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41.
Kelem Kassahun Pei Hu Mark P. Grillo Margaret R. Davis Lixia Jin Thomas A. Baillie 《Chemico-biological interactions》1994,90(3):253-275
The ability of 2-n-propyl-4-pentenoic acid (Δ4-VPA) and 2-n-propyl-2(E)-pentenoic acid ([E]-Δ2-VPA), two unsaturated metabolites of valproic acid (VPA), to form reactive intermediates, deplete hepatic glutathione (GSH) and cause accumulation of liver triglycerides was investigated in the rat. With the aid of ionspray liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS), three GSH adducts were detected in the bile of Δ4-VPA-treated animals and were identified as 4-hydroxy-5-glutathion-S-yl-VPA-γ-lactone, 5-glutathion-S-yl-(E)-Δ3-VPA and 3-oxo-5-glutathion-S-yl-VPA. A fourth conjugate was identified tentatively as 4-glutathion-S-yl-5-hydroxy-VPA. Quantitative analysis of the corresponding N-acetylcysteine (NAC) conjugates in urine indicated that metabolism of Δ4-VPA via the GSH-dependent pathways accounted for approximately 20% of an acute dose (100 mg kg−1 i.p.). In contrast, when rats were given an equivalent dose of (E)-Δ2-VPA, only one GSH adduct (5-glutathion-S-yl-(E)-Δ3-VPA) was detected at low concentrations in bile. In vitro experiments with rat liver mitochondria demonstrated that Δ4-VPA undergoes coenzyme A- and ATP-dependent metabolic activation in this organelle via the β-oxidation pathway to intermediates which bind covalently to proteins. When liver homogenates and hepatic mitochondria from rats injected with Δ4-VPA, (E)-Δ2-VPA or VPA were analyzed for GSH content, it was found that only Δ4-VPA depleted GSH pools significantly. Treatment of rats with Δ4-VPA and (to a lesser extent) VPA led to an accumulation of liver triglycerides, whereas (E)-Δ2-VPA had no measurable effect. It is concluded that Δ4-VPA undergoes metabolic activation by both microsomal cytochrome P-450-dependent and mitochondrial coenzyme A-dependent processes, and that the resulting electrophilic intermediates, which are trapped in part by GSH, may mediate the hepatotoxic effects of this compound. In contrast, (E)-Δ2-VPA is not transformed to any appreciable extent to reactive metabolites, which thus accounts for the apparent lack of hepatotoxicity of this positional isomer in the rat. 相似文献
42.
Dan W. Urry D. Channe Gowda Shaoqing Peng Timothy M. Parker Naijie Jing R. Dean Harris 《Biopolymers》1994,34(7):889-896
Commonly a key element enabling proteins to function is an amino acid residue or residues with functional side chains having shifted pKa values. This article reports the results on a set of protein-based polymers (model proteins) that exhibit hydrophobic folding and assembly transitions, and that have been designed for the purpose of achieving large hydrophobic-induced pKa shifts by selectively replacing Val residues by Phe residues. The high molecular weight polypentapeptides, actually poly (tricosapeptides) with six varied pentamers in fixed sequence, were designed and synthesized to have the same amino acid compositions but different proximities between a single aspartic acid residue and 5 Phe residues per 30 residues. With the 5 Phe residues distal from the Asp residue, the observed pKa shift was 2.9 when compared to the Val-containing reference. With the 5 Phe residues within 1 nm of the Asp residue, the pKa shift was 6.2. This represents a free energy of interaction of 8 kcal/moles. To our knowledge, this is the largest pKa shift documented for an Asp residue in a polypeptide– or protein–water system. Data are reviewed that do not support the usual electrostatic arguments for pKa shifts of charge–charge repulsion and/or unfavorable ion self-energies arising from displacement of water by hydrophobic moieties, but rather the data are interpreted to indicate the presence of an apolar–polar repulsive free energy of hydration, which results from a potentially highly cooperative competition between apolar and polar species for hydration. © 1994 John Wiley & Sons, Inc. 相似文献
43.
A cDNA clone of the geneLhca2 encoding a photosystem I (PSI) type II chlorophylla/b-binding protein was isolated fromArabidopsis thaliana. The isolation of this, the fourth PSI cab gene fromArabidopsis, confirms a previous report [1] that indicatedArabidopsis may contain all four PSI cab genes identified in other plant species.Lhca2 is a single-copy gene as are the other knownArabidopsis PSI cab genes. The patterns of developmental expression and tissue-specific regulation ofLhca2 are similar to those of other PSI and PSII cab genes, but the light induction pattern and the steady-state mRNA level ofLhca2 are distinct. This suggests that a different mechanism may be employed to regulate the expression ofLhca2. 相似文献
44.
质体醌重组的D1/D2/Cytb559复合物的荧光衰减动力学和光破坏作用 总被引:3,自引:0,他引:3
光系统Ⅱ反应中心D1/D2/Cytb559 在分离纯化过程中失去了电子受体QA 和QB,人工合成的质体醌可以与D1/D2/Cytb559 复合物发生重组。癸基质体醌(DPQ)与D1/D2/Cytb599 复合物的重组导致该复合物的荧光强度下降及发射光谱蓝移,同时两个与光化学活性相关的长寿命(24 ns和73 ns)荧光衰减组分占整个荧光的百分数下降,这些结果表明DPQ作为Pheo- 的电子受体,限制了P680+ ·Pheo- 的电荷重组。DPQ 的加入对D1/D2/Cytb559复合物中Chla 分子的光破坏敏感性影响不大,但β-胡萝卜素在加入DPQ 之后可以被光照破坏,这个过程可能与β-胡萝卜素的生理功能相关。 相似文献
45.
几种濒危植物及其近缘类群总DNA的提取与鉴定 总被引:122,自引:0,他引:122
用低pH 介质,高盐沉淀蛋白质方法成功地从银杉(Cathaya argyrophylla Chun etKuang)、矮牡丹(Paeonia suffruticosa var. spontanea)、南川升麻(Cim icifuga nanchuanensisHsiao)、裂叶沙参(Adenophora lobophylla)的同属种泡沙参(A. potaninii)等植物中提取和部分纯化了细胞总DNA,并对其产率、质量和纯度作了鉴定。此方法的关键是用了一个低pH提取介质,它能有效防止组织破碎及沉淀大量材料时的电离化作用及酚化合物的进一步氧化。所得DNA 不需经氯化铯梯度离心或柱层析,直接可用于限制性片断长度多态性(RFLP)及随机扩增的DNA多态性(RAPD)等分子水平的遗传标记。为检测濒危植物的遗传多样性提供了一套迅速、简便和可靠的技术方案 相似文献
46.
杭州西湖水质预测方法和结果分析 总被引:1,自引:0,他引:1
本文利用二维对流扩散模型对西湖水质总磷浓度进行预测,给出方程的理论基础,编制FORTRAN77程序,在386微机上实现预测,并对预测结果作了较为详细的分析.本模型对水质环境防治决策具有实际意义. 相似文献
47.
精子作载体的转基因鱼研究 总被引:6,自引:0,他引:6
本文报道了以精子为载体将美洲拟蝶抗冻蛋白基因导入罗非鱼卵,构建转基因鱼的方法,此法简单易行。斑点杂文和SouthernBlot杂交结果表明,外源基因的整合率为18.1%,与其它方法构建转基因鱼的外源基因整合率相近。 相似文献
48.
从对照和用DEHP处理的大鼠肝脏提取核蛋白,以含酰基CoA氧化酶(AOX)基因表达调控部位的DNA片段和该基因的不同蛋白结合位点的DNA片段作为核蛋白结合反应的探针,通过凝胶电泳迁移率改变实验和Southwestern印迹分析检查了DEHP对AOX基因反式作用因子的影响。结果表明,降血脂药物DEHP可显著增加AOX基因反式作用因子的含量和(或)与基因的结合活性,在转录水平上促进基因的表达。 相似文献
49.
锌指基因是一种造血调节基因,编码锌指结构蛋白,主要在髓细胞中表达,促进髓细胞分化,在急性早幼粒白血病维甲酸治疗中,促使病情缓解。本文报道了我们从基因分子上研究锌指基因作用中,探索并建立了单向聚合酶链反应(PCR)扩增特定单链DNA,直接测序的新方法。它能产生质和量均佳的单链DNA,无需纯化即可直接用于测序,使复杂的测序研究简便易行,可在2,3天内完成。这种单向PCR扩增特定单链DNA直接测序的方法,经对锌指基因的cDNA测序,得到验证。此法不仅适用于疾病研究中的DNA测序,还可制各单链DNA探针,更利于基因结构组成的研究。 相似文献
50.
【目的】葡聚糖酶是饲用添加剂的重要成分,本研究旨在从湖羊消化道微生物中挖掘性质优良的GH9家族葡聚糖酶基因,用于研发新型饲用酶制剂。【方法】从湖羊瘤胃微生物cDNA中扩增IDSGLUC9-25基因,在大肠杆菌中进行异源表达,对重组蛋白进行诱导表达和纯化,研究重组蛋白的酶学性质和底物水解模式。【结果】IDSGLUC9-25基因编码527个氨基酸,包含一个CelD_N结构和一个GH9家族催化结构域;重组蛋白rIDSGLUC9-25分子量约为62.7 kDa,最适反应温度和pH分别为40℃和6.0,在30-50℃下活性较高,在pH 4.0-8.0范围内能够保持较高的稳定性,经pH 4.0-8.0缓冲液处理1 h后残余活性均大于90%;底物谱分析表明,rIDSGLUC9-25能催化大麦β-葡聚糖、苔藓地衣多糖、魔芋胶和木葡聚糖,比活性分别为(443.55±24.48)、(65.56±5.98)、(122.37±2.85)和(159.16±7.73) U/mg;利用薄层色谱法(thin layer chromatography, TLC)和高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)分析水解产物发现,rIDSGLUC9-25降解大麦葡聚糖主要生成纤维三糖(占总还原糖64.19%±1.19%)和纤维四糖(占总还原糖26.24%±0.12%),催化地衣多糖主要生成纤维三糖(占总还原糖78.46%±0.89%)。【结论】本研究报道了一种来自密螺旋体属细菌的内切β-1,4-葡聚糖酶IDSGLUC9-25 (EC 3.2.1.4),能高效催化多糖底物生成纤维三糖和纤维四糖,为研发饲用酶制剂和制备低聚寡糖建立基础。 相似文献