全文获取类型
收费全文 | 22512篇 |
免费 | 1861篇 |
国内免费 | 3194篇 |
出版年
2024年 | 68篇 |
2023年 | 361篇 |
2022年 | 739篇 |
2021年 | 1244篇 |
2020年 | 834篇 |
2019年 | 1088篇 |
2018年 | 918篇 |
2017年 | 757篇 |
2016年 | 1013篇 |
2015年 | 1424篇 |
2014年 | 1728篇 |
2013年 | 1727篇 |
2012年 | 2067篇 |
2011年 | 1837篇 |
2010年 | 1216篇 |
2009年 | 1044篇 |
2008年 | 1224篇 |
2007年 | 1055篇 |
2006年 | 1021篇 |
2005年 | 800篇 |
2004年 | 758篇 |
2003年 | 706篇 |
2002年 | 632篇 |
2001年 | 651篇 |
2000年 | 501篇 |
1999年 | 383篇 |
1998年 | 235篇 |
1997年 | 202篇 |
1996年 | 207篇 |
1995年 | 174篇 |
1994年 | 139篇 |
1993年 | 117篇 |
1992年 | 138篇 |
1991年 | 116篇 |
1990年 | 105篇 |
1989年 | 67篇 |
1988年 | 50篇 |
1987年 | 55篇 |
1986年 | 31篇 |
1985年 | 35篇 |
1984年 | 25篇 |
1983年 | 30篇 |
1982年 | 13篇 |
1981年 | 5篇 |
1980年 | 6篇 |
1973年 | 2篇 |
1972年 | 2篇 |
1959年 | 3篇 |
1956年 | 2篇 |
1950年 | 3篇 |
排序方式: 共有10000条查询结果,搜索用时 109 毫秒
981.
982.
蒙古沙鼠脑缺血后大脑皮质Calretinin(CR)的表达变化 总被引:2,自引:2,他引:0
目的:观察蒙古沙鼠前脑短暂缺血后前额皮质Calretinin(CR)的表达变化,为进一步研究其功能及治疗提供形态学依据。方法:24只健康雄性长爪鼠随机分为正常组对照组(6只)和缺血组(18只),夹闭蒙古沙鼠双测颈总动脉10 min诱导前脑缺血后,动物分别存活1天、3天或7天。用免疫组织化学方法检测了前额皮质中CR的表达。结果:与正常组相比,各缺血组中前额皮质中CR表达均上调。缺血再灌1天时,CR表达最强(P<0.01);3天时CR表达开始恢复(P<0.05);7天时CR表达进一步恢复,但仍高于正常组(P<0.01)。结论:前脑短暂缺血后可造成蒙古沙鼠前额皮质CR的表达在短时间内急剧上调;但随着时间的CR的表达会恢复正常。 相似文献
983.
目的:探讨用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术筛查肺癌血清特异性蛋白质的临床意义。方法:应用SELDI-TOF-MS对35例正常对照组、43例治疗前肺癌病人的血清样品进行蛋白质指纹图谱测定,用BioMarker Wizard 3.01及BioMarker Parrern System 5.01分析软件对测得的数据进行处理及建立诊断模型。结果:共检测到251个蛋白质峰,筛选出差异蛋白质峰11个,以质荷比(m/z)分别为M2799_26,M3227_41,M5739_70和M8164_30的4个蛋白质峰为依据组合构建分类决策树模型,分出5个终节点。决策树模型的原始判别总准确率为91.0%(71/78),敏感性为88.4%(38/43),特异性为94.3%(33/35);交叉验证总准确率为85.9%(67/78),敏感性为88.4%(38/43),特异性为82.9%(29/35)。结论:SELDI-TOF-MS在肺癌血清特异性蛋白质的筛选及诊断模型的建立有一定的临床意义。 相似文献
984.
目的:获得乙型肝炎表面抗原HBsAg的生物信息学资料。方法:从Genbank中获得HBsAg的核酸序列,用ExPaSy、EBI和NCBI网站的在线软件推导其编码氨基酸序列、理化性质、空间结构,并在Blastn比对后选择不同地理株进行分子进化进行分析。结果:HBsAg由226个氨基酸组成,分子量25777.6Da,等电点8.74,为亲水性蛋白质;信号肽位于1-29aa处,二级结构由-螺旋(18.14%)、延伸(25.66%)、随机线圈(56.19%)组成。中国与日本、冈比亚、德国、西班牙、墨西哥、荷兰、瑞典、泰国的HBsAg相似率依次为99%、94%、94%、94%、91%、89%、98%、98%、98%.。用不同地理株HBsAg核酸序列构建出的分子进化树中,中国和日本的聚成一簇。结论:通过对HBsAg的生物信息学分析获得该抗原特征,为进一步研究乙型肝炎的感染与发病机制、研制基因工程疫苗以及研究HBsAg新的功能域等提供依据。 相似文献
985.
目的:探讨法尼酯X受体(farnesoid X receptor,FXR)对肝脂酶(hepatic lipase,HL)表达的影响。方法:用FXR激动剂CDCA作用人肝癌细胞株(HepG2),用RT-PCR和Western blotting检测HL的表达情况。结果:用不同浓度的CDCA(25μmol/L、50μmol/L、75μmol/L)分别作用HepG2细胞6h、12h、24h、48h后,HL的mRNA和蛋白质水平呈时间和剂量依赖性下调。结论:FXR激动剂可抑制肝脂酶的表达。 相似文献
986.
黄连ISSR反应条件优化的研究 总被引:12,自引:2,他引:10
以黄连(味连,Coptis Chinensis Franch.)基因组DNA为模板,通过单因子、双因子实验研究了ISSR反应体系中主要成分(Mg2+、dNTP、引物、模板、Taq DNA聚合酶)以及热循环参数(退火温度、循环数、变性时间、退火时间、延伸时间)对扩增结果的影响,并找出各自的最适条件,建立了适合黄连ISSR分析的反应体系和扩增程序,即在25μL反应体系中,内含1×PCR buffer、1.5mmol·L-1 Mg2+、200μmol·L-1 dNTP、0.3 μmol·L-1引物、40 ng模板、1 U TaqDNA聚合酶。扩增程序为94℃预变性5 min,然后进行35个循环:94℃变性30 s,(据不同引物的退火温度)复性1 min,72℃延伸1.5 min,循环结束后72℃延伸7 min,-4℃保存。这一优化系统的建立为今后利用ISSR标记技术进行黄连鉴定及种质遗传多样性分析提供了一个标准化程序。 相似文献
987.
玉米T型细胞质雄性不育系与相应保持系线粒体蛋白质组中的差异蛋白 总被引:3,自引:0,他引:3
利用固相pH3—10梯度双向凝胶电泳.对玉米T型细胞质雄性不育系(T—CMS)及其相应保持系叶片(苗期、拔节期、孕穗期),胚轴,胚根和花药(花粉母细胞减数分裂期、花粉粒小孢子单-双核期)线粒体蛋白质组中的差异蛋白进行分析。PDQuest2D图像软件分析表明,苗期和拔节期叶片约有150个蛋白质斑点,胚轴和胚根中可识别出150个线粒体蛋白质斑点,花药中约有100个斑点。利用MALDI—TOF—MS方法.运用MASCOT软件于NCBI进行数据查询.对T—CMS与相应保持系中存在的差异蛋白进行归属鉴定,在T—CMS中存在,保持系中缺失的线粒体蛋白质有:r40cl protein(胚轴中),mature anther—specific protein,DNA—directed RNA polymerase 23kD subunit.hexokinaseⅡ和T—CMS中缺失而在保持系中存在的有:glutathione S—transferase.putative protein。其中T—CMS与相应保持系间.线粒体蛋白质组呈现出差异的组织有胚轴、胚根和小孢子单-双核期的花药。叶片的不同发育时期线粒体蛋白质组呈现明显变化.但T—CMS与保持系间没有差异。在小孢子单-双核期(花粉败育期)的花药中,T—CMS与保持系间线粒体蛋白质组出现明显差异,线粒体蛋白质组出现变异的时期与花粉败育时期相一致。 相似文献
988.
甘草腺毛的形态发生和组织化学研究 总被引:1,自引:0,他引:1
利用扫描电镜及薄切片技术对甘草的腺毛形态发生和发育过程进行了观察,并对腺毛发育过程中黄酮类成分积累进行了组织化学定位研究。结果表明:甘草腺毛为多细胞构成的盾状腺毛,有长柄和短柄2种类型;前者主要分布在花萼片上,而后者主要分布于叶片上。组化鉴定结果显示:腺毛中存在着黄酮类成分、其他亲脂类和非纤维素多糖类成分;在腺毛的发育过程中,黄酮类物质是随腺毛的发育成熟,在头部盘状结构的分泌细胞及角质层下腔中积累。研究结果对进一步探讨甘草叶中黄酮类成分的合成及其作用提供科学依据。 相似文献
989.
目的:对尘螨主要变应原Der f1进行核酸序列测定,探讨其系统进化信息。方法:根据Genbank公布的Der f1基因序列设计引物,巢式PCR扩增Der f1的cDNA,纯化、回收、克隆至pMD19-T simple后进行序列测定,序列比对后用Clustal W 1.83构建分子进化树。结果:成功扩增出Der f1的cDNA片段,测序表明该基因含ORF1个,长度966bp,与参考序列同源性达99.9%。该变应原具半胱氨酸蛋白酶活性,与果蝇进化关系最远,与梅氏嗜霉螨进化关系最近。结论:成功获得了尘螨变应原Der f1基因片段,根据其编码的氨基酸序列构建出的系统进化树与形态学分类不一致。 相似文献
990.
静脉导管留置及胸腔注射尿激酶治疗结核性胸腔积液影响 总被引:1,自引:0,他引:1
探讨中心静脉导管胸腔穿刺留置抽液联合胸腔内注入尿激酶(urokinase,UK)治疗结核性渗出性胸膜炎对胸膜肥厚、粘连的预防作用。方法:将52例收治的结核性渗出性胸膜炎所致大量胸腔积液患者随机分为治疗组(27例)和对照组(25例),对照组给于常规抗结核以及传统单纯胸腔穿刺抽液(每周3次)等治疗;全身结核中毒症状严重者,予口服泼尼松30mg.d-1,每周减量5~10mg,疗程约4~6周。在以上药物治疗同时,治疗组第一次穿刺时使用一次性中心静脉导管代替传统胸穿针穿刺置入并保留于胸腔,抽液后从导管注入尿激酶10~20万U,保留24小时后再次抽液;可以再次或多次使用尿激酶10万u注入胸腔;此后不定时抽液,经B超证实抽尽胸水后拔除导管。结果:治疗组住院时间(12.3±6.6)天,住院费用(2219.5±1171.9)元,治疗后第三个月的胸膜厚度(1.00±0.23)mm,无病例发生胸膜增厚、粘连及包裹性胸腔积液。对照组住院时间(20.4±7.9)天,住院费用(2721.9±1711.7)元,治疗后第三个月胸膜厚度(2.1±0.31)mm,另有3例发生胸膜增厚、粘连,2例形成包裹性胸腔积液。各项指标对比差异有显著性。结论:中心静脉导管胸腔穿刺留置抽液及尿激酶胸腔内保留注射治疗结核性胸腔积液具有简便、安全、创伤少、疗效确切;缩短住院时间,降低住院费用;且能有效预防胸膜肥厚和粘连发生。值得临床推广应用。 相似文献