SPECIES OF THE GENUS PHOBETES F(O)RSTER (HYMENOPTERA, ICHNEUMONIDAE, CTENOPELMATINAE) FROM CHINA WITH AKEY TO SPECIES KNOWN IN CHINA

报道在江西和河南发现的浮姬蜂属Phobetes F(o)rster,1869的种类,其中有2新种:白环浮姬蜂Ph.albiannularis sp.nov.和河南浮姬蜂Ph.henanensis sp.nov.;中国1新纪录种:北海道浮姬蜂Ph.sapporensis( Uchida,1930).指出了新种与近似种的鉴别特征,并附彩色特征图.编制了该属中国已知种的检索表.     

稳定表达人Fhit突变体细胞系的建立

目的:构建人脆性组氨酸三联体(Fhit)突变体真核表达载体并建立稳定表达人Fhit突变体的细胞株,以便进一步研究Fhit与复制蛋白A(RPA)在体内的相互作用。方法:将3种人Fhit突变体cDNA克隆至带有HA标签的真核表达载体pREP10上,构建人Fhit突变体真核表达载体,转染HeLa细胞,经潮霉素B加压筛选阳性克隆,用Western印迹鉴定稳定表达Fhit突变体蛋白FhitA、FhitD和FhitF的阳性细胞株。结果:经PCR鉴定及序列分析,Fhit突变体基因真核表达载体pREP10/FhitA/D/F-HA构建正确,转染人HeLa细胞,筛选出Fhit突变体表达较高的细胞株。结论:建立了3株稳定表达Fhit突变体的细胞株HeLa-FhitA/D/F,为研究Fhit与RPA的相互作用在DNA损伤应答中发挥的作用奠定了基础。     

靶向细胞外基质磷酸糖蛋白的microRNA的筛选及鉴定

目的:寻找靶向细胞外基质磷酸糖蛋白(MEPE)基因的微小RNA(miRNA),并检测其对人HeLa细胞内源性Mepe基因表达的影响。方法:通过NCBI检索人源Mepe的3’UTR,利用miRNA预测工具TargetScan预测可能靶向Mepe的所有miRNA,通过双萤光素酶报告基因系统检测miRNA与Mepe3’UTR的结合情况,从而初步筛选出可能靶向Mepe的miRNA;同时,用Western印迹检测miRNA经转染后对Mepe基因表达的影响。结果:利用TargetScan预测出36条可能靶向Mepe的miRNA,根据分值及匹配情况从中挑选出6条进行验证;与转染空载体pGL3-cm的相对荧光素值相比,转染miR-376a的相对荧光素值降低较为明显,而当Mepe3’UTR与miR-376a结合位点突变后,miR-376a不能抑制萤光素酶的活性;Western印迹结果显示miR-376a能明显抑制MEPE的表达。结论:miRNA-376a可能是靶向Mepe基因的miRNA,为进一步研究MEPE的功能奠定了基础。     

苹果渣基质柠檬酸高产菌株选育

分别以固态苹果渣、苹果渣固态酶解物、苹果渣酶解液和10%葡萄糖溶液为发酵基质研究了17株野生黑曲霉的柠檬酸产生能力,并对获得的4株柠檬酸高产菌进行了诱变育种。结果表明:17株黑曲霉在4种发酵基质中均能良好生长并发酵产生柠檬酸,不同菌株在同一发酵基质中产酸能力间存在差异。FG17、FG23、FG26、FG30等4株菌苹果渣基质柠檬酸产生能力较高,且在4种不同发酵基质中产酸性能稳定。4株菌分别经紫外线和60Co-γ射线诱变后得到的正向突变株柠檬酸产率均显著提高,突变株中FG26-15-4(UV)发酵苹果渣后柠檬酸产率最高,达11.32%,FG23-13-3(γ)发酵苹果渣酶解液后柠檬酸产率最高,达2.73 mg/mL,均高于现有研究报道,可作为不同类型苹果渣基质柠檬酸发酵用菌种。     

Co-expression with RadA and the characterization of stRad55B, a RadA paralog from the hyperthermophilic crenarchaea Sulfolobus tokodaii

ST0838 (designed stRad55B) is one of the four RadA paralogs (or Rad55 homologues) in the genome of the hyperthermophilic crenarchaeon Sulfolobus tokodaii. The gene is induced by UV irradiation, suggesting that it is involved in DNA recombinational repair in this organism. However, this protein could not be expressed normally in vitro. In this study, thermostable and soluble stRad55B was obtained by co-expression with S. tokodaii RadA (stRadA) in E. coli, and the enzymatic properties were examined. It was found that stRad55B bound ssDNA preferentially and had a very weak ATPase activity that was not stimulated by DNA. The recombinant protein inhibited the strand exchange activity promoted by stRadA, indicating that stRad55B might be an inhibitor to the homologous recombination in this archaeon. The results will be helpful for further functional and interaction analysis of RadA paralogs and for the understanding of the mechanism of recombinational repair in archaea.     

脆性组氨酸三联体与复制蛋白A相互作用关键氨基酸残基的鉴定

目的：研究脆性组氨酸三联体（Fhit）对ATR/CHK1通路的影响,在确定Fhit与复制蛋白A（RPA）存在相互作用的基础上鉴定Fhit与RPA相互作用的关键氨基酸残基,为进一步研究Fhit特异的信号通路奠定基础。方法：构建一系列Fhit缺失突变体基因Fhit1～Fhit11及6种Fhit点突变体基因,将这些基因插入含GST基因的原核表达载体中,在大肠杆菌中表达并纯化GST-Fhit1～GST-Fhit11融合蛋白、突变体GST-FhitSIYEEL、GST-FhitIY、GST-FhitEL、GST-FhitF、GST-FhitA,以及GST-FhitD融合蛋白,用GST沉降技术研究Fhit与RPA相互作用的关键氨基酸残基。结果：Fhit蛋白第112～117（SIYEEL）残基可能是Fhit与RPA相互作用的关键区域,而第114（Y）残基可能是Fhit与RPA相互作用的关键氨基酸残基。结论：确定了Fhit与RPA相互作用的关键氨基酸残基,为阐明Fhit在维持基因组完整性方面的机理提供了线索。     

湖丹皮脂溶性化学成分研究

利用柱层析方法,从湖丹皮70％乙醇提取物的氯仿萃取部位分离得到5个化合物。运用理化及波谱方法,它们分别鉴定为丹皮酚（1）、3,6-二羟基-4-甲基苯乙酮（2）、去甲基丹皮酚（3）、3,3’-二甲氧基鞣花酸（4）和胡萝卜苷（5）。其中化合物4、5为首次从该种植物中分离得到。HPLC研究表明,湖丹皮中的去甲基丹皮酚含量高于国内其它产地。     

长臀姬蜂属一新种(膜翅目,姬蜂科)

报道分布于中国的长臀姬蜂属Coleocentrus Gravenhorst,1829种类,其中含1新种:褐长臀姬蜂Coleocentrus fulvus sp.nov..描述了新种的形态特征,并与近似种做了比较,编制了中国已知种检索表.标本保存在国家林业局森林病虫害防治总站.