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111.
人神经生长抑制因子β结构域的高效表达及性质研究 总被引:1,自引:0,他引:1
神经生长抑制因子( G I F)是一种特异存在于哺乳动物脑中的金属硫蛋白(m etallothionein, M T)类似物,又称 M T Ⅲ.它与 M T 有相同的结合 Zn(Ⅱ), Cd(Ⅱ), Cu(Ⅰ)等金属的能力,但与 M T 不同的是它能够抑制神经细胞的生长,并发现在患 Alzheim er disease( A D 症)病人的大脑中 G I F蛋白量和m R N A 的量均显著下降,研究证明 G I F对神经细胞的抑制活性主要存在于其 β结构域中.为进一步研究 β结构域结构和功能的关系,将 β结构域的 c D N A 克隆入融合表达载体p G E X 4 T 1 中, I P T G 诱导并高效表达了 β结构域蛋白,通过氨基酸组成和质谱的测定,证明得到了目的蛋白.利用金属重组的方法,分别得到了结合 Cd 和 Zn 的 G I F 的 β结构域,并测定了其巯基和金属含量对蛋白量的比值,证明所得 G I F β与 M T β在结合金属能力上十分相似.用紫外光谱学的研究表明, Cd M T 的 β结构域在250 nm 处比 Cd G I F 的 β结构域有一明显肩峰,从而表明二者的金属—巯基结合簇的结构有明显不同,而这种结构上的差异有可能导致二者在功能上的不同. 相似文献
112.
从基因工程水平构建了小鼠金属硫蛋白与抗人活化血小板单抗SZ51单链抗体的重组基因产物,并在大肠杆菌菌株BL21(DE3)pLysS中成功地进行了表达.该重组蛋白以包涵体形式存在于菌体蛋白中,分子量为38kD,ELISA实验证明该重组蛋白既具有血栓部位活化血小板的单抗活性,又具有小鼠MT单抗的活性 相似文献
113.
二价铅离子与金属硫蛋白相互作用的研究 总被引:5,自引:0,他引:5
通过紫外吸收光谱和平衡透析法研究了二价铅离子同脱金属硫蛋白(apo-MT)、锌-金属硫蛋白(Zn-MT)的相互作用,证实Pb(Ⅱ)是以金属巯基复合物(金属巯基比为1∶2)的形式同金属硫蛋白结合,表观离解常数(KD)为8.71×10-7mol/L.在自由铅浓度达到6.52×10-6mol/L的条件下,铅离子即可将Zn-MT上的Zn完全取代下来.通过EDTA、DTNB竞争反应、圆二色性(CD)光谱分析,认为Pb-MT的金属巯基复合物不同于Zn-MT中Zn与巯基形成的紧密的正四面体结构,而是可能形成一种三级结构相对松散、热力学上不稳定的Cys-S-Pb-S-Cys平面形结构.研究认为金属硫蛋白的两种亚型MT-Ⅰ、MT-Ⅱ与Pb(Ⅱ)的结合能力并无显著差异 相似文献
114.
金属硫蛋白(metalothionein,简称MT)是一类低分子量、富含半胱氨酸的蛋白质,由于1个MT分子可结合7个金属离子,因此MT分子具有很强的金属结合特性[1,2].本文一方面利用MT分子的高金属结合性能,另一方面利用苏州医学院血液研究所研制成... 相似文献
115.
山西五台山种子植物区系分析 总被引:16,自引:3,他引:13
五台山有种子植物865种,隶属于392属92科,其中裸子植物3科, 6属, 7种,被子植物89科, 386属, 858种(双子叶植物76科, 294属, 699种,单子叶植物13科, 92属, 159种)。五台山种子植物属的区系成分类型多样,具有明显的温带色彩。突出特征是温带成分占绝对优势,达255属,占总属数的73.48%(其中北温带成分156属,占总属数的为44.96%),在植物区系的组成中具有重要作用。在五台山种子植物种的区系成分中,中国特有种占绝对优势,达286种,占总种数的33.41%,它们是构成五台山优势植被类型的建群种和优势种的主要成分,如华北落叶松、油松、青木千、黄刺玫、虎榛子、蚂蚱腿子等。类平均聚类结果表明,五台山种子植物区系成分与北京东灵山、百花山关系最为密切,与长白山关系次之,与关帝山、大青山有一定差异,与太岳山、太行山和中条山差异较大,与太白山差异最明显,这主要由它们的生态地理条件、区系成分的组成及植被建群种和优势种等差异所决定。 相似文献
116.
117.
118.
丹参酮对阿尔茨海默病样大鼠海马内白介素1β和白介素6 mRNA表达的影响 总被引:5,自引:0,他引:5
目的探讨丹参酮(tanshinone, Tan)抗β-淀粉样肽神经元毒性的分子机制.方法应用凝聚态β-淀粉样肽1-40片段(amyloid β-peptide1-40, Aβ1-40)在大鼠双侧海马齿状回背侧细胞带进行微量注射以建立拟人类阿尔茨海默病(Alzheimer's disease, AD)样动物模型;采用明暗箱被动回避法、穿梭法测试学习记忆功能;用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定海马内白介素1β(IL-1β)和白介素6(IL-6)mRNA含量;以丹参酮(tanshinone, Tan)(50mg/ kg)对Aβ1-40处理的大鼠连续灌胃14d,观察其干预效果.结果海马内注射Aβ1-40 14 d后,经行为学检测大鼠学习记忆功能明显减退,海马内IL-1β和IL-6 mRNA表达均显著高于对照组(P< 0.01);Tan(50mg/ kg)连续灌胃14 d能显著抑制大鼠学习记忆功能的减退和上述病理变化.结论 Tan对Aβ1-40诱导的大鼠学习记忆功能障碍具有显著改善作用,并能有效地抑制其海马内IL-1β和IL-6 mRNA的升高,这可能为Tan治疗AD样大鼠的分子机制. 相似文献
119.
中间偃麦草(Thinopyrum intermedium(Host)Barkworth et Dewey)是禾本科小麦族植物中的一个异源六倍体物种,是重要的牧草植物,在小麦的抗病育种中发挥了重要作用。利用荧光原位杂交(FISH)技术,在体细胞中期染色体上,对18S-5.8S-26S rDNA位点进行了物理定位,发现该物种有3~4对染色体携带18S-5.8S-26S rDNA主位点。结合基因组原位杂交(GISH)分析,证明中间偃麦草的St基因组中有一对同源染色体短臂末端携带一个主位点,其余2~3对主位点位于E基因组染色体上。对不同来源的材料研究表明:18S-5.8S-26S rDNA位点的数目(包括主位点和小位点)、位置、拷贝数在不同收集材料之间的差异较大,甚至在同一个体的不同细胞中也存在差异。讨论了rDNA物理作图数据在分析系统发育问题中的局限性。结合中间偃麦草的三个可能的二倍体基因组供体(Th.bessarabicum、Th. elongatum和Pseudoroegneria stipifolia)rDNA位点分析的结果,对中间偃麦草进化过程中rDNA位点的变化进行了分析,同时,对其中一份材料的核ITS序列进行了克隆、测序和系统发育分析,发现在中间偃麦草中,ITS序列具有很高的异质性。 相似文献
120.
为了提高小鼠金属硫蛋白-I(mMT-I)在鱼腥藻7120(Anabaena sp.PCC 7120)中的表达量、便于表达产物的分离纯化,构建了新的穿梭融合表达载体pKG-MT。通过pKG-MT,mMT-I cDNA在tac启动子的调控下,以与谷胱甘肽转硫酶(GST)C-末端相融合(GST-MT)的形式在鱼藻中表达。SDS-PAGE结果显示在异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导下GST-MT在鱼腥藻中表达。经谷胱甘肽亲合层析,从转基因藻中分离、纯化得到GST-MT,利用GSTC-末端的凝血酶酶切位点,用凝血酶对GST-MT进行柱上酶切,经Sephadex G50除去凝血酶得到mMT-I。SDS-PAGE表明纯化得到所要的目标产物;ELISA测定结果显示从每克转基因藻(鲜重)中可纯化得到0.9 mg mMT-I;原子吸收测定表明纯化得到的mMT-I的镉离子结合能力接近于天然MT。 相似文献