颌突外胚间充质干细胞(EMSCs)的体外分离及鉴定

外胚间充质(ectomesenchyme)是一种胚胎发育早期颅面部出现的多能性结构(multipotentstructure),大多数颅面部结构和组织均由其衍生而来,这提示外胚间充质中存在一种干细胞,即外胚间充质干细胞(ectomesenchymalstemcells,EMSCs)。为了分离和鉴定EMSCs,对E125的SD大鼠颌突组织细胞进行了流式细胞学分析,发现其中的外胚间充质细胞表达多种神经谱系和中胚层谱系的标志,包括p75、CD57和nestin等。根据此特点,采用磁细胞分离技术对p75+的颌突外胚间充质细胞进行了分离和克隆培养。克隆分析表明,单个p75+细胞经过10～14d培养,可以形成由两种或两种以上细胞组成的多潜能性克隆(multipotentclone),提示该群外胚间充质细胞具有多潜能性。同时,亚克隆分析表明,多潜能性子克隆中的单个p75+细胞具有再次形成多潜能性克隆的能力,说明这些细胞在体外具有自我更新的能力。这些结果提示,p75+细胞同时具有多潜能性和自我更新能力,因此是外胚间充质干细胞。该干细胞的分离对于口腔颅面部的起源和发育研究无疑具有重要意义。此外,该干细胞的高度可塑性也预示它可以作为一种新的种子细胞,为组织工程皮肤、肌肉、软骨的研究提供新思路。     

HA结合肽的筛选与序列分析

利用噬菌体随机十二肽库对羟基磷灰石进行结合肽筛选,经4轮生物淘洗和选择、噬菌体扩增和DNA测序,获得一组多肽序列,其中含有较高比例的脯氨酸、亮氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺以及疏水氨基酸。经Blast分析、CLUSTALW多重序列比对推得羟基磷灰石结合肽可能的结合基序为VLPP、LP(X)₆PL/X、PP(X)_4~6P,(X为任意氨基酸)。认为脯氨酸等氨基酸的高比例特性以及结合基序特征可以很好地解释羟基磷灰石的生物可利用性和安全性。在生物体中未发现结合肽有价值的相似DNA编码序列和多肽、蛋白质序列。噬菌体单克隆反筛功能测定进一步确定了相关序列对羟基磷灰石的结合能力。     

Molecular Phylogeny and Species Speciation of Adoxaceae. s. s

It remains unclear about the speciation and phylogeny of Adoxaceae s. s ., a small family with 3 genera and 4 species . In this paper , ITS ( nuclear DNA internal transcribed spacer) regions of Adoxa orientalis and Sambucus adnata were firstly sequenced . Phylogenetic trees were constructed for all species of Adoxaceae (four species ) , Sambucus, Viburnum and four genera of Caprifoliaceae . The divergences among four species of this family were further calculated based on the calibration of the fossil records of the Caprifoliaceae and the general evolutionary rate of herbs for ITS . The phylogenetic analyses did not support the previous assumptions on the phylogeny and species divergence of Adoxaceae s. s . based on the morphological evidence : Tetradoxa is not the firstly diverged and it clustered with two species of Adoxa as a monophylogenetic group , paralleling to the other lineage comprising of monotypic Sinadoxa . The allopatric speciation at the diploid level might have contributed to the differentiation among Sinadoxa corydalifolia, Tetradoxa omeiensis and Adoxa moschatellina and the polyploidy to the origin of A. orientalis . The crude timing based on ITS sequence differentiation suggested a recent divergence among all four species probably between the late Miocene and the Tertiary and this speciation process might be closely correlated with habitat fragmentation and change due to the extensive uplifts of the Qinghai-Tibetan Plateau and climatic oscillation during the glacial and interglacial ages occurred at this stage .     

不同基因型辣椒光合及生长特性对弱光的响应

通过遮光使光照强度降低65%～70%,以研究弱光条件对不同基因型辣椒光合特性、同化物分配、产量形成和幼苗生长的影响.结果表明：弱光下辣椒净光合速率（P_n）、暗呼吸速率（R_d）、夜间呼吸速率（R_n）、蒸腾速率（T_r）、水分利用效率（WUE）、光补偿点（LCP）、CO₂补偿点（CCP）和羧化效率（CE）下降,表观量子效率（AQY）上升.弱光下辣椒成株期光合作用的限制因素是非气孔因素.弱光处理使辣椒幼苗高/粗比和比叶面积增加,根/冠比、全株干样质量及壮苗指数显著下降.弱光显著抑制了辣椒生物产量与经济产量的形成,使植株同化物向茎叶的分配比例增加,向果实的分配比例减少.辣椒（果实味辣）在弱光下具有较低的光补偿点,以及较高的相对壮苗指数、相对单株产量和相对坐果率,耐弱光性普遍强于甜椒（果实味甜）.     

转录因子网络与植物对环境胁迫的响应

转录因子所介导的基因表达调控网络在植物抵御各种环境胁迫的反应中具有重要功能.已鉴定的参与植物环境胁迫响应的转录因子及家族有APETALA2/EREBP、BZIP、WRKY和MYB等.这些转录因子组成调控网络,精细调控植物胁迫反应中各种相关基因的表达.转录因子及其调控网络的遗传修饰已成为从系统水平上探索胁迫生物学和提高植物胁迫耐性和抗性的有效工具.     

葡萄枝条水分含量变化与抗寒性关系

以12个葡萄品种1年生枝条为试材,通过0、-15、-18、-21、-24、-27、-30、-133℃8个低温处理24h后,测定不同低温胁迫下葡萄枝条的,6-含水量、束缚水含量、自由水含量和束缚水与自由水的比值。结果表明：随着处理温度的降低,同一品种枝条的总含水量基本恒定,自由水含量呈先下降再升高的趋势,束缚水含量和束缚水与自由水的比值均呈现为先升高再下降的趋势;束缚水与自由水的比值随低温胁迫的变化呈Cubic方程,不同品种束缚水与自由水的比值达到最高点的温度不同,‘双红’、‘北冰红’、‘左优红’的拐点温度在-25℃以下,‘775’、‘巨峰’的拐点温度在-20℃左右,‘雷司令’、‘黑比诺’、‘霞多丽’的拐点温度在-18℃左右,‘赤霞珠’、‘梅鹿特’、‘白比诺’、‘红地球’拐点温度在-16～17℃。对葡萄休眠枝条进行低温处理后,通过测定束缚水与自由水含水量变化鉴定葡萄品种的抗寒性是可行的。     

基于表型和核型及分子证据的甘蔗德阳大叶子属种分析

该研究以甘蔗属热带种、中国种、印度种和杂交品种为参照,对‘德阳大叶子’进行表型、核型和SSR分子标记分析,以明确德阳大叶子的属种关系,为种间杂交利用奠定基础。结果表明:(1)表型性状和SSR标记聚类结果都能将‘德阳大叶子’、热带种、中国种和杂交品种明显分成3个类群;其中‘德阳大叶子’与热带种、中国种、印度种和杂交品种的表型平均相似性系数分别为0.51、0.71、0.55和0.31,表型聚类与中国种最近。(2)‘德阳大叶子’的核型分析显示,体细胞染色体数为2n=116,核型公式为:2n=116=4M+104m+8sm,核型属于2B型,符合中国种染色体数范围。(3)利用13对引物进行SSR标记的UPGMA聚类结果表明,‘德阳大叶子’与热带种、中国种、印度种和杂交品种间的平均相似性系数分别为0.70、0.69、0.68和0.69,种间相似性系数相差不明显。研究认为,‘德阳大叶子’属于中国种或是中国种杂交后代的低世代材料。     

求助者中心疗法结合放松训练对肿瘤患者负性情绪的影响

目的探讨求助者中心疗法结合放松训练对肿瘤患者负性情绪的影响。方法采用焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)和90项症状清单(SCL-90),筛选存在负性情绪的120例肿瘤患者,按随机数字表法分成A、B、C、D 4组。在肿瘤常规治疗的基础上,A组病人给予传统的常规护理,B组病人应用求助者中心疗法干预,C组病人采用放松训练,D组病人给予求助者中心疗法和放松训练联合干预,干预6周后再次进行SAS、SDS、SCL-90测评,比较各组心理干预疗法对患者负性情绪的影响效果。结果传统护理组患者干预前后负性情绪无明显改善(P0.05);应用心理疗法干预的B、C、D组患者干预前后不良情绪均有改善,差异有统计学意义(P0.01);联合应用两种心理疗法的D组与单独应用其中一种方法的B、C组组间比较差异有统计学意义(P0.05);而单独应用一种心理疗法的B组与C组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论求助者中心疗法结合放松训练能更有效改善肿瘤患者的焦虑、抑郁等负性情绪。     

牡蛎黄酒的研制及其功能性成分和抗氧化活性的研究

本研究采用酶解和发酵的方法,将牡蛎酶解液有机添加到北方黄酒的传统生产工艺中,研制出具有更强营养保健功能的牡蛎黄酒。首先对牡蛎酶解条件进行优化,料液比为5:1,加酶量为1%,酶解温度40℃,酶解时间为8 h时,水解度达到最高的31.21%,牛磺酸含量最高达到626.96μg/mL。进而比较了添加和不添加牡蛎酶解液的两种黄酒(牡蛎黄酒和北方黄酒)的营养价值和抗氧化活性。分析比较发现牡蛎黄酒比北方黄酒游离氨基酸增加了74.98%,牛磺酸含量增加了400%。新研制的牡蛎黄酒功能性成分显著增加,抗氧化性能增强。     

EV71与CA16双价灭活疫苗诱导小鼠免疫原性研究

目的评价EV71和CA16双价灭活疫苗免疫小鼠诱导的体液免疫和细胞免疫应答。方法分别应用EV71和CA16双价疫苗、EV71和CA16单价疫苗按单针、两针(0,14 d)的程序免疫小鼠,采用细胞病变法检测血清第1针免疫后21 d时中和抗体效价,应用LUMINEX液相芯片技术检测小鼠脾单个核细胞体外经抗原刺激分泌细胞因子的水平。结果双价疫苗与EV71单价疫苗单针、两针免疫相比,EV71中和抗体几何平均值相近(118.8∶84.0;159.5∶156.8,P0.05)。双价疫苗与CA16单价疫苗单针免疫诱导的CA16中和抗体均为阴性;两针免疫CA16中和抗体几何平均值一致(30.0∶26.9,P0.05)。加强免疫7 d后,小鼠脾MNC经EV71抗原刺激,双价疫苗较EV71单价疫苗诱导Th2类细胞因子IL-4、5、6、10和炎症因子TNF-α的分泌水平显著增高(P=0.020,P=0.027,P=0.038,P=0.019,P=0.026);MNC经CA16抗原刺激,双价疫苗与CA16单价疫苗相比诱导细胞因子水平差异无统计学意义(P0.05)。结论双价疫苗可诱导与单价疫苗相似的中和抗体应答水平,并可提高Th2类细胞因子应答,研究为EV71和CA16双价灭活疫苗的研发提供了实验依据。