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21.
Molecular analysis of external genitalia formation: the role of fibroblast growth factor (Fgf) genes during genital tubercle formation 总被引:9,自引:0,他引:9
Haraguchi R Suzuki K Murakami R Sakai M Kamikawa M Kengaku M Sekine K Kawano H Kato S Ueno N Yamada G 《Development (Cambridge, England)》2000,127(11):2471-2479
The molecular mechanisms underlying the development of the external genitalia in mammals have been very little examined. Recent gene knockout studies have suggested that the developmental processes of its anlage, the genital tubercle (GT), have much in common with those of limb buds. The Fgf genes have been postulated as regulating several downstream genes during organogenesis. Fgf8 was expressed in the distal urethral plate epithelium of the genital tubercle (GT) together with other markers such as the Msx1, Fgf10, Hoxd13 and Bmp4 expressed in the mesenchyme. To analyze the role of the FGF system during GT formation, an in vitro organ culture system was utilized. It is suggested that the distal urethral plate epithelium of GT, the Fgf8-expressing region, regulates the outgrowth of GT. Ectopic application of FGF8 beads to the murine GT induced mesenchymal gene expression, and also promoted the outgrowth of the GT. Experiments utilizing anti-FGF neutralizing antibody suggested a growth-promoting role for FGF protein(s) in GT outgrowth. In contrast, despite its vital role during limb-bud formation, Fgf10 appears not to be primarily essential for initial outgrowth of GT, as extrapolated from Fgf10(-/-) GTs. However, the abnormal external genitalia development of Fgf10(-/-) perinatal mice suggested the importance of Fgf10 in the development of the glans penis and the glans clitoridis. These results suggest that the FGF system is a key element in orchestrating GT development. 相似文献
22.
噬菌体抗体文库的构建及人源抗HIV-1 gp 160抗体的筛选 总被引:7,自引:0,他引:7
构建人源噬菌体抗体文库如下:HIV感染者脾细胞中提取mRNA,经反转录再以人IgG重链Fd两端及轻链“通用”引物分别扩增Fab基因片段,依次插入到噬菌粒载体pComb3中,电转化大肠杆菌XL1-Blue,经辅助噬菌体救助,重组噬菌体得以溶源裂解,Fab表达于噬菌体包膜蛋白Ⅲ的N端.此噬菌体抗体库的容量为5×105.筛选抗HIV-1同时又具有能被抗独特型抗体“IF7”所识别的独特型的阳性抗体:以重组包膜糖蛋白gp160及gp41多肽对噬菌体抗体文库进行三次淘选,使抗gp160的特异性抗体得到100倍的富集.然后通过直接ELISA和竞争性ELISA实验筛选出两株结合性较好的特异性抗gp160抗体-3B株与1D株.直接ELISA实验表明这两株克隆均能被“1F7”所识别,为抗独特型多肽的筛选奠定了基础. 相似文献
23.
组织型纤溶酶原激活剂的纯化制备 总被引:1,自引:0,他引:1
简述了用于大规模生产组织型纤溶酶原激活剂(tPA)的重组动物细胞及其培养工艺。从重组tPA的大规模、快速纯化的角度考虑,对tPA的纯化制备方法进行了简要评述。 相似文献
24.
25.
26.
27.
猪流行性腹泻病毒地方株LJB/03分离及培养特性 总被引:2,自引:0,他引:2
从黑龙江省某猪场疑为病毒性腹泻的发病猪采集腹泻粪便样品,以RT-PCR法扩增出猪流行性腹泻病毒M基因后,采用细胞培养法进行病毒分离。对细胞培养分离物进行间接免疫荧光、免疫电镜观察、RT-PCR及ELISA法检验,其中间接免疫荧光试验可见培养细胞中存在明显的特异性绿色荧光;免疫电镜下可见大小符合预期、有囊膜、花瓣状的典型冠状病毒结构特征;RT-PCR检测证实存在PEDVM基因;间接ELISA检测中平均P/N比值为7.6;从而确认为分离到一株猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV),命名为PEDVLJB/03株。随后,对该分离毒株的培养特性及如何提高病毒滴度进行探索。通过摸索该分离毒株的蚀斑形成条件,建立了PEDV蚀斑形成方法,并采用该方法进行病毒的蚀斑纯化,纯化得到PEDV大蚀斑克隆株和小蚀斑克隆株。对大、小两种蚀斑克隆株的病毒滴度测定结果表明,大小蚀斑克隆株细胞感染滴度相差明显。 相似文献
28.
29.
Pilophyllia Ge et Y,1974具有典型的包珊瑚型隔壁,是包珊瑚科的主要分子。该属广泛分布于上扬子区志留纪兰多维列世地层。首次对采自贵州石阡中兰多维列世(Llandovery)爱隆期(Aeronian)香树园组和雷家屯组的大量Pilophyllia Ge et Y,1974标本进行详细研究,经鉴定,共计有9种,其中包括6新种,1未定种,它们是:Pilophyllia simplex Chen,1986,P.fenggangensis Ge et Y,1974,P.vesiculosa Tang sp.nov.,P.conica Tang sp.nov.,P.ultimuma Tang sp.nov.,P.stylaris Tangsp.nov.,P.raritabulata Tangsp.nov.,P.lei-jiatunensis Tang sp.nov.,Pilophyllia sp.。此外,根据新的研究材料补充和修订Pilophyllia部分属征,并将石阡地区香树园组和雷家屯组的Pilophyllia种群特征与川北、陕南宁强组(Telychian阶)的进行比较。 相似文献
30.
野生蕉是香蕉遗传改良的天然基因库。为了分离野生蕉中的抗病基因类似序列,根据核苷酸结合位点(nucleotide binding site,NBS)和丝氨酸,苏氨酸蛋白激酶域设计简并性引物,以经过鉴定的抗香蕉枯萎病4号生理小种的野生蕉(Musaacuminata)叶片cDNA为模板进行PCR扩增。经过对扩增产物进行克隆和测序,获得了6个500bp左右的RGAs片段。其中有2个RGA(WNB1和WNB2)具有NB—ARC保守结构域特征,并且WNB1具有连续的ORF。其余4个RGAs(WST1、WST2、WST3和WST4)均具有丝氨酸,苏氨酸蛋白激酶域特征,且WST3编码的氨基酸序列与水稻抗叶斑病基因Xa21同源性很高。用半定量PCR分析枯萎病菌诱导后野生蕉叶片中RGAs的表达情况,结果表明WNB1和WST3受枯萎病菌诱导后表达量增强,这表明wNB1和WST3的表达可能与香蕉枯萎病抗性相关。 相似文献