜草属药用植物的研究——Ⅲ.11种茜草属药材的组织形成学研究

本文除对主流商品茜草的生药性状和组织构造作了较全面的描述,还利用图、表及照片列出狭叶茜草P.truppeliana Loes、Loeb、小红参(滇茜草)R.yunnomensis Dtels、中华茜草R.chinensis Regel et maack、大叶茜草R.schumanniana Pritz、按针叶茜草R.lanceolata Hayata、大茜草R.magna Hisao、钩毛茜草R.oncotrucha Hand-Mazz、红花茜草R.podantha Diels、金剑草R.alata Wall、新疆茜草(洋茜草)R.tinctorum L等10种与茜草Rubia cordifolia L的主要区别点,并作药材检索表,以利鉴别。     

Applying single-cell highly multiplexed secretome proteomics to characterize immunotherapeutic products and predict clinical responses

Genetically and phenotypically identical immune cell populations can be highly heterogenous in terms of their immune functions and protein secretion profiles. The microfluidic chip-based single-cell highly multiplexed secretome proteomics enables characterization of cellular heterogeneity of immune responses at different cellular and molecular layers. Increasing evidence has demonstrated that polyfunctional T cells that simultaneously produce 2+ proteins per cell at the single-cell level are key effector cells that contribute to the development of potent and durable cellular immunity against pathogens and cancers. The functional proteomic technology offers a wide spectrum of cellular function assessment and can uniquely define highly polyfunctional cell subsets with cytokine signatures from live individual cells. This high-dimensional single-cell analysis provides deep dissection into functional heterogeneity and helps identify predictive biomarkers and potential correlates that are crucial for immunotherapeutic product design optimization and personalized immunotherapy development to achieve better clinical outcomes.     

微生物产生的木聚糖酶的功能和应用

术聚糖是一种异质多糖,主要由木糖和阿拉伯糖组成。微生物产生的木聚糖酶来源广泛,能将木聚糖水解为木寡糖和D-木糖。该酶具有极大的应用价值,如可用于纸浆的漂白以减少环境污染,也可将造纸工业及农业废料中的木聚糖转化为D-木糖。     

钙对生长素诱导的玉米胚芽鞘切段延长生长的影响

１０μｇ／ｇ的ＩＡＡ溶液强烈地促进玉米胚芽鞘切段的延长生长和质子分泌,但这两种效应的启动时间有别．Ｃａ２＋在高浓度下（２—５ｍｍｏｌ／Ｌ）强烈抑制ＩＡＡ诱导的延长生长,但在低浓度下（０．５ｍｍｏｌ／Ｌ）则有轻微的促进作用．ＩＡＡ增大质膜相对透性,而Ｃａ２＋则有稳定膜的作用,且适宜的浓度较低（０．５ｍｍｏｌ／Ｌ）．     

一种具有纤溶活性的枯草杆菌蛋白激酶的研究──Ⅰ高产酶菌株的筛选与鉴定

本文主要阐述了一种具有纤溶活性的枯草杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ）蛋白激酶产生菌株的筛选与鉴定的研究结果。作者从初筛的１２株Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｌｉｌｉｓ菌中,通过对固体发酵和液体发酵所产生的枯草杆菌蛋白激酶,用琼脂糖－纤维蛋白平板法测其活性,经比较不同菌株的活性,筛选出两株高产酶菌株：Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓＨＷ—１２和Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓＨＷ—３。同时对菌体和菌落形态特点、生理生化反应进行了鉴定,认为Ｂ．ＳｕｂｔｉｌｉｓＨＷ－１２菌株可用来做为发酵生产该酶的菌种。     

固定化酵母细胞生产1,6-二磷酸果糖研究

本文研究了固定化酵母细胞制备果糖1,6二磷酸(FDP)的方法及其生产。用卡拉胶包埋方法固定化酿酒酵母(Sacchromyces cerevisae),对含葡萄糖1.0M,磷酸盐0.8M的糖磷液,pH6.5,在37℃下进行磷酸化反应。反复分批转化20天以上,可达到平均产FDPH_427.58mg/ml,最高为59.94mg/ml。用100ml固定化细胞生物反应器连续运转309h,稀释速率D=0.097h~(-1),平均产FDPH_4 21.51mg/ml。20L反应器连续运转,生产能力达到1.7g/h.L。用层析方法制备FDPNa_3结晶粉,提取收率为72.08％,制备质量达到或超过了国内外同类产品的质量要求。