两步串联层析法纯化鼠抗人CD80单克隆抗体4E5

采用阴离子交换与凝胶过滤两步串联层析法,纯化了小鼠腹水来源的CD80阻断型单克隆抗体4E5。腹水样品经离心、过滤预处理后,在Tris-HCl缓冲溶液(pH8.0, 50mmol/L)条件下上阴离子交换柱对目的单抗进行捕集,采用0-0.5 mol/L NaCl浓度分步洗脱;含目的单抗的洗脱馏分再上凝胶过滤柱纯化,用PB缓冲溶液（pH7.2, 20mmol/L）洗脱,获得目的单抗4E5,其生物学活性高、纯度大于95%,抗体总回收率达61%。     

虫媒黄病毒亚基因组RNA

黄病毒是一大科人类致病性的单股正链RNA病毒。黄病毒包括登革病毒、西尼罗脑炎病毒及日本脑炎病毒等成员,主要径通过节肢动物的叮咬进行传播,即为虫媒黄病毒。研究发现,在虫媒黄病毒复制过程中,除病毒基因组正链RNA、互补的负链RNA及两者的杂合RNA分子外,在病毒感染细胞后还能产生一种病毒亚基因组RNA(subgenomic RNA,sgRNA)。近年对这种sgRNA展开了比较多的研究,结果表明,其产生机制与已知的其他病毒sgRNA产生机制并不相同。该sgRNA的产生与虫媒黄病毒基因组3’非编码区所形成的保守二级结构有关,同时宿主核酸酶对其的不完全降解亦有重要作用。虫媒黄病毒基因组3’非编码区中带有多个与病毒复制相关的RNA元件,而sgRNA的发现有助于全面地认识病毒RNA与宿主RNA代谢途径间的相互作用,为最终阐明病毒的致病机制奠定基础。     

红砂基因组大小变异及物种分化

红砂(Reaumuria soongarica, 柽柳科)是广泛分布于亚洲内陆干旱区温带荒漠的建群灌木, 该物种内部经历过分化和杂交事件, 是研究荒漠植物多样性发生和杂交物种形成的理想模型。然而, 红砂不同群体的倍性水平尚不清楚, 制约了对其物种形成机制的深入研究。为了确定红砂不同支系的倍性及基因组大小变异模式, 本研究以红砂幼苗根尖为实验材料, 以野生番茄(Solanum pimpinellifolium)作为内标物种, 利用流式细胞术对分别来自北疆支系及其可能的亲本支系(东部和西部支系)的共8个红砂群体进行了DNA 1C-值测定和分析。结果显示: 红砂东部支系的DNA 1C-值(1.149 ± 0.012 pg)略小于西部支系的1C-值(1.195 ± 0.031 pg)。北疆支系中阜康(FK)和沙湾(SW)群体的DNA 1C-值处于东、西支系的1C-值之间, 而火烧山(HSS)和五彩城(WCC)群体的1C-值接近东、西支系1C-值的2倍。结合之前的分子标记结果, 我们推测北疆支系中阜康和沙湾群体为东、西部支系的同倍体杂交种群, 而火烧山和五彩城群体属于异源四倍体杂交种群。不同倍性的北疆群体起源于不同的杂交事件, 可以划归为不同的物种。     

<Emphasis Type="Italic">qNCLB7.02</Emphasis>, a novel QTL for resistance to northern corn leaf blight in maize

Northern corn leaf blight (NCLB), which is caused by the hemibiotrophic fungal pathogen Setosphaeria turcica, is a devastating foliar disease that results in considerable maize yield losses. In the present study, quantitative trait locus (QTL) analysis was conducted across two environments using an ultra-high-density bin map constructed using recombinant inbred lines (RILs) derived from a cross between Ye478 and Qi319. A total of 11 QTLs, located on chromosomes 1, 4, 5, 6, 7, 8, 9, and 10, were detected that confer resistance to physiological race 0 of NCLB. Each QTL could explain 3.53–15.29% of the total phenotypic variation in disease resistance after artificial inoculation in two environments. Among these QTL, qNCLB7.02, which is located on chromosome 7, had the largest effect, accounting for 10.11 and 15.29% of the phenotypic variation in resistance in two field trials and BLUP. The common confidence interval (CI) for qNCLB7.02 was 1.4 Mb, according to the B73 RefGen_v3 sequence. The resistance effect of qNCLB7.02 was validated in 2016 by using chromosome segment substitution lines (CSSLs) derived from Qi319 as the donor in the genetic background of Ye478. The type 6 CSSL, which harbors introgressed qNCLB7.02, was found to be significantly associated with resistance to NCLB by linked marker bnlg1808 and exhibited greater resistance than the other CSSLs that did not carry this QTL (P?=?0.0008). The combination of linkage mapping in RILs and validation in CSSLs is a powerful approach for the dissection of QTL for disease resistance in maize.     

A hybrid two-component system protein from Azospirillum brasilense Sp7 was involved in chemotaxis

We here report the sequence and functional analysis of org35 of Azospirillum brasilense Sp7, which was originally identified to be able to interact with NifA in yeast-two-hybrid system. The org35 encodes a hybrid two-component system protein, including N-terminal PAS domains, a histidine kinase (HPK) domain and a response regulator (RR) domain in C-terminal. To determine the function of the Org35, a deletion-insertion mutant in PAS domain [named Sp7353] and a complemental strain Sp7353C were constructed. The mutant had reduced chemotaxis ability compared to that of wild-type, and the complemental strain was similar to the wild-type strain. These data suggested that the A. brasilense org35 played a key role in chemotaxis. Variants containing different domains of the org35 were expressed, and the functions of these domains were studied in vitro. Phosphorylation assays in vitro demonstrated that the HPK domain of Org35 possessed the autokinase activity and that the phosphorylated HPK was able to transfer phosphate groups to the RR domain. The result indicated Org35 was a phosphorylation-communicating protein.     

不同施肥方法对马来沉香和土沉香苗期根系生长的影响

以珍贵树种马来沉香、土沉香1年生播种苗木为材料进行试验,研究指数施肥、平均施肥对2种沉香苗期根系生长动态及对N的响应特征。结果表明,经氮素处理的马来沉香、土沉香的根系生物量、根系长度、根系表面积、根系平均直径、根体积等指标均显著高于对照处理(P<0.05)。经指数施肥处理的苗木根系生长及各形态指标均高于平均施肥处理。同一时期在相同施肥处理方式下,马来沉香苗根系生长及根系形态指标值均高于土沉香。洛伦兹模型对不同施肥方法处理下马来沉香、土沉香苗木生长指标与根系生物量进行拟合,具有较高的R²(0.95-0.99)和较低的RSMD(0.538-2.352);抛物面模型对不同施肥方法处理下马来沉香、土沉香苗木生长指标与比根长进行拟合,具有较高的R²(0.92-0.99)和较低的RSMD(3.218-6.692)。     

榕江香猪生长激素基因的鉴定及功能分析

生长激素是调节动物生长的主要激素.本研究应用聚合酶链式反应技术从榕江香猪的基因组文库中分离出1.903kb生长激素基因.克隆的生长激素基因由五个外显子和四个内含子组成.榕江香猪生长激素基因的碱基序列与已知四个国外猪种和9个中国地方猪种之间的同源性为97%～99%,其间的差异主要集中在内含子2和4.通过限制性内切酶（DdeI,NarI,BsmNI）分析,鉴定出榕江香猪生长激素基因的五个多态性位点,分别位于5＇-侧翼区274（T/C）位点,外显子2的622（G/A）和631（G/A）位点,内含子2中的841（T/C）以及外显子4中的1 358（A/G）位点.同时,1 358（A/G）位的碱基改变导致榕江香猪生长激素成熟肽第108位异亮氨酸替换,三维结构分析表明,异亮氨酸的存在可能导致生长激素与受体间亲合力降低.     

正常大鼠脑CT灌注成像的可重复性研究

目的:评价多层螺旋CT灌注成像对正常大鼠脑血流动力学观测结果的可重复性.方法:分别对10只健康Wistar大鼠间隔2d进行CT灌注扫描,两组原始灌注数据由2名放射科医师分别进行5次后处理得出CBF、CBV和MTT值.分析观察者内和观察者间观测结果的可重复性,以及对同一组研究对象间隔2d两次检查结果的一致性.结果:多层螺旋CT对Wistar大鼠脑所采集的灌注原始数据在观察者内和观察者间观测结果均无统计学差别(P＞0.05),并具有很好的线性(CBF和CBV值)或等级(MTT值)正相关(P＜0.01).对同一组研究对象间隔2d的两次CT灌注成像结果也存在同样好的重复性.结论:多层螺旋CT灌注成像对于Wistar大鼠脑部血流动力学观测具有很高的精密度和准确性,完全适于小型动物模型脑部血流动力学的研究.     

植物MicroRNA的特点与研究方法

MicroRNAs(miRNAs)是一类在植物、动物、单细胞藻类和病毒等中存在的具有调控基因表达作用的内源非编码小RNA(small RNAs).在植物中,miRNAs主要依靠与靶基因之间完全或近乎完全的互补配对切割靶基因或翻译抑制实现其调控功能.主要综述植物miRNA的特点,并介绍miRNA的获得方式、靶基因预测及验证方法.     

徒手淋巴引流对全膝关节置换术后肢体肿胀程度及血液炎性指标的影响

目的:探讨徒手淋巴引流对全膝关节置换术(TKA)后肢体肿胀程度及血液炎性指标的影响。方法:选取2018年12月～2019年12月广东省中医院珠海医院收治的拟行初次TKA手术的膝骨关节炎(KOA)患者70例,随机分为观察组和对照组各35例,对照组按TKA术后常规方案治疗,观察组在对照组基础上增加徒手淋巴引流术,比较两组术前,术后1 d、4 d、7 d、2周、4周、8周肤温、肿胀程度及血液炎性指标,评估患者术后康复情况及不良事件发生情况。结果:两组术后2周肤温低于术后7 d,术后4周低于术后2周,术后8周低于术后4周,差异均有统计学意义(P0.05)。观察组术后2周、4周、8周肤温均低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。两组术后1 d肢体肿胀度低于术后4 d,术后2周低于术后7 d,术后4周低于术后2周,术后8周低于术后4周,差异均有统计学意义(P0.05)。观察组术后7d、2周、4周、8周肢体肿胀度均低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。两组术后4 d白细胞计数(WBC)水平低于术后1 d,而超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平高于术后1 d;两组术后7 d WBC、hs-CRP及血沉(ESR)水平均低于术后4 d,且术后2周低于术后7 d,术后4周低于术后2周,术后8周低于术后4周,差异均有统计学意义(P0.05)。观察组术后7 d hs-CRP水平均低于对照组,术后2周、4周、8周hs-CRP、ESR水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:TKA术后应用徒手淋巴引流手法能有效减轻患者术后肢体肿胀程度,缩短炎症周期,降低炎症反应,在临床上值得推广应用。