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High levels of expression of full length human pro-alpha 2(V) collagen cDNA in pro-alpha 2(V)-deficient hamster cells 总被引:2,自引:0,他引:2
A full length cDNA encoding human pro-alpha 2(V) collagen was constructed. Partial sequencing of the cDNA and primer extension analysis of mRNA from fibroblasts found that pro-alpha 2(V) mRNA differs from the mRNAs of other fibrillar collagens in the increased length of its 5'-untranslated region. The pro-alpha 2(V) cDNA was placed downstream of the human cytomegalovirus immediate early promoter/regulatory sequences for expression studies in cultured Chinese hamster lung cells. These cells have been shown previously to synthesize large quantities of pro-alpha 1(V) homotrimers as their only collagenous product. Transfection resulted in a number of clonal cell lines that express human alpha 2(V) RNA at levels comparable to, and in some cases greater than, levels found in normal human skin fibroblasts. Pro-alpha 2(V) chains produced in the majority of clonal lines were of sufficient quantity to complex all available endogenous pro-alpha 1(V) chains. Chimeric heterotrimers, composed of hamster alpha 1(V) and human alpha 2(V) chains in a 2:1 ratio, were stable to pepsin digestion and were found predominantly associated with the cell layer. Surprisingly, pro-alpha 2(V) chains, in excess to pro-alpha 1(V) chains, were found in the extracellular matrix and, in much greater abundance, in media. These chains were pepsin sensitive, indicating that pro-alpha 2(V) chains can be secreted as nonstable homotrimers or as free chains. 相似文献
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Household‐level correlates of children's physical activity levels in and across 12 countries
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Deirdre M. Harrington Fiona Gillison Stephanie T. Broyles Jean‐Philippe Chaput Mikael Fogelholm Gang Hu Rebecca Kuriyan Anura Kurpad Allana G. LeBlanc Carol Maher Jose Maia Victor Matsudo Timothy Olds Vincent Onywera Olga L. Sarmiento Martyn Standage Mark S. Tremblay Catrine Tudor‐Locke Pei Zhao Peter T. Katzmarzyk for the ISCOLE Research Group 《Obesity (Silver Spring, Md.)》2016,24(10):2150-2157