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191.
Association of the catalytic subunit of aspartate transcarbamoylase with a zinc-containing polypeptide fragment of the regulatory chain leads to increases in thermal stability. 总被引:1,自引:1,他引:0
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C. B. Peterson B. B. Zhou D. Hsieh A. N. Creager H. K. Schachman 《Protein science : a publication of the Protein Society》1994,3(6):960-966
The regulatory enzyme aspartate transcarbamoylase (ATCase), comprising 2 catalytic (C) trimers and 3 regulatory (R) dimers, owes its stability to the manifold interchain interactions among the 12 polypeptide chains. With the availability of a recombinant 70-amino acid zinc-containing polypeptide fragment of the regulatory chain of ATCase, it has become possible to analyze directly the interaction between catalytic and regulatory chains in a complex of simpler structure independent of other interactions such as those between the 2 C trimers, which also contribute to the stability of the holoenzyme. Also, the effect of the interaction between the polypeptide, termed the zinc domain, and the C trimer on the thermal stability and other properties can be measured directly. Differential scanning microcalorimetry experiments demonstrated that the binding of the zinc domain to the C trimer leads to a complex of markedly increased thermal stability. This was shown with a series of mutant forms of the C trimer, which themselves varied greatly in their temperature of denaturation due to single amino acid replacements. With some C trimers, for which tm varied over a range of 30 degrees C due to diverse amino acid substitutions, the elevation of tm resulting from the interaction with the zinc domain was as large as 18 degrees C. The values of tm for a variety of complexes of mutant C trimers and the wild-type zinc domain were similar to those observed when the holoenzymes containing the mutant C trimers were subjected to heat denaturation.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS) 相似文献
192.
采用Rotofor等电聚焦和分子筛技术纯化大肠杆菌表达的重组链激酶(r—SK),其纯度为97%。比活性1×106IU/mg,回收率41%。分析所纯化的r—SK N端氨基酸顺序证实其1—15个氨基酸顺序与SK基因的核苷酸顺序所示3联密码子一致。以纯化r—SK为抗原,通过杂交瘤技术构建了分泌抗r—SK单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞(4D11),该McAb属IgG1亚型.特异地作用于r-SK和C组口溶血性链球菌分泌的SK。用底物显色法测定该McAb可抑制SK对纤溶酶原的激活。Western blot法证实该McAb能识别分子量为16 250Da的r—SK的CNBr裂解片段。推测SK蛋白中第71残基至第237残基间的氨基酸顺序参与SK与纤溶酶原的结合。 相似文献
193.
仲彬草属5种植物的核型研究 总被引:11,自引:0,他引:11
本文对我国西部高原仲彬草属Kengyilia5种植物的核型进行了分析。它们的染色体数目均为2n=42,六倍体。核型是:糙毛鹅观草K.hirsuta,2n=6x=42=366+6sm;青海鹅观草K.kokonorica,2n=6x=42=36m+6sm:黑药鹅观草K.melanthera,2n=6x=42=38m+4sm;硬秆鹅观草K.rigidula,2n=6x=42=38m+4sm;窄颖鹅观草K.stenachyra,2n=6x=42=38m+4sm。它们的核型属于1B或2B型。染色体中均未发现随体。 相似文献
194.
195.
麦蛾的求偶行为与区分等级的方法 总被引:5,自引:2,他引:3
求偶行为是麦蛾的本能,主要由自身生理状态决定,雌蛾全是自发行为,雄蛾多是对异性信息刺激的反应。两性求偶行为都有固定发生程序,有明显的阶段性。本文按其阶段程序特点把两性求偶行为各分为3等9级。非求偶行为概作0等0级。等级数值大小反映了性兴奋强度,统计分析级别数值,就能确定个体或蛾群求偶行为的动态。 相似文献
196.
197.
人脑髓鞘碱性蛋白cDNA体外扩增、克隆和鉴定 总被引:3,自引:0,他引:3
采用聚合酶链反应(PCR)从人脑cDNA文库中扩增出600bp的髓鞘碱性蛋白(MBP)cDNA片段,与载体pGEM-3Zf(+)平端连接.重组质粒DNA转化宿主菌JM109,在含X-gal和IPTG的平板上直接筛选阳性克隆.限制性内切酶分析和成套引物扩增鉴定证明,该克隆含有7个外显子的21.5kD人脑MBP全长编码序列. 相似文献
198.
199.
不同性别黄鳝六种组织中LDH同工酶电泳谱的初步研究 总被引:3,自引:0,他引:3
本文报告了运用聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳研究不同性别黄鳝的血清、心肌、骨骼肌、肝、肾和生殖腺等六种组织器官中LDH同工酶。结果表明六种不同组织中LDH同工酶谱各不相同,具有明显的组织特异性。在不同性别中某些同一种组织的LDH同工酶谱也发生变化,这说明决定黄鳝LDH同工酶表达的因素在不同性别中有差异。 相似文献
200.
热带林茎流收集及计算方法探索 总被引:5,自引:0,他引:5
热带林茎流收集及计算方法探索周光益,吴仲民,李意德,陈步峰(中国林科院热带林业研究所,广州510520)CollectionandCalculationMethodsforStemflowinTropicalForest.¥ZhouGuangyi;W... 相似文献