肝素钠精制工艺研究

为提高肝素钠粗品效价,改善产品色泽,采用二次盐解、双氧水氧化和脱色等工艺对肝素钠粗品进行精制,并探讨工艺条件对产品效价、收率的影响。结果得到最佳精制工艺条件:盐解质量浓度为2％,盐解pH为8.0,醇沉体积浓度45％,氧化剂(双氧水)体积分数为3％。该精制工艺能够有效地提高效价(平均比粗产品提高1.5倍),收率较高,并具有操作简便、省时等特点。     

软件预测和MAST技术筛选mRNA反义核酸靶点的比较

基因mRNA的结构靶点筛选是反义核酸药物研发的一个难题 .兔 (Oryctolaguscuniculus) β珠蛋白基因mRNA的结构靶位点通过运用MAST技术筛选获得 ,和计算机软件RNAstructure3 71模拟分析的位点进行了比较 ,也和寡核苷酸微阵列杂交技术筛选获得的靶点结果 (M .Natalie ,1 997)进行了比较 ,显示 :据MAST技术获得的兔 β珠蛋白基因 2个反义核酸结合靶位点 ,和用RNAstructure3 71软件给出的模拟分析的 2个靶位点相同 ,且它们与寡核苷酸微阵列杂交技术的结果完全一致 .运用MAST技术筛选获得绿色荧光蛋白 (GFP)mRNA有 4个结构靶位点 ,体外分析表明这 4个靶位点均有效 ,其中有 3个与RNAstructure3 71软件分析的靶点相同 ,但计算机模拟推荐的结构靶位点较多 ,而且随着基因长度增加确认靶位点的难度增大 ,获得的靶位点还需要实验验证 ,计算机软件模拟分析对实验筛选靶点、设计反义核酸有辅助价值 .MAST方法能筛选各种长度基因mRNA的全部可及位点和准确给定核苷酸的起止位置以供设计反义核酸 ,具有简单快捷的优点 ,将能为反义核酸设计起重要作用 .     

骨关节炎相关Smad3突变基因的克隆及其初步的功能分析

以前的研究结果显示Smad3错义突变(P197N→I)可能与骨关节炎发生的病理过程有关。本研究构建了带有该点突变的Smad3 cDNA的表达载体,转染Smad3基因缺失的成纤维细胞,检测细胞培养液中MMP-2的表达水平和活性变化。结果显示,转染野生型Smad3表达载体可以使Smad3基因缺失的成纤维细胞MMP-2表达活性明显降低,而转染Smad3突变体表达载体丧失对MMP-2表达活性的调节作用。本研究结果提示骨关节炎相关的Smad3突变体可能丧失对成纤维细胞表达MMP-2的抑制作用。     

微卫星的构成及其检测技术

微卫星标记是近几年来发展起来的一种新型分子标记,由于其具有检测方便,多态性高、共显性遗传、符合孟德尔遗传定律、重复性好等优点,所以在动物遗传育种中作为标记辅助选择的手段日益得到广泛关注。试就微卫星的构成及特点、以及检测技术及应用作一综述,旨在为该技术的推广应用提供理论依据。     

杉木解酚菌的研究

从杉木林土壤中筛选到5株高效解酚菌(F2、F3、F4、F7、F15),结果表明,F4、F33d,F2、F155d能将600rng     

应用基因芯片技术检测肝组织的基因表达

为检测正常肝组织中的基因表达状况,采用cDNA microarray技术对正常肝组织中表达的1500个基因进行定量,结果为97个基因较高表达,1010个基因中度表达,380个基因低表达,结果是cDNA microarray技术是大规模检测基因表达的有效方法。     

西双版纳热带季节雨林林窗内幼树叶生长与虫食动态

 研究了西双版纳热带季节雨林6种乔木幼树在林窗中的叶生长与叶虫食动态。6种幼树叶生长主要在雨季(5～10月),在旱季雾凉期(11～2月)叶停止生长。阳性树种旱季干热期(3～4月)开始叶生长,顶极树种至5月雨季初才开始叶生长。表明雾凉期低温抑制两类树种叶生长,干热期水分不足抑制顶极树种叶生长。叶生长同步性(每两个月的叶生长量变异系数C．V．)顺序为：望天树(Shorea chinensis,1.42)>金钩花(Pseuduvaria indochinensis,1.41)>八宝树(Duabanga grandiflora, 1.02)>云南石梓(Gmelina arborea,0.98)>团花树(Anthocephalus chinensis,0.84)和铁刀木(Cassia siamea,0.84)。旱季造成一些种类幼树出现落叶高峰,严重叶虫食也导致云南石梓在7～8月出现落叶高峰。叶虫食主要出现在雨季,团花树和云南石梓在干热期叶生长能减少昆虫取食,但此时铁刀木叶同步生长却不能降低食叶昆虫危害。6种幼树叶生长量年进程与叶虫食量年进程间存在正相关,其中望天树、金钩花、八宝树和团花树分别达到显著(p<0.05)或极显著(p<0.01)水平。望天树和金钩花在雨季初叶同步生长能减轻叶虫食。食叶昆虫偏爱取食幼叶,6种幼树平均幼叶的虫食量占总虫食量的72.9％,幼叶虫食速率平均为成熟叶的4.3倍。     

温度对六种外来杂草过氧化物酶同工酶谱的影响

应用聚丙烯酰胺垂直板凝胶电泳 ,比较了加拿大一枝黄花 (Solidagocanadensis)、小飞蓬 (Conyzacanadensis)、野塘蒿 (Conyzabonarinsis)、钻形紫菀 (Astersublatus)、一年蓬 (Erigeronannuus)和马缨丹 (Lan tanacamara)等 6种外来杂草在 3 8、2 5、5°C处理 60h后的过氧化物酶同工酶谱差异 ,分析了酶谱差异与对温度适应的关系。结果表明 ,温度变化对一年蓬、小飞蓬、钻形紫菀过氧化物酶同工酶谱的影响相对较小 ,野塘蒿通过增加酶带、调整同工酶的组成来适应温度的变化 ,反映出这 4种杂草对温度变化具有较强的适应能力 ;加拿大一枝黄花表现出对高温的适应能力较弱 ,对低温适应性较强 ,马缨丹对温度变化表现出相反的适应特点。     

楝树籽提取物对土壤供氮和氮肥利用率的影响

研究了楝树籽不同方式的提取物（NI,NⅡ）对普通铁质淋溶土壤,简有水耕人为土壤供N和N肥利用率的影响。NI可在一定程度上抑制两种土壤产生NO3－N,NⅡ在两种土壤上前期均能显著固定NH4^ -N并在后期释放出NH4^ -N。如果NI和NⅡ2种提取物同时与化肥N施入土壤,则可明显改善土壤的供N状况,使这与作物需N过程更吻合。盆栽实验证明,NⅡ可显著提高肥旱耕人为土壤上作物对N肥的利用率。     

棕色固氮菌nifS敲除菌株的构建

从Azotobacter vinelandii中通过PCR扩增了5’和3’端分别缺失264bp和261bp的nifS'片段,克隆至载体pUCl8,形成重组质粒pUCS,再通过同源重组的方法,将pUCS插入Azotobacter vinelandii的nifS中,形成够阻断突变体SUl,经Southern杂交和：PCR扩增,证明所得确为nifS阻断突变株。SUl在外加氮源的BBGN培养基中能够快速生长,但在Burk's无氮培养基中,生长却极其缓慢,表明,nifS基因的破坏,已造成SU1的固氮能力接近完全丧失。该突变体的成功构建,为进一步从中纯化固氮酶两组分,研究nifS对固氮酶结构及功能的影响及iscS与nifS之间的关系奠定了良好的基础。