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61.
利用PCR方法对单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白D(HSV-2gD)基因进行了修饰,在其5'端删去约500bp的非编码区,仅保留ATG上游7个bp。将修饰后的HSV-2gD基因插入到带有痘苗病毒天坛株TK基因区段的痘苗表达质粒pJSA1175,置于痘苗病毒P7.5k早/晚期启动子控制下。将此重组质粒用脂质体Lipofectin方法转染已受野型TK ̄+痘苗病毒天坛株感染的TK ̄-143细胞,通过同源重组机制和标志基因LacZ产物的蓝斑显色作用,以及BudR试剂对TK表型的选择压力,筛选出整合有HSV-2gD基因的重组痘苗病毒。Southem杂交表明,HSV-2gD基因已正确地插入痘苗病毒TK基因区内;间接免疫荧光检测显示,HSV-2gD蛋白已得到有效表达,且主要分布于细胞膜。重组病毒免疫家兔可产生明显的抗HSV-2gD中和抗体。用重组病毒免疫小鼠,3周后可使94%(17/18)的小鼠对抗HSV-2的致死量攻击,表明重组病毒具有明显的免疫保护作用。 相似文献
62.
本文设计一种由胶原和高分子聚合物组成的新型生物一人工复合血管。其研制过程是将包绕有聚酯网的硅胶棒埋入羊的皮下组织,再将形成的经聚酯网为支架的胶原管经醛化处理。作者通过肉眼和SEM观察提出了研制生物——人工复合血管的要点:聚酯网网孔要合适,其与硅胶棒的间隙要恰当,理化处理方法更要选择好。 相似文献
63.
野生紫斑牡丹和四川牡丹种子萌发特性及与其致濒的关系 总被引:6,自引:0,他引:6
野生牡丹种子一般较小,而且不同产地之间形状、大小差异较大。其萌发特性与栽培牡丹相比也有较大差异:萌发期长达半年以上,且萌发温度在10~15℃为宜,超过20℃则明显不利于生根及上胚轴生长。四个不同分布地的四川牡丹种子萌发率较一致,均在60~77%之间。三个不同产地的紫斑牡丹种子萌发率则相差甚远,分布于甘肃文县的萌发率达76%,而分布于陕西略阳和湖北神农架的萌发率则分别只有12%和4.4%,出苗率则更低。本文认为紫斑牡丹的种子特性是其在自然界处于濒危状态的重要原因之一。 相似文献
64.
系统地研究了细胞色素c在多种氨基酸和多肽修饰电极上的电化学反应。并对影响加速细胞色素c电化学反应的因素进行了讨论。 相似文献
65.
无花果蛋白酶通过8%戊二醛活化载体,共价结合到聚苯乙烯阴离子交换树脂GM201上,固定化作用在pH7.7,酶浓度0.8mg/g树脂,4℃下进行6h。得到的固定化酶表观K_m值(酪蛋白,1.11×10~(-4)mol/L)小于溶液酶K_m值(1.96×10~(-4)mol/L);固定化酶活性在pH6~8保持稳定,溶液酶最适pH为7.2;固定化酶最适温度由溶液酶的50~60℃移至37℃;固定化酶25℃保持7d,重复水解酪蛋白7次后,保留83.3%活性。固定化酶对酪蛋白水解度达47.5%,对大豆球蛋白达11.6%。 相似文献
66.
将油桐尺蠖(Buzurasuppressaria)核多角体病毒晚期基因──多角体蛋白基因启动子及5′端编码区,以两种不同方式置于缺乏启动子的氯霉素乙酰基转移酶(CAT)基因上游,使其分别终止在不同翻译终止位点,其宿主菌具有明显不同的氯霉素抗性,最高达200mg/L LB培养基以上,表明昆虫病毒启动子能启动原核基因表达。对多角体蛋白基因启动子能在大肠杆菌中有效工作的原因进行了讨论。 相似文献
67.
Anaerobic Degradation of Propionate by a Mesophilic Acetogenic Bacterium in Coculture and Triculture with Different Methanogens 总被引:4,自引:2,他引:2
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A mesophilic acetogenic bacterium (MPOB) oxidized propionate to acetate and CO2 in cocultures with the formate- and hydrogen-utilizing methanogens Methanospirillum hungatei and Methanobacterium formicicum. Propionate oxidation did not occur in cocultures with two Methanobrevibacter strains, which grew only with hydrogen. Tricultures consisting of MPOB, one of the Methanobrevibacter strains, and organisms which are able to convert formate into H2 plus CO2 (Desulfovibrio strain G11 or the homoacetogenic bacterium EE121) also degraded propionate. The MPOB, in the absence of methanogens, was able to couple propionate conversion to fumarate reduction. This propionate conversion was inhibited by hydrogen and by formate. Formate and hydrogen blocked the energetically unfavorable succinate oxidation to fumarate involved in propionate catabolism. Low formate and hydrogen concentrations are required for the syntrophic degradation of propionate by MPOB. In triculture with Methanospirillum hungatei and the aceticlastic Methanothrix soehngenii, propionate was degraded faster than in biculture with Methanospirillum hungatei, indicating that low acetate concentrations are favorable for propionate oxidation as well. 相似文献
68.
Capsid assembly and involved function analysis of twelve core protein mutants of duck hepatitis B virus. 总被引:6,自引:6,他引:0
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The roles of different regions of the duck hepatitis B virus (DHBV) core protein on viral capsid assembly and related functions were examined. Twelve deletion and insertion mutations which covered 80% of the DHBV C open reading frame were constructed and expressed in Escherichia coli. The N-terminal region (amino acids 3 to 66) of DHBV core protein was important for its tertiary structure and function in E. coli. The expressed core mutants without this region apparently inhibited E. coli growth. The results of transmission electron microscopy of E. coli thin sections, capsid agarose gel, and sucrose gradient sedimentation demonstrated that a few DHBV core mutants with insertion in the N terminus and deletion in the C terminus retained the ability to form core-like particles in E. coli. However, other mutations in most of N-terminal and central regions strongly inhibited the self-assembly ability of DHBV core protein in E. coli. In addition, the mutant with a C-terminal region deletion (amino acids 181 to 228) lost most of the nucleic acid-binding activity of the DHBV core protein. 相似文献
69.
Chang-Zhi Dong Jean-Luc Montillet Christian Triantaphylidès 《Physiologia plantarum》1994,90(2):307-312
The effects of ionizing radiation, used in post-harvest treatment of fruit and vegetables. were investigated on cultured apple cells ( Pyrus malus L. cv. Royal Red) on a short-term period. Irradiation (2 kGy) induced an increase of passive ion effluxes from cells and a decrease of cell capacity to regulate external pH. These alterations are likely due to effects on plasma membrane structure and function and were further investigated by studying the effects of irradiation on plasma membrane H+ -ATPase activity. Plasma membrane-enriched vesicles were prepared and the H+ -ATPase activity was characterized. Irradiation of the vesicles induced a dose dependent inhibition of H+ -ATPase activity. The loss of enzyme activity was immediate, even at low doses (0.5 kGy), and was not reversed by the addition of 2m M dithiothreitol. This inhibition may be the result of an irreversible oxidation of enzyme sulfhydryl moieties and/or the result of changes induced within the lipid bilayer affecting the membrane-enzyme interactions. Further analysis of the H+ -ATPase activity was carried out on vesicles obtained from irradiated cells confirming the previous results. In vivo recovery of activity was not observed within 5 h following the treatment, thus explaining the decrease of cell capacity to regulate external pH.
This rapid irreversible inhibition of the plasma membrane H+ -ATPase must be considered as one of the most important primary biochemical events occurring in irradiated plant material. 相似文献
This rapid irreversible inhibition of the plasma membrane H
70.
植物细胞离析酶的制备和应用 总被引:2,自引:0,他引:2
用 Aspergillus sp.A-19菌经固体发酵研制成一种新的植物细胞离析酶(SeparatasezA—P)。其离析单细胞的酶活力平均为70 767u/g,有效作用的pH在3.0—7.0,温度为20—45℃。发酵培养基配方是麸皮:桔皮粉:(NH4)2SO4(w/w)为100:100:O.63,料水比为1 :2.0,培养适宜条件为25℃、60小时。 相似文献