南瓜种子超氧化物歧化酶某些性质的研究

采用NBT光化还原法,分别研究了不同缓冲溶液、pH值、温度及抑制剂等因素对南瓜种子SOD活性的影响,并对其类型进行了鉴定,结果表明:南瓜种子萌芽过程中SOD的合成以Mn-SOD为主,其热稳定性很高,在酸性条件下活性完全丧失,在pH8.0 Na2HPO4-NaH2PO4缓冲溶液下酶活性最高;酶活性容易被β-巯基乙醇抑制,对脲及DMSO有一定的耐受性。     

Single protein production (SPP) system in Escherichia coli

Here, we provide a detailed protocol for the single protein production (SPP) system, which is designed to produce only a single protein of interest in living Escherichia coli cells. Induction of MazF, an mRNA interferase that cleaves RNA at ACA nucleotide sequences, results in complete cell growth arrest. However, if mRNA encoding a protein of interest is engineered to be devoid of ACA base triplets and is induced at 15 degrees C using pCold vectors in MazF-expressing cells, only the protein from this mRNA is produced at a yield of 20-30% of total cellular protein; other cellular protein synthesis is almost completely absent. In theory, any protein can be produced by the SPP system. Protein yields are typically unaffected even if the culture is condensed up to 40-fold, reducing the cost of protein production by up to 97.5%. The SPP system has a number of key features important for protein production, including high-yield and prolonged production of isotope-labeled protein at a very high signal-to-noise ratio. The procedure can be completed in 7 d after cloning of an ACA-less target gene into the expression system.     

稀释液中添加海藻糖对山羊精子功能和膜完整性的影响

选用5只年龄为3～4岁的波尔山羊公羊研究在稀释液中添加海藻糖对山羊精子功能和膜完整性的影响。山羊精子分别用含6.6 mmol/L、13.2 mmol/L、19.8 mmol/L、26.4 mmol/L、39.6 mmol/L、52.9 mmol/L、66.1mmol/L、79.3 mmol/L的不同海藻糖的Tris-柠檬酸-葡糖糖(TCG)稀释液(卵黄:18%;甘油:6%)稀释和冷冻。结果表明:39.6 mmol/L、52.9 mmol/L、66.1 mmol/L、79.3 mmol/L组降温后的精子活率显著(P<0.05)降低;52.9 mmol/L、66.1 mmol/L、79.3 mmol/L组降温后的精子畸形率和39.6 mmol/L组降温后的膨胀精子率显著(P<0.05)提高。26.4 mmol/L组和39.6 mmol/L组冻融后的精子活率显著(P<0.05)高于对照组;66.1mmol/L和79.3 mmol/L组冻融后的精子活率、畸形率分别显著(P<0.05)低于和高于对照组。19.8 mmol/L、26.4 mmol/L、39.6 mmol/L组冻融后精子获能率显著(P<0.05)低于对照组。39.6 mmol/L组冻融后顶体完整率和膨胀精子率显著(P<0.05)高于对照组,而66.1 mmol/L组和79.3 mmol/L组显著(P<0.05)低于对照组。39.6 mmol/L组的受胎率显著(P<0.05)高于对照组,而66.1mmol/L组和79.3 mmol/L组的受胎率显著(P<0.05)低于对照组。结果表明,在含18%的卵黄(v/v)、6%甘油(v/v)的TCG稀释液中,添加适宜浓度(26.4mmol/L和39.6 mmol/L)海藻糖,可显著提高山羊精子功能和膜的完整性。     

Xenopus tropicalis 免疫球蛋白轻链重组多样性的研究

热带爪蟾(Xenopus tropicalis)是两栖类动物免疫球蛋白研究中常用的模式生物之一,其免疫球蛋白轻链的类型和基因结构已经研究清楚,3种轻链类型分别为：ρ、σ和typeⅢ．通过克隆测序,并对3种轻链重组cDNA克隆的VJ基因片段的连接方式进行了分析,发现在表达的3种轻链中,仅有少量的N和P核苷酸的插入．σ轻链基因的体细胞VJ重组主要依靠微同源重组．而在ρ和typeⅢ 轻链中这种方式不是主要的,ρ和typeⅢ轻链或是通过VJ基因片段的直接连接或是部分删除后连接．研究结果为研究免疫球蛋白轻链多样性产生的机制提供了重要的线索．     

猪圆环病毒II型ORF2基因在酵母中的高效分泌表达

为了建立一种简便的检测猪圆环病毒2型(PCV2)的方法,本实验将PCV2 的ORF2 基因片段整合到巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)菌株X 33染色体上,构建了X 33(pPICZa ORF2)重组工程菌。经甲醇诱导后,成功的表达出ORF2基因片段。经过Bradford 蛋白质总含量测定和凝胶薄层扫描结果表明,表达产物占重组工程菌培养上清总蛋白的58%,表达量可达47mg/ L。间接ELISA结果初步表明重组表达产物具有良好的抗原性,能够有效地区分PCV2型病毒标准阳性与阴性血清。     

八宝景天的组织培养和快速繁殖

1植物名称八宝景天(Sedumspectabile‘StarDust’)。2材料类别顶芽茎段。3培养条件以MS为基本培养基。(1)启动培养基:MS+2,4-D0.5mg·L-1(单位下同)+KT0.5+6-BA0.5;(2)不定芽增殖培养基:MS+6-BA0.1+NAA0.1;(3)生根培养基:1/2MS。以上培养基均含3%蔗糖、0.6%琼脂,pH5.8￣6.0。培养温度(25±2)℃,光强40￣60μmol·m-2·s-1,光照时间16h·d-1。4生长与分化情况4.1无菌材料的处理从圃地栽植的植株上剪取幼嫩顶芽茎段,用洗涤剂溶液浸泡、振荡20min,流水冲洗1￣2h备用。在超净工作台上,用70%酒精灭菌10￣15s,0.1%HgCl2消毒2min,无菌水…     

黄姜中薯蓣皂甙元的提取及定性定量分析

对黄姜中提取的薯蓣皂甙元进行红外和紫外可见波谱扫描,与标准品谱图对比分析,可知提取出的皂甙元与薯蓣皂甙元标准品有相同的结构。用分光光度法测定黄姜中薯蓣皂甙元的含量,以香荚兰醛-高氯酸-冰醋酸的加入顺序,在80℃水浴中加热15min,显色30min后,在542nm处测定吸收值能达到最佳值,最后得出皂甙元含量为2.27%,RSD为1.1%,回收率在97.2%~98.8%之间。     

DNAJC10基因在鼻咽癌中的表达及表达下调机制的研究

运用RT-PCR检测候选抑瘤基因DNAJC10在鼻咽癌组织中的表达,运用甲基化特异性PCR(MSPCR)技术、LOH和测序等技术分别检测DNAJC10基因在鼻咽癌组织中的甲基化状况、LOH和启动子突变情况.结果表明,DNAJC10基因在肿瘤组织中较对照慢性鼻咽炎组织表达明显下调(P<0.05).DNAJC10在鼻咽癌中不表现高甲基化,其LOH的缺失率为6.25%,突变率为66.7%.因此,DNAJC10基因的表达下调主要是其遗传改变(LOH和突变)所致.     

湛江市红树林资源及其可持续利用

广东省湛江市现有红树林面积7242.0hm²,人工造林未成林25.6hm²,天然更新红树林509.4hm²,另有红树林宜林地9688.6hm²。红树林及其伴生植物主要有木榄(Bruguiera gymnorrhiza)、秋茄(Kandelia candel)、无瓣海桑(Sonneratia apetala)等15科24种。由于毁林养虾、养鱼等导致1980～2001年占用红树林地面积6363.6hm²。从总体上看,湛江红树林种类多,群落类型丰富;红树林面积大幅减少,影响区域社会经济发展;除乡土种外,无瓣海桑是一种较成功的外来引树种;宜林地多,但人工造林保存率不高;破坏红树林,挖塘养殖依然较普遍。为了实现湛江红树林的可持续发展,需要加强下列工作:建立自然保护区加强对现有红树林湿地的保护;开展红树林湿地生态系统资源监测和鸟类环志;科学规划后加快红树林的恢复和重建;积极推动退塘还林并合理利用红树林;依法保护管理好红树林;多途径筹集保护资金;加强红树林、湿地的保护和宣传。