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11.
12.
Cre/lox系统可以介导DNA的定点插入和定点删除,可利用其实现转基因动物中"友好位点"的重复利用及标记基因的有效删除.为直观地评估该系统介导的以上两种重组反应的效果,通过标记基因并利用大鼠乳腺癌细胞系SHZ-88进行了模型研究.首先构建了两个载体:a.整合载体pTE-lox2272-DsRed-loxP-GFP-loxP,含有红色荧光标记基因DsRed和绿色荧光标记基因GFP;b.置换载体pT-lox2272-neo-loxP,含有筛选标记基因neo,用以置换DsRed基因.然后,用整合载体转染SHZ-88细胞,并随机挑取了3个同时表达DsRed和GFP的稳定整合细胞克隆.随后用置换载体和Cre表达载体PBS185对以上每个克隆分别进行了3次共转染,通过G418筛选并扩增培养后,总共获得1 070个克隆.通过分析标记基因DsRed和GFP在这些克隆中的表达情况:Cre介导的删除效率为91.1%,定点置换效率为29.3%.最后对部分克隆进行了PCR和DNA印迹鉴定,分子鉴定结果与发光的表型状况一致.这一方法为Cre/lox系统在转基因家畜生产中的进一步应用提供了实验依据. 相似文献
13.
NO可能作为H2O2的下游信号介导ABA诱导的蚕豆气孔关闭 总被引:23,自引:1,他引:23
ABA、H2O2和硝普钠(SNP)均能诱导蚕豆气孔关闭.NO的清除剂c-PTIO可以减轻由ABA或H2O2所诱导的蚕豆气孔关闭的程度,而过氧化氢酶(CAT)则不能减轻NO诱导的气孔关闭程度.激光共聚焦显微检测结果显示,10μmo1/L的ABA处理后,胞内H2O2的产生速率明显高于NO的产生速率;CAT几乎可完全抑制ABA所诱导的DAF的荧光增加;外源H2O2能显著诱导胞内DAF的荧光增加;c-PTIO对ABA诱导的DCF荧光略有促进作用,但外源SNP不能诱导胞内DCF荧光增加.这些结果表明,在ABA诱导气孔关闭过程中,H2O2可能在NO的上游起作用并受NO的负反馈调节. 相似文献
14.
15.
Kopecky KJ Stepanenko V Rivkind N Voillequé P Onstad L Shakhtarin V Parshkov E Kulikov S Lushnikov E Abrosimov A Troshin V Romanova G Doroschenko V Proshin A Tsyb A Davis S 《Radiation research》2006,166(2):367-374
A population-based case-control study was conducted to estimate the radiation-related risk of thyroid cancer in persons who were exposed in childhood to (131)I from the Chernobyl accident of April 26, 1986 and to investigate the impact of uncertainties in individual dose estimates. Included were all 66 confirmed cases of primary thyroid cancer diagnosed from April 26, 1986 through September 1998 in residents of Bryansk Oblast, Russia, who were 0-19 years old at the time of the accident, along with two individually matched controls for each case. Thyroid radiation doses, estimated using a semi-empirical model based on environmental contamination data and individual characteristics, ranged from 0.00014 Gy to 2.73 Gy and had large uncertainties (median geometric standard deviation 2.2). The estimated excess relative risk (ERR) associated with radiation exposure, 48.7/Gy, was significantly greater than 0 (P = 0.00013) but had an extremely wide 95% confidence interval (4.8 to 1151/Gy). Adjusting for dose uncertainty nearly tripled the ERR to 138/Gy, although this was likely an overestimate due to limitations in the modeling of dose uncertainties. The radiation-related excess risk observed in this study is quite large, especially if the uncertainty of dose estimation is taken into account, but is not inconsistent with estimates previously reported for risk after (131)I exposure or acute irradiation from external sources. 相似文献
16.
基于2014年贫困户实地调查数据,运用集对分析和障碍度模型对宁夏海原县农户生计脆弱性及其胁迫因子进行实证分析.结果表明: 海原县农户生计脆弱性总体较高且呈现地貌和民族差异化,平原区、河谷川地山间洼地农户生计脆弱性低于土石山区、黄土梁区和中山地貌区;回汉混居村农户生计脆弱性高于纯回族与纯汉族村.农户自身必要资产的缺乏和外部地理环境敏感性的胁迫是海原县农户生计脆弱的深层原因.生计结构不合理与生计方式单一导致生计脆弱性长期积累;地理环境的不易改变使扶贫资源的地区可进入性降低.农户生计应对能力的提高需建立明确的村级水权分配制度,实施教育贫困户对口帮扶,加大生计方式多元化转型的成本投入,开发村域连锁综合商品市场.农户生计脆弱性的治理应把“公路村村通”建设放在“村村通工程”更突出的位置,坚持气象防灾和保险企业减灾相结合,开发农业生产保险系统. 相似文献
17.
18.
本工作应用心钠素放射免疫测定和分子杂交技术首次发现,吗啡耐受大鼠血浆心钠素水平显著降低,心房内心钠素含量明显升高,同时心房内心钠素特异性mRNA水平也相应提高,提示在吗啡耐受时大鼠心房内心钠素的合成和贮存增加,释放减少。 相似文献
19.
本文用脑室灌注和Fura2测定细胞内游离钙技术观察了地塞米松(dexamethasone,DEX)对家兔乙二醇双(2氨基乙醚)四乙酸性发热效应和下丘脑细胞内游离钙浓度([Ca2+]i)的影响,借此深入探讨地塞米松解热作用的中枢机制。结果发现:脑室灌注乙二醇双(2氨基乙醚)四乙酸(06nmol)引起家兔结肠温度明显升高,静脉注射地塞米松(5mg/kg)显著抑制家兔乙二醇双(2氨基乙醚)四乙酸性发热,地塞米松(60~120μmol/L)并不影响下丘脑细胞内[Ca2+]i,而事先脑室灌注抑制基因转录的放线菌素D(3nmol)则完全取消了地塞米松对乙二醇双(2氨基乙醚)四乙酸性发热的解热作用。这些结果提示:地塞米松显著抑制家兔乙二醇双(2氨基乙醚)四乙酸性发热,其机制与地塞米松激活脑内某些基因的表达有关,而与下丘脑神经细胞跨膜钙离子流无关。 相似文献
20.
表面等离子共振(surface plasmon resonance,SPR)技术旨在检测物体表面附近折射率的变化,其特点是无标记、实时、灵敏和快速,该技术多用于研究分子的相互作用,包括动力学、效率常数和大分子构象变化等。电化学(electrochemical,EC)技术是一项用于定性定量研究电子转移、物质氧化还原、界面吸附等过程的成熟技术,具有简单、低成本和设备小型化的优点。现有的DNA杂交技术,例如光学、电化学或压电转导技术,主要关注于提高DNA杂交检测系统的选择性和灵敏度。传统的SPR在DNA分析方面,由于无法测量折射率的极小变化而在超灵敏检测中的应用受到限制。因此,随着纳米材料的研发和联用技术的飞速发展,SPR与EC联用的生物传感器研究越来越成为人们关注的热点。近年来,关于SPR和EC联用在DNA检测方面的综述鲜有报道。对SPR和EC检测DNA的技术原理、联用方法、应用进展等方面作出了简要的介绍,以期为表面等离子共振和电化学联用的DNA传感器相关研究提供参考。 相似文献