丙型肝炎病毒核心蛋白基因在毕赤酵母中克隆与分析

目的:克隆丙型肝炎病毒核心蛋白基因及其上游DNA序列,为此基因的表达研究作准备。方法:用反转录和PCR方法从HCV的总RNA中扩增得到核心蛋白基因及其上游DNA序列,连接到pMD18-T载体上,用限制性内切酶切下目的基因,插入到巴斯德毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建成重组质粒,测序证明正确后,再将目的基因在毕赤酵母中进行克隆,鉴定。结果:重组质粒转化毕赤酵母后,经PCR鉴定,证明形成了目的基因的克隆。结论:应用毕赤酵母作为受体菌,pPIC9K为载体,成功克隆了HCV核心蛋白基因。     

两株乳杆菌对牙鲆体表及消化道粘液的粘附特性

目的利用从牙鲆肠道分离的1株鼠李糖乳杆菌P15和1株干酪乳杆菌(Lc),研究它们在牙鲆粘液中的粘附特性以及不同pH和盐度对其粘附的影响。方法用异硫氰酸荧光素(FITC)标记法。结果P15和Lc对牙鲆的体表粘液和消化道粘液均有粘附作用,2株菌对消化道粘液的粘附效果好于体表粘液,且对胃的粘附百分率最高,分别是48.18%和63.0%。这2株菌在各部位的粘附受pH和盐度的影响,在弱酸性环境中和32左右的盐度中具有较强的粘附能力。结论在海水盐度条件下,P15和Lc在消化道粘附率较高。     

一株太平洋深海环己酮降解菌的筛选与功能研究

从太平洋深海菌株中筛选到一株能以环己酮为唯一碳源生长的微球菌(CN1),其最适生长温度为25℃~37℃,最适生长pH8,最适生长盐度6%。该菌可耐受高浓度环己酮(>44% V/V),并且在16.7%(V/V)的环己酮中生长最好。CN1可转化环己醇成环己酮,环己酮又可被快速降解、矿化。这表明该菌含有环己醇脱氢酶并且很可能还含有环己酮单加氧酶。通过兼并PCR克隆到450bp环己酮单加氧酶基因片段,其编码的氨基酸序列不仅具有Baeyer-Villiger单加氧酶家族的保守序列,而且与节杆菌(Arthrobacter BP2)的环己酮单加氧酶同源性最高(80%),而与研究较深入的不动杆菌(Acinetobacter sp.NCIMB 9871)单加氧酶的同源性仅为53%。由于目前报道的环己醇和环己酮的降解都是通过环己酮单加氧酶进行的,所以CN1的环己酮单加氧酶应该负责环己酮的降解。目前报道的环己酮降解菌都可以降解环戊酮,而CN1不可降解环戊酮,暗示了CN1的环己酮单加氧酶比较特别。另外,我们还首次发现在CN1中环己醇对环己酮的降解有一定的抑制作用。     

角倍蚜 Schlechtendalia chinensis(Bell)(Hemiptera:Pemphigidae)各蚜型触角感器的比较分析

本研究利用扫描电镜对角倍蚜各蚜型触角感器的超微结构、类型、分布和数量进行了比较分析。结果表明,角倍蚜的触角上着生4种类型的感器：毛形感器、原生感觉圈、感觉突及次生感觉圈,它们在各蚜型触角上的分布和数量各不相同。其中,毛形感器有TypeⅠ和TypeⅡ两种类型,各蚜型触角上均有分布;原生感觉圈主要分布于干母、无翅干雌、第三代有翅干雌若蚜以及性蚜的触角上,有两种类型：PrⅠ和PrⅡ,分别位于触角的末节和倒数第二节,其中,第三代有翅干雌若蚜的触角上仅存在PrⅠ,无PrⅡ;感觉突仅出现于第三代有翅干雌若蚜触角的第3~5节;次生感觉圈仅存在于有翅型春迁蚜和秋迁蚜触角的第3~5节,其面积约占触角鞭节面积的2/3。我们认为,各蚜型触角感器的差异可能与蚜虫的生境（瘿内或瘿外）、行为（如取食、交配）以及翅的有无（如寄主选择、迁飞等）有关。     

基于红外相机技术分析鼬獾的活动节律

鼬獾(Melogale moschata)是食肉目鼬科鼬獾属动物,在我国分布广泛、种群数量丰富,但有关鼬獾的生态研究报导比较少.为掌握鼬獾的活动节律及其影响因素,2017年2月至2019年2月,利用红外相机技术对江西省桃红岭梅花鹿国家级自然保护区、九岭山国家级自然保护区和齐云山国家级自然保护区的鼬獾进行了监测,每个保护...     

应用T细胞酶联免疫斑点法诊断人类免疫缺陷病毒感染合并结核潜伏感染的实验研究

目的探讨T细胞酶联免疫斑点法(TSPOT)在我国人类免疫缺陷病毒(HIV)感染人群中用于诊断结核潜伏感染的应用价值。方法应用TSPOT-TB试剂盒对68例明确诊断的HIV感染者血液标本进行结核分枝杆菌(Mtb)特异性T细胞的检测,同时对所有病例做结核菌素纯蛋白生物(PPD)试验。结果在HIV感染者总体、CD4<200/μl和CD4>200/μl各组中,TSPOT检测阳性率分别为67.65%、44.44%和70.69%,PPD试验阳性率分别为41.18%、11.11%和46.55%,其中在HIV感染者总体及CD4>200/μl组中TSPOT检测阳性率均高于PPD试验,差异有统计学意义(P均<0.005)。TSPOT检测在CD4<200/μl组中的阳性率低于CD4>200/μl组,但差异无统计学意义(P>0.05);PPD试验在CD4<200/μl组中的阳性率远低于CD4>200/μl组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TSPOT检测在我国HIV感染合并结核潜伏感染的早期快速诊断中有较大应用价值,尤其是在CD4细胞计数>200/μl的HIV感染人群中,阳性率高于目前常用的PPD试验。PPD试验阳性率受CD4细胞计数水平的显著影响,而T SPOT检测不首次此因素影响。     

Mdogg1基因参与家蝇体内氧化还原平衡的维持

[目的]本研究旨在克隆鉴定家蝇Musca domestica中8-羟基鸟嘌吟糖苷酶1(8-hydroxyguanine glycosylase 1,OGG1)编码基因Mdogg1,明确其是否参与家蝇氧化应激调控.[方法]根据家蝇转录组数据,利用RT-PCR克隆Mdogg1基因cDNA序列,并进行生物信息学分析;利用qR...     

角倍蚜瘿内干雌蜜露的排泄和糖分组成

【目的】角倍是角倍蚜Schlechtendalia chinensis在第一寄主植物盐肤木Rhus chinensis叶片上取食而形成的一种封闭型虫瘿,瘿内蚜虫排泄物(蜜露)的清洁对于维持角倍蚜种群的生存至关重要。本研究旨在探究角倍蚜瘿内世代的蜜露排泄及糖分组成情况。【方法】采用倒置荧光显微镜连续观察角倍蚜瘿内干雌的蜜露排泄情况;用含有不同浓度蔗糖或淀粉的培养基饲喂瘿内干雌,统计泌露率,分析蔗糖和淀粉对角倍蚜瘿内干雌蜜露排泄的影响;利用液相色谱检测和分析蜜露的糖分组成和含量。【结果】角倍蚜瘿内,很少能观察到无翅干雌排泄蜜露,35.40%±2.41%的有翅干雌可被观察到排泄蜜露。但在琼脂糖培养基上,无翅干雌和有翅干雌均可排泄蜜露,泌露率分别为23.89%±5.58%和173.96%±28.61%;在含有不同蔗糖浓度的琼脂糖培养基上,无翅干雌和有翅干雌泌露率均随蔗糖浓度的升高而降低。在含有不同淀粉浓度的琼脂糖培养基上,无翅干雌泌露率随淀粉浓度的升高而降低;当淀粉浓度由0增加至2%时,有翅干雌泌露率由173.96%±28.61%增加至236.81%±55.67%,随后泌露率随淀粉浓度的升高而...     

中药抗白念珠菌研究新进展

以白念珠菌为主的真菌感染近年来呈上升态势,氟康唑等一线抗真菌药物因长期应用导致耐药菌株不断出现,中药在抗真菌感染方面具有独特的优势。本课题组在多项国家与省级课题资助下,对中药的体内外抗真菌作用及机制进行了较系统深入的研究,现结合课题组自身与国内外在中药抗真菌感染领域的最新研究成果,对中药抗真菌(主要是白念珠菌)近5年的研究进展进行综述。