不同类型莲资源的RAPD聚类分析

利用17个随机引物对32份莲属(Nelumbo)品种资源进行RA PD分析.扩增形成207条谱带,其中多态带193条,占93.23%,显示该属植物在我国具有丰富的遗传多样性.结果还表明:(1)莲属种质资源可分为3个品种群:花莲、子莲和藕莲,与传统的园艺学分类相吻合.(2)美洲黄莲与中国莲的花莲之间在DNA水平上差异不大,遗传背景与花莲更相似.(3)藕莲、子莲和花莲可能由不同遗传背景的野莲演化而来.     

对虾神经系统中微管蛋白的生化和免疫荧光鉴定

采用反复解聚-聚合的方法从对虾腹神经索中分离纯化了微管蛋白。用阴离子去垢剂 SDS处理,将对虾神经纤维中的微管蛋白解聚为分子量相似的二条链。它们的分子量都在55,000左右。这与许多其他作者从各种不同组织中提取的微管蛋白的相同。以纯化的小鸡脑微管蛋白作抗原,制备了兔抗小鸡脑微管蛋白的抗体作第一抗体,以 FITC 羊抗兔抗体作第二抗体,研究了微管蛋白在对虾腹神经索中的神经纤维内的分布。令人意外的是除了对虾神经纤维特有的微管鞘与轴浆外,对虾神经纤维的髓鞘部位也呈现明显的荧光反应。这一结果提示,对虾神经纤维髓鞘中也应含有相当量的微管蛋白,但用同样方法在其它种动物(如大鼠)的有髓纤维的髓鞘中却未见阳性反应。     

单增李斯特菌生物膜及其形成机制的研究进展

单增李斯特菌(Lm)是重要的人兽共患食源性病原菌。Lm生物膜与其致病性和耐药性密切相关。影响Lm生物膜形成的关键因子有鞭毛糖蛋白、胞外基质和群体感应系统等。鞭毛糖蛋白能促进菌体聚集,从而直接影响生物膜的形成。胞外DNA参与Lm粘附和生物膜早期的形成,并与胞外多糖和胞外结合蛋白一起构成生物膜胞外基质。Lm的Agr群体感应系统正调控生物膜形成,是一种集合毒力因子、耐药因子和生物膜的整体水平调控网络体系。     

在无创性肢体缺血预适应中P53基因对心肌梗死后心肌细胞凋亡影响的研究

目的：通过对无创性肢体缺血预适应的动物模型观察,探讨细胞凋亡在其中的作用,以及p53基因对其进行的调控。方法：采用TUNEL标记技术研究无创性肢体缺血预适应心肌细胞中细胞凋亡现象,并采用聚合酶连反应单链构象多态法（PCR-SSCP）研究p53基因的突变情况。结果：与缺血再灌注组（I/R）相比,无创性肢体缺血预适应组（NDLIP）凋亡率较低,差别有统计学意义。NDLIP和经典缺血预适应组（IP）间差别不显著。RIP组p53基因突变率比I/R组高,差别有统计学意义,NDLIP和经典缺血预适应组（IP）间差别不显著。结论：无创性肢体缺血预适应组野生型p53基因较少,突变型p53基因较多。无创性肢体缺血预适应对心肌的保护作用可能是通过增加突变型p53基因抑制细胞凋亡来实现。     

黑曲霉EIM-6 pelA基因的克隆及生物信息学分析

目的:克隆黑曲霉EIM-6果胶裂解酶A基因pelA,用于分析果胶裂解酶A的功能与结构。方法与结果:根据GenBank上黑曲霉pelA保守序列设计引物,采用RT-PCR获得黑曲霉EIM-6pelA基因;序列分析表明,pelA基因具有4个内含子,开放读框为1140 bp,编码379个氨基酸残基,含有由20个氨基酸残基构成的信号肽序列;生物信息学分析表明,果胶裂解酶A为具有一定亲水性的稳定酸性分泌蛋白,具有明显的跨膜结构域,β片层结构是该蛋白的主体结构,空间结构是由反平行的β片层结构为基础包围组成的大环,保守功能区域为Pec_lyase_C结构域。结论:克隆获得黑曲霉EIM-6pelA基因,并进行了生物信息学分析,为蛋白质工程改造果胶裂解酶A奠定了基础。     

克隆植物中的劳动分工及其生态学效应

劳动分工是经济进步的发动机,克隆植物也具有与经济学相类似的劳动分工现象。环境异质性、分株专化与合作以及分株潜在的生长独立性是克隆植物劳动分工发生的基本条件。根据发生条件可以把克隆植物劳动分工分为环境诱导型和遗传型两种。克隆植物能够通过利用形态或生理可塑性和生理整合、劳动分工机制实现对生境中异质性资源的有效利用。克隆植物劳动分工的生态学效应在于：提高对局部资源的摄食效率、克服局域资源限制、实现生物量的增益与适合度的提升,上述效应的机理可以用经济学边际成本分析和规模报酬规律来解释。同时,劳动分工还能提高种间竞争力、增强觅食有效性、减弱种内自疏,但同时,克隆植物在不稳定环境下的劳动分工效应也会增加生存风险。随着现代生物学研究手段的不断应用,有关克隆植物劳动分工的研究将会得到更加深入的发展。     

长春新碱诱导建立人结肠癌多药耐受性小鼠模型及MDR1和MRP1基因表达

目的建立人结肠癌多药耐受性动物模型并初步探索其耐药机制。方法结合体内外诱导方法建立人结肠癌多药耐受性动物模型,利用VCR和CTX的肿瘤抑制实验评价其MDR特性;利用real-time PCR和West-ern blotting等方法分析其P-gp/MDR1和MRP1基因和蛋白的表达。结果肿瘤抑制实验结果显示,MDR和敏感型结肠癌模型的肿瘤生长速度差异不显著,MDR结肠癌动物模型对于VCR和CTX的耐药性均有较大程度的提高;表达分析结果显示,人结肠癌MDR动物模型的P-gp/MDR1表达水平有较大提高,而MRP1表达没有显著变化。结论人结肠癌多药耐受性动物模型具有较好的多药耐受性,其多药耐受性表型主要是由于P-gp/MDR1过量表达所导致。     

特异结合人禽流感病毒H5N1的scFv分子性能鉴定

目的从人源化噬菌体抗体库（human single fold scFv libraries I＋J）中筛选到能高亲和性、特异结合人禽流感病毒H5N1的单链抗体,为建立H5N1快速筛查试剂和人源化治疗单抗奠定基础。方法以H5N1病毒的血凝素（hemagglutitin,HA）蛋白和核蛋白（nucleoprotein,NP）为目的蛋白,对上述单抗噬菌体文库以亲和性为原理进行筛选,经过3轮筛选富集后,随机挑选了96个噬菌体克隆扩增培养,ELISA法挑选能特异性、高亲和性结合目的蛋白的噬菌体克隆,并换用HB2151宿主菌对阳性单链抗体克隆进行可溶性表达,ELISA法鉴定可溶性单链抗体的结合活性,PCR扩增阳性克隆的轻、重链基因片段,并对阳性单链抗体分子测序和序列分析。结果经过3轮筛选,分别从96个噬菌体克隆中挑选到了两株能特异结合NP蛋白、3株能特异结合HA蛋白的单链抗体,PCR扩增都得到了长为300、302和935bp的轻链、重链和轻链-连接片段-重链的基因片段,测序结果分析发现上述5条单链抗体片段在轻链的47、49、50、51、53、54、56、96、97、98和99位的氨基酸组成不同,而特异结合NP蛋白的单链在重链区域氨基酸组成完全相同,而特异结合HA蛋白的单链在重链的44、47、85、86、87、88和89位氨基酸组成不同。结论从噬菌体抗体库中筛选到的特异结合HA和NP蛋白的单链抗体片段,可为进一步研发H5N1快速筛选试剂和人源性治疗抗体奠定基础,也可为鉴定HA和NP蛋白中的抗原决定簇提供结构信息。     

新型仓贮超声雾化熏蒸装置的研制

针对目前粮食仓贮熏蒸剂(即磷化氢)防虫不防霉,且施用时对环境和操作人员均存在安全隐患的现状,为将具有自主知识产权的纯天然驱虫抗霉复合精油产品很好地应用于仓储领域,一款新型仓贮超声雾化熏蒸装置被设计研制,并在国家级标准粮库微缩模型(1∶200)中进行相关功能技术参数测定。结果显示,样机在常温下能连续工作48h,远大于实际所需要的工作时间;样品雾化后,工作区中分布的雾滴粒径为几个微米级;GC-MS分析证明雾化后复合精油的组分种类、比例及功效组分浓度没有改变,就整体而言具有一定的纯化作用;雾化的精油量与功率和时间均呈良好线性关系。上述数据说明,所研制的超声雾化装置完全适用于新型防虫抗霉复合精油的雾化,实际应用时若配合仓库鼓风系统雾化效果会更好。     

Optimal fat loads and long-distance flights by migrating Knots Calidris canutus, Sanderlings C. alba and Turnstones Arenaria interpres

Arctic waders often build up large fat loads and complete their migratory journeys by a few long-distance flights between traditional staging sites. Optimal fat loads and choices of staging sites differ depending on whether the birds are adapted to minimize energy or time spent on migration. In the latter case, we predict that the birds will depart for the next staging site when the instantaneous speed of migration expected after arrival at the next site, exceeds the corresponding speed at the departure site. The instantaneous migration speed is a function of the rate of fat deposition and the current fat load. As a consequence of this, overloading (birds deposit larger fat loads than needed merely for covering the flight distance to the next destination) and by-passing of possible, but low-quality staging sites, are expected under specific conditions in time-selected migration.
Estimates of fat deposition rates and departure fat loads were obtained by captures of Knots Calidris canutus , Sanderlings C. alba and Turnstones Arenaria interpres in W. Iceland during spring migration. Further fat deposition data referring to spring migration of these species were compiled from the literature. Fat deposition rates at different sites, as measured by the daily gain in mass relative to lean body-mass, range between 1.0 and 3.6%/day, and departure fuel loads (in % of lean body-mass) between 27 and 73%.
Comparison with flight range estimates suggests that overloading may be a regular phenomenon during spring migration of Knots, Sanderlings and Turnstones. Furthermore, fat deposition rates at different staging sites, and the general difference in migration patterns between spring and autumn, indicate that by-passing of possible staging sites may well occur. Hence, it cannot be excluded that the waders' migratory habits primarily serve to maximize the overall speed of migration.