GRP和VIP对E2诱致的垂体催乳素（PRL）瘤细胞PRL基因转录的影响

实验应用雄性ＳＤ大鼠,皮下埋植内置１０ｍｇ雌二醇硅胶管３个月致体催乳素瘤后,取ＰＲＬ瘤细胞进行外原代培养,并应用原位杂交方法,研究不同剂量的胃泌素释放肽（ｇａｓｔｒｉｎ－ｒｅｌｅａｉｎｇｐｅｐｔｉｄｅ,ＧＲＰ）和血活性肠肽（ｖａｓｏａｃｔｉｖｅｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ,ＶＩＰ）以及Ｅ２对 离体培养的垂体ＰＲＬ瘤细胞ＰＲＬ基因转录的,下,ＧＲＰ,ＶＩＰ分别与ＰＲＬ瘤细胞孵育２４ｈ后     

Genetic structure in the Mediterranean seagrass Posidonia oceanica: disentangling past vicariance events from contemporary patterns of gene flow

The Mediterranean Sea is a two‐basin system, with the boundary zone restricted to the Strait of Sicily and the narrow Strait of Messina. Two main population groups are recognized in the Mediterranean endemic seagrass Posidonia oceanica, corresponding to the Western and the Eastern basins. To address the nature of the East–West cleavage in P. oceanica, the main aims of this study were: (i) to define the genetic structure within the potential contact zone (i.e. the Strait of Sicily) and clarify the extent of gene flow between the two population groups, and (ii) to investigate the role of present water circulation patterns vs. past evolutionary events on the observed genetic pattern. To achieve these goals, we utilized SSR markers and we simulated, with respect to current regime, the possible present‐day dispersal pattern of Posidonia floating fruits using 28‐day numerical Lagrangian trajectories. The results obtained confirm the presence of the two main population groups, without any indices of reproductive isolation, with the break zone located at the level of the Southern tip of Calabria. The populations in the Strait of Sicily showed higher affinity with Western than with Eastern populations. This pattern of genetic structure probably reflects historical avenues of recolonization from relict glacial areas and past vicariance events, but seems to persist as a result of the low connectivity among populations via marine currents, as suggested by our dispersal simulation analysis.     

MAPK磷酸酯酶-1通过抑制JNK和p38的磷酸化调节SH-SY5Y神经母细胞瘤的凋亡

目的研究MKP-1在SH-SY5Y神经母细胞瘤中的抗凋亡。方法建立稳定表达MKP-1的SH-SY5Y细胞,用H2O2诱导细胞凋亡,并通过Western blotting比较分析MKP-1的表达对JNK和p38磷酸化的调节。结果①H2O2诱导SH-SY5Y细胞表达MKP-1,同时导致JNK和p38的去磷酸化;②在稳定表达MKP-1的SH-SY5Y细胞中,MKP-1可以抑制JNK和p38的磷酸化。③稳定表达MKP-1的SH-SY5Y细胞抵抗H2O2诱导细胞凋亡的能力比对照细胞提高了1倍左右。结论MKP-1对神经细胞的凋亡具有重要的调节作用,提示MKP-1作为调节ERK、JNK和p38蛋白激酶信号途径的重要分子,可能对退行性神经系统疾病的发病机制和治疗有重要的作用。     

抗磺胺对甲氧嘧啶单克隆抗体的研制及其特性分析

目的制备针对磺胺对甲氧嘧啶的单克隆抗体,建立对该物质的免疫学检测方法。方法以BSA-磺胺对甲氧嘧啶为免疫原,免疫BALB／c小鼠,取脾细胞与小鼠Sp-2／0骨髓瘤细胞融合后,经筛选和亚克隆,建立杂交瘤细胞株。结果获得2株能稳定分泌抗磺胺对甲氧嘧啶抗体的细胞株。对抗体进行了特性分析,抗体的效价分别为1：400000和1：1630000,抗体类型及亚类都为IgGl。其中,单克隆抗体1H10的亲和力为1．4×109L／mol,利用该抗体采用竞争间接ELISA法检测磺胺对甲氧嘧啶的范围是1025—16μg/mL,最低检测浓度是8μg/mL。单抗1H10与其他6种磺胺药（SMM、SMZ、SM2、SD、SulfaquinoxalineSodium、Sulfametetyrazine）无交叉反应。结论单克隆抗体1H10可用于研制免疫学方法检测磺胺对甲氧嘧啶残留的产品。     

黄精凝集素PCL-2诱导人前列腺癌LNCap细胞凋亡及机制研究

研究黄精凝集素PCL-2对人前列腺癌LNCap细胞生物活性和可能的抗肿瘤机制。从黄精药材中提取分离得到黄精凝集素PCL-2,体外培养LNCap细胞,采用WST-1和集落形成实验评价PCL-2对LNCap细胞的增殖作用;2,7-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)荧光探针法检测LNCap细胞内ROS含量;qRT-PCR和Western blot法检测PCL-2对LNCap细胞中相关基因和蛋白表达的影响。研究结果显示PCL-2能显著抑制LNCap细胞的增殖,促进细胞中ROS生成;PCL-2通过上调LNCap细胞中Bax、Caspase-3及Caspase-9基因mRNA和蛋白表达并下调Bcl-2基因mRNA和蛋白表达水平诱导LNCap细胞凋亡。本研究结果表明PCL-2诱导LNCap细胞凋亡活性作用显著,可作为抑制前列腺癌的潜在药物。     

IVF-20培养液用于大鼠体外受精的实验研究

目的探讨人用体外受精液用于实验大鼠体外受精的可行性,为实验大鼠的胚胎保种提供参考。方法选用人体外受精IVF-20培养液作为大鼠精子获能和受精培养液,对SD、Wistar、GK、F344等四种不同品系的实验大鼠进行体外受精;用mR1ECM培养液对体外受精所得胚胎进行体外培养实验。同时,将所得2-细胞胚胎移植给经假孕处理的受体鼠。结果四个品系大鼠体外受精后的卵裂率分别可达83.2%、72.6%、87.8%和71.6%。体外受精卵裂胚能够在体外进一步发育,SD大鼠囊胚发育率为16.7%,与体内受精胚胎在体外培养的囊胚发育率(24.5%)差异不显著。80枚2-细胞胚胎移植给2只受体鼠后均妊娠成功,产下正常仔鼠10只,产仔率12.5%。结论用于人体外受精的IVF-20培养液同样适合于实验大鼠精子的体外获能和受精,可以在多种品系获得较高的卵裂率,所得卵裂胚能够在体外发育到囊胚,并且所得卵裂胚在移植给受体鼠后能够产下正常仔鼠。     

松栎柱锈菌春孢子多糖体外抗氧化活性

为了研究松栎柱锈菌（Cronartium orientale S.Kaneko）春孢子多糖的体外抗氧化活性,制备了该菌破壁春孢子精制多糖,并对所得春孢子多糖进行了总抗氧化能力、总还原力以及清除二苯代苦味酰基（DPPH·）、清除羟基自由基（·OH）、清除超氧阴离子（O₂^·）的活性进行了测定。体外抗氧化活性分析结果表明：松栎柱锈菌春孢子多糖具有较强的总抗氧化能力;虽然该菌多糖不具有清除多数氧自由基母体（O₂^·）的作用,也不具有清除人工合成自由基DPPH·的作用,但是其能够有效清除对机体破坏力最强的自由基·OH。这表明本文获得的松栎柱锈菌春孢子多糖具有对自由基选择性清除的能力,对其他自由基研究者具有参考价值,可为该菌的开发利用提供参考,也能够为森林有害生物开发利用提供理论依据。     

暴雨和缓冲带特征对城市滨水缓冲带雨洪消减与水质净化效果的影响机制

通过设置多组实验,模拟不同暴雨径流及缓冲带条件,对城市滨水缓冲带在不同暴雨雨型、历时、重现期、缓冲带坡度、植被覆盖度、初期冲刷等条件下的径流削减和水质净化作用进行研究。得出在不同实验条件下,滨水缓冲带的雨量动态径流系数结果在0.29—0.55之间。分析实验结果发现缓冲带对峰型靠前、历时较短、重现期短的暴雨径流削减效果更好,同时更平缓与植被覆盖度更高的缓冲带对径流的削减效果更佳。模拟实验显示,径流中不同污染物去除率范围分别为:SS为66.41%—90.29%、TN为44.48%—64.90%、NH_3-N为32.72%—63.68%、TP为89.83%—95.04%、COD为34.32%—66.23%。缓冲带的径流水质净化效果在应对不同暴雨雨型时未显示明显规律,而缓冲带对中高浓度径流污染物削减率更高能够应对较强的初期冲刷效应。同时更平缓与植被覆盖度更高缓冲带,即表流流速更缓慢时,显示出更好的径流净化效果。     

松瘿小卷蛾及其寄生蜂对落叶松挥发物的嗅觉行为反应

为确定松瘿小卷蛾（Cydia zebeana）对寄主的定位习性,以及探讨对其的综合防治方法,通过Y型管嗅觉仪行为选择实验,分析松瘿小卷蛾及其两种寄生性天敌小卷蛾革腹茧蜂（Ascogaster olethreuti）和卷蛾长体茧蜂（Macrocentrus sp.）对寄主兴安落叶松（Larix gmelinii）的9种不同浓度挥发物的行为反应。结果表明,对雌蛾产生引诱作用的挥发物为3-蒈烯、水芹烯,产生驱避作用的挥发物为月桂烯、罗勒烯、莰烯;（R）-α-蒎烯表现为低浓度引诱高浓度驱避。对雄蛾产生引诱作用的挥发物为（S）-β-蒎烯,产生驱避作用的挥发物为月桂烯、3-蒈烯、（S）-α-蒎烯、莰烯。对小卷蛾革腹茧蜂有引诱作用的挥发物为（S）-β-蒎烯、（S）-α-蒎烯、叶醇,产生驱避作用的挥发物为罗勒烯、莰烯、水芹烯;对卷蛾长体茧蜂有引诱作用的挥发物为（S）-β-蒎烯、（S）-α-蒎烯、（R）-α-蒎烯、叶醇,产生驱避作用的挥发物为罗勒烯、水芹烯。说明在利用推拉策略防控松瘿小卷蛾时,月桂烯、叶醇和（S）-α-蒎烯可用于保护目标林,驱避害虫吸引天敌;水芹烯可以结合化学防治施用于饵木林,诱杀害虫而驱避寄生蜂。