丹参线粒体和叶绿体微卫星标记开发及多样性分析

该研究通过生物信息学方法,对丹参线粒体、叶绿体基因组序列进行SSR位点搜索,利用Primer3.0软件在线设计SSR引物,通过PCR扩增,筛选出扩增效果好、多态性高的10对cpSSR引物和13对mtSSR引物,用于分析61份丹参品种的遗传多样性和鼠尾草属植物种间的通用性。结果显示：（1）从2条基因组序列中搜索到32个cpSSR位点和24个mtSSR位点,其中叶绿体单核苷酸的重复序列最多为31个,占96.9%,重复类型中以A/T形式的微卫星最为丰富。（2）23对SSR引物共检测出46个等位基因,平均每个SSR位点等位基因数是2个,有效等位基因数为1.566;预期杂合度(H_e)为0.346,高于双子叶植物的平均水平（H_e=0.190）;多态信息含量（PIC）为0.278,大于0.250小于0.500;Shannons信息指数为0.519,表明所采集的丹参呈中等水平的遗传多样性。（3）聚类分析表明,61份丹参材料的遗传相似系数在0.54~0.96之间,并在遗传相似系数为0.64处将 61份丹参分为6个亚群：四川、山东和安徽省的丹参聚集在Ⅰ和Ⅱ亚群中,说明四川中江、山东和安徽地区的丹参亲缘关系较近,而来源于四川中江的丹参分布于所有亚群,表明四川中江的丹参具有丰富的多态性。（4）通用性检测结果显示,11对mtSSR引物在9种鼠尾草属中的平均通用性比率为64.63%,通用性较高;9对cpSSR引物在10种鼠尾草属中的平均通用性比率为44.66%,通用性较低;引物cp5p、cp8p和cp10p在野芝麻亚科植物属间的通用性较好。研究表明,开发的23对SSR引物在鼠尾草属内具有很好的适用性,可以为该属种间的亲缘关系和种内遗传分化研究提供分子依据。     

光照-温度交互作用及不同氮源对拟柱孢藻生长的影响

为探讨不同环境因子对拟柱孢藻(Cylindrospermopsis raciborskii)生长的影响,对从广东省镇海水库分离的2株拟柱孢藻在不同的温度和光照组合,及不同氮源条件下的生长进行了研究。结果表明,在3种光强下,拟柱孢藻N1和N8藻株的生长随温度的上升而增加,均在28℃高光强下达到最大比生长速率,而N8藻株对低温的适应能力要高于N1藻株。拟柱孢藻N1和N8在各硝态氮浓度下均能正常生长,但仅能在中低浓度的铵态氮和尿素氮中生长,高浓度(128~247 mg L–1)的铵态氮和尿素氮会显著抑制藻细胞生长;在3种氮源下,N1藻株的比生长速率均显著大于N8藻株,这说明N1藻株对不同氮源的利用能力要高于N8藻株。因此,广东省的拟柱孢藻具株系多样性,喜好高温,适应较宽的光照范围,并可利用多种氮源用于生长,这可能是该地区拟柱孢藻水华频发的原因。     

云南小麦、西藏半野生小麦和普通小麦叶绿体DNA限制性内切酶图谱的研究

云南小麦(Triticum aestivum ssp.yunnanense King)和西藏半野生小麦(Triticum aestivum ssp.tibetanum Shao) 是我国西部地区特有的两个普通小麦(T.aestivum L.)亚种。我们采用改进的高离子强度法,提取云南小麦、西藏半野生小麦、普通小麦的两个品种(中国春和鄂恩1号)的叶绿体DNA, 并用7种限制性内切酶对它们的叶绿体DNA进行了酶切图谱分析。结果表明:在普通小麦及其两个亚种中没有叶绿体DNA的限制性片段长度差异,反映了叶绿体基因组在进化过程中相对的稳定性。 Abstract:Yunnan wheat(Triticum aestivum ssp. Yunnanense King) and Tibet semiwild wheat (Triticum aestivum ssp. Tibetanum Shao) are two endemic subspecies of common wheat (T. eastivum L.) in the west of China.Improved high ionic strength medium was adopted to extract the cpDNAs of Yunnan wheat,Tibet semiwild wheat and two cultivars of common wheat (Chinese Spring and Een 1).Restriction fragment analysis of cpDNAs was carried out with the use of 7 restriction enzymes.The results showed that there was no diversity of cpDNAs from common wheat and the two subspecies,indicating the conservatism of the chloroplast genome during the process of evolution.     

利用rRNA基因ITS-Ⅰ序列构建的大豆属(Glycine)12个种的种系关系

属于大豆属Glycine亚属10个种、Soja亚属2个种的24份材料的ITS-Ⅰ序列,通过PCR扩增,已克隆并测序.根据序列的同源性确定了这24份材料的种系关系.从重建的谱系树中可以看出一些原先划分的种中存在不同的基因组分化类型,如G.tomentella,G.canescens和G.tabacina,它们可能是被形态划分所遮蔽的种.     

用T7 RNA聚合酶体外转录合成大鼠肝tRNAIle

采用PCR技术从rec-M13mp18中扩增出120 bp的大鼠肝tRNA^Ile合成基因片段,经限制性内切酶BstNⅠ酶切后作为模板,利用T7 RNA聚合酶在体外无细胞体系转录由T7启动子带动的大鼠肝tRNA^Ile基因,生成不含修饰碱基的tRNA^Ile,并对体外转录反应条件进行了优化,回收的tRNA产量可达DNA模板量的40倍.     

在人胃癌MGC80-3细胞中PKA-RⅡ和PKC-α两套信使激酶系统亚类对c-myc和c-H-ras表达的共调作用关系

在前一实验基础上,我们进一步研究了人胃癌细胞系(MGC 80-3)的PKA-RⅡ和PKC-α对癌基因的共调作用。MGC 80-3细胞在HMBA诱导分化过程中c-myc和c-H-ras的表达抑制时,PKA-RⅡ的表达从胞质转向核内,而PKC-α则从核内转向胞质表达。当HMBA诱导细胞分化的同时,加入PKA抑制剂阻断cAMP-PKA通路,此时PKA-RⅡ仍在胞质表达,而PKC-α的表达又移位入核,c-myc和c-H—ras则重新表达。这显示了癌基因表达变化的调节和激酶亚类核移位的信息传递密切相关,它表现出两套信号系统对癌基因表达的共调作用。     

大鼠最后区内微量注射血管紧张素Ⅱ对肾脏排钠的影响

已知最后区存在血管紧张素ⅡＡ（Ⅱ）受体,并可感受血中ＡⅡ水平的变化,本文采用微量注射ＡⅡ于ＡＰ的方法,观察了ＡＰ和肾功能的关系。结果：ＡＰ内微量注射ＡⅡ（２．２０ｎｇ）引起肾小球滤过率（ＧＦＲ）,肾血浆流量（ＲＰＦ）,尿钠排泄（ＵＮａＶ）的增加（Ｐ〈０．０５）。该作用可被ＡＰ内微量注射ＡⅡ拮抗剂ｓａｒａｌａｓｉｎ或切断（Ｐ〈０．０５）。而静脉注射ｓａｒａｌａｓｉｎ却不能阻断该作用。微量注射ＡⅡ于弧     

硝基左旋精氨酸对睡眠抑制作用的机制研究

本文观察了硝基左旋精氨酸（Ｌ－ＮＮＡ,５０ｍｇ／ｋｇ,ｉｐ）和Ｌ－精氨酸（Ｌ－ａｒｇ,１１０ｍｇ／ｋｇ,ｉｐ）对慢性植入电极的大鼠睡眠－觉醒周期的影响及中缝核５－羟色胺（５－ＨＴ）神经元免疫阳性反应的变化。结果表明：Ｌ－ＮＮＡ显著抑制慢波睡眠和快眼动睡眠,使平均动脉压（ＭＡＰ）升高。Ｌ－ａｒｇ则使ＭＡＰ显著降低,对睡眠无明显影响。预先给予Ｌ－ａｒｇ可逆转Ｌ－ＮＮＡ的效应。腹腔给予Ｌ－ＮＮＡ后２ｈ,     

Thermostability of photosynthesis in two new chlorophyllb-less rice mutants

Leaves of the two new chlorophyllb-less rice mutants VG28-1, VG30-5 and the wild type rice cv. Zhonghua 11 were subjected to temperatures 28, 36, 40, 44 and 48°C in the dark for 30 min or gradually elevated temperature from 30°C to 80°C at 0.5°C/min. The thermostability of photosynthetic apparatus was estimated by the changes in chlorophyll fluorescence parameters, photosynthetic rate and pigment content, chloroplast ultrastructure and tissue location of H₂O₂ accumulation. There were different patterns of F_o-temperature curves between the Chlb-less mutants and the wild type plant, and the temperature of F_o rising threshold was shifted 3°C lower in the Chlb-less mutants (48°C) than in the wild type (51°C). At temperature up to about 45°C, chloroplasts were swollen and thylakoid grana became misty accompanied with the complete loss of photosynthetic oxygen evolution in the two Chlb-less mutants, but chloroplast ultrastructure in the wild type showed no obvious alteration. After 55°C exposure, the disordered thylakoid and significant H₂O₂ accumulation in leaves were found in the two Chlb-less mutants, whereas in the wild type plant, less H₂O₂ was accumulated and the swollen thylakoid still maintained a certain extent of stacking. A large extent of the changes in qP, NPQ and F_v/F_m was consistent with the Pn decreasing rate in the Chlb-less mutants during high temperature treatment as compared with the wild type. The results indicated that the Chlb-less mutants showed a tendency for higher thermosensitivity, and loss of Chlb in LHC II could lead to less thermostability of PSII structure and function. Heat damage to photosynthetic apparatus might be partially attributed to the internal oxidative stress produced at severely high temperature.     

饥饿和再投喂对虎斑乌贼幼体存活、生长和消化酶活力的影响

本文探究了饥饿胁迫与饥饿后再投喂对虎斑乌贼幼体存活率、生长、行为、肝体比、摄食率以及消化酶活力的影响.在室内控制条件下开展了幼体(初始体质量为4.95±0.48 g)的饥饿(0、1、2、3、4、5、6 d)和再投喂(15 d)试验.结果表明: 不同饥饿时间对虎斑乌贼的幼体存活率、体质量降低率、肝体比和消化酶活力影响显著.随着饥饿胁迫时间的增加,其存活率、肝体比呈下降趋势,其中饥饿3 d后,存活率开始明显下降,体质量降低率明显增大,幼体出现喷墨、互相残杀等异常行为;4种消化酶活力呈先下降后上升的趋势,淀粉酶活力以饥饿4 d组最低 (0.07±0.02 U·mg^-1·prot^-1);脂肪酶活力以饥饿2 d组最低(18.47±2.07 U·g^-1·prot^-1),饥饿6 d组最高(57.60±3.98 U·g^-1·prot^-1),胃蛋白酶活力和胰蛋白酶活力以饥饿5 d组(1.98±0.59 U·mg^-1·prot^-1)和饥饿4 d(186.68±20.72 U·mg^-1·prot^-1) 最低.饥饿处理结束后,经15 d再投喂,各试验组存活率、特定生长率、肝体比和摄食率差异显著,幼体的存活率、特定生长率、肝体比和摄食率均与饥饿处理时间呈负相关;饥饿1和2 d组与对照组的存活率、特定生长率和肝肝体比无显著差异,而饥饿3～6 d组显著低于对照组;饥饿1～2 d组的摄食率明显高于对照组,而饥饿6 d组的摄食率明显小于对照组;各组淀粉酶与脂肪酶活力无显著差异,胃蛋白酶与胰蛋白酶活力差异显著,均以对照组最高(胃蛋白酶活力7.06±0.64 U·mg^-1·prot^-1,胰蛋白酶活力914.67±26.54 U·mg^-1·prot^-1),饥饿6 d组最低(胃蛋白酶活力3.21±0.57 U·mg^-1·prot^-1,胰蛋白酶活力660.04±37.92 U·mg^-1·prot^-1).说明虎斑乌贼的幼体饥饿不可逆点(PNR)为第6天,且不能补偿生长.