小叶兜兰的种子发育和无菌萌发

为建立小叶兜兰的繁育技术体系,本研究通过无菌播种的方法,辅以TTc生活力测定等方法,比较了小叶兜兰种子在授粉后不同发育时期和培养条件下的萌发率,对小叶兜兰种胚的发育过程进行了显微观察,探讨种胚发育程度与萌发的关系。结果表明,小叶兜兰种胚的发育阶段对萌发的影响最大,授粉后255d的种子萌发率最高（90．71％）,该阶段种子仍呈白色但微干燥,种胚刚发育至球形胚阶段,胚柄尚存。1／4MS和1／2MS为小叶兜兰适宜的基本培养基,添加100mg·L^-1的土豆汁对小叶兜兰的无菌萌发有良好的促进作用。     

多途径介导的小胶质细胞间钙波传递

利用微局域机械力刺激,快速实时观察机械力引起的细胞间钙波传递,系统地研究了BV-2小胶质细胞间钙通讯机制.结果表明,在细胞种植密度较小且彼此未接触的情况下,旁分泌途径可介导BV-2小胶质细胞间钙波传递.在细胞密度较大且相互接触的情况下,旁分泌和间隙连接两种途径可共同介导胞间钙波传递.更为有趣的是,在体外发现BV-2小胶质细胞间存在通道纳米管类似物连接,也可介导小胶质细胞间钙波传递.综上所述,小胶质细胞间钙波传递可通过旁分泌、间隙连接和通道纳米管类似物连接三种途径介导.     

TGF-β1诱导人牙周膜细胞细胞骨架重排的机制

目的：牙周病是由多种因素引起的,特别是人牙周膜细胞的缺失。转化生长因子-β1（TGF—β1）是一种多功能细胞因子,在治疗牙周病中发挥重要的作用,但很少有人清楚地研究TGF-β1对人牙周膜细胞的影响。因此,本研究的目的是探讨TGF—p1诱导人牙周膜细胞细胞骨架重排的信号通路。方法：人牙周膜细胞取自健康的前磨牙,并向同步化处理的细胞中加入10ng／m1的TGF-β1,并通过相差显微镜观察它们的形态学变化。通过免疫组化和共聚焦显微镜观察F-肌动蛋白重排。用Westernblot分析蛋白表达情况。结果：我们发现TGF-β1诱导人牙周膜细胞细胞骨架重排,激活ROCK蛋白的表达,并增加p-IIMK和p-cofilin的蛋白表达。ROCK抑制剂Y-27632使ROCK,p-IIMK和p-cofilin的蛋白表达下降。结论：TGF-β1可以诱导人牙周膜细胞细胞骨架重排,并且是通过上凋ROCK,P．IlMK和p-cofilin的活性完成的。本研究可以增强对TGF-β1在治疗牙周疾病方面的作用机制的了解。     

白藜芦醇对氧糖剥夺／再灌注损伤的PCI2细胞的保护作用及其作用机制

目的：探讨白藜芦醇对氧糖剥夺／再灌注（OGD／R）损伤的PCI2细胞的保护作用及其机制。方法：体外培养PCI2细胞,分为对照组,白藜芦醇组,OGD／R组及OGD／R＋白藜芦醇组。以改良的噻唑蓝法测定细胞活性,采用AnnexinV—FITC／PI双染法检测细胞的凋亡率,用双氯罗丹明（DHR）检测细胞内活性氧簇（Ros）的水平,采用蛋白印迹法（westemblot）分析SIRTl的蛋白表达情况。结果：与对照组相比,经过OGD／R损伤后,细胞活力显著降低。而在OGD／R的同时给予10μmol／L的白藜芦醇处理。可以明显提高细胞活力。流式细胞仪检测发现,10μmol／L的白藜芦醇可以显著地减少OGD／R引起的细胞凋亡,抑制细胞内的ROS产生。westemblot的结果提示,与对照组比较,白藜芦醇可提高SIRTl的蛋白表达水平。结论：白藜芦醇可以通过抑制ROS的产生和上调SIRTl的表达等机制而发挥其对抗氧糖剥夺／再灌注损伤的神经保护性作用。     

几种药物对吗啡相关的条件位置偏好影响的研究进展

条件化位置偏好（conditionedplacepreference,CPP）,常用于研究药物成瘾的相关记忆。这里主要综述了一些药物对CPP的影响。神经肽S,神经肽FF,肌肽,孤啡肽,α-2受体激动剂,L-左旋千金藤啶碱,东莨菪碱,丙戊酸钠,巴氯芬对吗啡CPP有抑制效应;聚肌胞苷酸,氟伏沙明和金刚烷胺能增强吗啡CPP;阿坎酸能抑制乙醇和某些类别的滥用药物的条件化奖赏效应,但不影响吗啡引起的条件化奖赏效应;褪黑激素逆转吗啡诱导的奖赏效应;人重组干扰素-α导致吗啡CPP的恢复。     

钠离子通道β4亚基糖基化的初步研究

异常表达的糖蛋白与PD等多种神经退行性疾病有关。糖蛋白组学研究发现,电压门控钠离子通道β4亚基在PD病人脑组织中表达明显增加。为了深入探索β4亚基及其糖链在帕金森发生发展中的作用,采用PD转基因鼠对其表达进行验证,对其潜在的糖基化位点进行定点突变,构建重组表达质粒。结果发现,在新生PD转基因鼠和野生成鼠脑组织中有~38kDa蛋白条带表达,而在新生野生鼠脑组织中不表达;用PNGase F酶处理去除糖链后,~38kDa蛋白条带变成迁移速递更快的较小分子量条带,说明β4亚基是高度糖基化的蛋白,并且其糖基化与生长发育有关。将突变重组质粒转入HEK-293细胞和小鼠神经瘤细胞Neuro2A中表达,结果发现突变型质粒分子量明显低于野生型。为研究β4亚基及其糖链的功能提供了一定的实验数据并打下了基础。     

肿瘤巩固治疗临床研究现状

随着医学水平的不断进步,巩固治疗已广泛应用于造血系统肿瘤及各种实体瘤的临床治疗,治疗方案为巩固化疗/维持化疗、巩固放疗、免疫调节剂和中药巩固治疗。虽然巩固治疗在肿瘤治疗的应用中起到了积极地效果,但临床治疗中仍在探索抗肿瘤疗效确切、安全性高、毒副作用小、提高患者机体免疫功能且治疗费用经济的巩固治疗药物和方案,从而有效延长患者生存期。本文就这些药物的应用和研究进展进行综述。     

氨肽酶N在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的:检测结直肠癌中氨肽酶N(APN)的表达,并通过分析其与血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的关系,探讨APN在结直肠癌发生、发展过程中的作用及其临床意义。方法:应用免疫组织化学技术,检测40例结直肠癌组织及40例癌旁正常直肠组织中APN、VEGF和bFGF的表达,并结合临床病例特征进行分析。结果:40例结肠癌组织中APN的阳性率达52.5%(21/40),15例转移淋巴组织中达66.67%(10/15),在结直肠癌组织和转移淋巴结组织中的阳性表达率均明显高于癌旁正常直肠组织,差异有统计学意义(P0.05)。APN、VEGF与bFGF在结直肠癌中的阳性表达均与患者的性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤位置、分化程度无关(P0.05),而与肿瘤的分期和有无转移显著相关(P0.05)。结直肠癌组织中APN与VEGF、bFGF的表达间均呈显著正相关性(P0.05)。结论:APN在结直肠癌组织中呈高表达,与VEGF、bFGF可能具有协同作用,共同参与调节结直肠癌的发展,对于评估结直肠癌的生物学行为和预测患者的预后可能具有重要价值。     

Genome-wide analysis of alternative splicing of pre-mRNA under salt stress in Arabidopsis

Background

Alternative splicing (AS) of precursor mRNA (pre-mRNA) is an important gene regulation process that potentially regulates many physiological processes in plants, including the response to abiotic stresses such as salt stress.

Results

To analyze global changes in AS under salt stress, we obtained high-coverage (~200 times) RNA sequencing data from Arabidopsis thaliana seedlings that were treated with different concentrations of NaCl. We detected that ~49% of all intron-containing genes were alternatively spliced under salt stress, 10% of which experienced significant differential alternative splicing (DAS). Furthermore, AS increased significantly under salt stress compared with under unstressed conditions. We demonstrated that most DAS genes were not differentially regulated by salt stress, suggesting that AS may represent an independent layer of gene regulation in response to stress. Our analysis of functional categories suggested that DAS genes were associated with specific functional pathways, such as the pathways for the responses to stresses and RNA splicing. We revealed that serine/arginine-rich (SR) splicing factors were frequently and specifically regulated in AS under salt stresses, suggesting a complex loop in AS regulation for stress adaptation. We also showed that alternative splicing site selection (SS) occurred most frequently at 4 nucleotides upstream or downstream of the dominant sites and that exon skipping tended to link with alternative SS.

Conclusions

Our study provided a comprehensive view of AS under salt stress and revealed novel insights into the potential roles of AS in plant response to salt stress.

Electronic supplementary material

The online version of this article (doi:10.1186/1471-2164-15-431) contains supplementary material, which is available to authorized users.