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771.
772.
小鼠白细胞介素18在大肠杆菌中的表达、纯化及抗肿瘤作用研究 总被引:3,自引:0,他引:3
用RT PCR从小鼠肝脏细胞中扩增出小鼠白细胞介素 18(mIL 18)的cDNA ,克隆到表达载体pJW2中 ,经热诱导后在大肠杆菌JM109中表达。表达的重组mIL-18(rmIL-18)主要以包涵体形式存在 ,占菌体总蛋白质的 18%。包涵体用 5mol L尿素溶解后 ,经SephadexG-100柱纯化。纯化的蛋白质经透析复性 ,在 0.5mg LConA存在的条件下 ,能够对小鼠脾细胞具有剂量依赖的IFN γ诱生作用。以 1× 105 H22 肝癌细胞腹腔注射昆明小鼠 ,构建小鼠H2 2 肝癌腹水瘤模型。分别在肿瘤细胞接种后 1、4和 8d ,用 10 μg纯化产物对荷瘤小鼠进行腹腔注射。结果显示rmIL 18注射组小鼠死亡速率延缓 ,生存率显著提高 (P <0 .0 1) ,达到 62.5 %。首次证明mIL-18对小鼠H2 2 肝癌具有显著的抑制作用 ,经rmIL 18作用后存活小鼠具有对H22 肝癌细胞的免疫记忆性 相似文献
773.
为获得具有生物学活性的hFKBP52,来筛选新型的促神经再生药物.采用半巢式、桥联PCR及亲和层析方法,从人胎脑cDNA文库中成功扩增出hFKBP52基因,在pET28a(+)中实现了高效、可溶性的融合表达,表达量约30%.重组的蛋白质经亲和纯化至电泳纯,纯化后的hFKBP52显示出肽基脯氨基顺反异构酶活性.表明原核表达的hFKBP52具有类似于其天然蛋白质的生物学活性. 相似文献
774.
Abstract After ammonium sulphate precipitation, Sephadex G-75 gel filtration, Lys-Sepharose 4B affinity chromatography and elution from electrophoresis, the fibrinolytic protease (TAFP) was isolated and purified from the extract of T. amaenus Walker gut. It appeared a single band corresponding to molecular weight of approximately 67kD on SDS-PAGE and an probably pI of 7.2 on IEF. On fibrin plate and plasminogen-free fibrin plate (heated at 85°C for 30 minutes to eliminate plasminogen), TAFP showed same fibrinolytic activity. The result might indicate that TAFP is a fibrinolytic enzyme degrading fibrin, as well as a plasminogen activator degrading fibrin via activating plasminogen. The result of chromogenic substrates indicated that TAFP possesses trypsin-like activity specifically degrading argininyl amide bond or peptide bond, but has no chymotrypsin activity. TAFP was almost inhibited powerfully by antipain, PMSF, soybean trypsin inhibitor and soybean Bowman-Birk inhibitor. However, leupeptin, antitrypsin and TLCK was more powerful effective inhibitors of TAFP. Optimal reaction pH of TAFP was 7.5, and it was stable in 5.5–7.0 of pH range. 相似文献
775.
棉花纤维发生相关AFLP标记 总被引:13,自引:2,他引:11
以徐州142及其无绒无絮(无纤维)突变体(fl)为材料,利用AFLP标记技术对该近等基因系进行DNA多态性分析。在64对引物产生的6360多条扩增带中,发现1条差异带(CF1)稳定出现在有纤维和无纤维之间。进一步用徐州142无绒无絮突变系与纤维发育正常的渝棉一号的杂交后代F2、F3分离群体以及几个陆地棉品种作材料验证。结果表明,差异带(CF1)与纤维的产生呈共分离,该差异带是与棉花纤维发生相关的分子标记。进而对CF1进行回收、克隆和序列测定,CF1长205bp,通过6个开放阅读框推断的氨基酸序列,与酚羟化酶α-亚基、外表皮蛋白C、NADH脱氢酶亚基1、NADH-CoQ氧化还原酶、2-氧代-铁氧化蛋白-氧化还原酶以及假拟14.5kD蛋白(hypotheitcal 14.5kD protein)有较高的相似性。 相似文献
776.
淫羊藿属植物黄酮类化合物的分类学意义再探 总被引:3,自引:0,他引:3
利用HPLC方法,对中国淫羊藿属Epimedium主要是Epimedum亚属Diphyllon组的35种1变种129个植物叶片样品进行了淫羊藿苷类黄酮化合物的HPLC指纹图谱特征分析.主要依据样品图谱中的第二组峰"ABCI"组峰特征将所有图谱归为4大类9亚类,通过与花形态性状的关联分析,确定不同类型图谱以及包含色谱峰的演化关系,并且提出:Ⅱ-3是最原始的类型,Ⅱ-1、Ⅳ、Ⅰ-3为原始类型直接衍生的类型:Ⅰ-1为基本类型,Ⅰ-2、Ⅰ-4、Ⅲ、Ⅱ-2为进化或者是特化类型.HPLC图谱类型的划分与W.T. Steam 2002年发表的淫羊藿属分类系统Diphyllon组下4个系的划分具有较好的相关性. 相似文献
777.
目的 探讨针对性输液知识教育在门诊输液病人中的应用.方法 对220例门诊输液的患者随机分为观察组及对照组,以发放自行设计制作针对性输液知识教育卡的门诊输液患者为观察组,以同期未发放针对性输液知识教育卡的门诊输液患者为对照组,观察两组问的药物相关知识掌握、焦虑担心、配合度、满意度.结果 观察组对药物相关知识的掌握、配合度、满意度显著高于对照组(P<0.05),观察组的焦虑担心显著低于对照组(P<0.001).结论 在门诊输液病人中开展针对性输液知识教育,可规范门诊输液流程,提高健康教育效果及输液安全. 相似文献
778.
779.
目的:建立大鼠肝脏移植急性排斥反应模型,并对所建模型进行评价。方法:采用改良Kamada“二袖套”法,以近交系大鼠Dark Agouti(DA)为供体、Lewis(LEW)为受体(A组)建立大鼠原位肝移植急性排斥反应模型,通过观察手术情况、生存情况及肝功能和病理学检查对此模型进行评价,同时以LEW→LEW作为对照组(B组)。结果:手术成功率为91.3%;手术时间为(90.70±5.68)min;无肝期时间(9.96±1.19)min;平均存活时间A组为(12.44±3.43)d,B组超过100d;A组血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶及血清总胆红素术后不断升高,在第10~14d最为明显,血清白蛋白在术后第3d开始逐渐降低,在相同时相点,与B组相比差异显著;A组移植肝脏病理检查有明显的排斥反应,而B组没有。结论:DA→LEW为稳定、强烈的大鼠肝移植急排模型,是研究肝移植排斥及免疫耐受的理想动物模型。 相似文献
780.
利用Y-RACE法进行棉花胚珠cDNA末端快速扩增 总被引:2,自引:0,他引:2
在YADE(Y shapedadaptordependentextension)方法的基础上 ,设计了一种新的cDNA末端快速扩增方法 ,称为Y RACE法 .利用该方法只需一次cDNA合成就能进行多个基因的 3′和 5′末端的扩增 .分别利用Y RACE方法和RACE试剂盒 (TaKaRa)扩增了一个棉花胚珠cDNA片段F0 2 7的末端序列 .序列比较表明 ,用Y RACE方法扩增的末端序列较试剂盒所得序列在最末端稍短 ,但同样能进行正确拼接并获得全长编码序列 .对Y RACE法的优缺点和可能的改进作了进一步讨论 . 相似文献