中国鄂温克、鄂伦春、达斡尔族永生细胞系的建立与保存

本文采用EBV（Epstein?Barr Virus）上清液转化B淋巴细胞,并加入环胞霉素A（Cyclosporine A）抑制T淋巴细胞,成功地对中国东北地区鄂温克族、鄂伦春族及达斡尔族的部分个体建立了永生细胞系,其中鄂温克族49株,鄂伦春族40株,达斡尔族51株,总计140株。永久保存我国特有民族的基因组,为分析其遗传学差异奠定了基础。 Abstract：The immortal lymphoblastoid cell lines were established by EBV transformation of B cells and addition of cyclosporin A to inhabit the activity of T cells.In the present study ,140 immortal cell lines of the Ewenki,the Oroqen and the Daur ethnic groups in the Northeast China were established .This is an important part of the research of human genome diversity for the exploration of the origin and progression of different ethnic groups ,and also provide enough research materials for further studies.     

壳聚糖基复合材料类新型生物医用材料

壳聚糖是由N-乙酰基-D-葡萄糖胺和D-葡萄糖胺单元通过β-D(1→4)连接组成的碱性线性多糖。壳聚糖由于具有良好的生物相容性、生物可降解性和生物活性,已广泛应用于生物医学领域。壳聚糖由于具有许多的活性基团,能进行各种衍生化反应以及与其他材料进行复合制备各类复合材料。本文主要介绍壳聚糖与各类材料如蛋白质、糖胺聚糖、DNA、可降解的聚酯、无机物、合成(离子型和非离子型)的聚合物、或脂质的复合物及其在生物医学上的应用。     

cAMP参与烟草悬浮细胞的ABA信号转导

ABA诱导型启动子 (rd2 9A)重组到报告基因 (GUS)的上游构建表达载体。通过农杆菌介导转化烟草 ,获得转基因植株。将转基因植株诱导愈伤组织 ,建立稳定、均一的转rd2 9A_GUS融合基因的悬浮培养细胞系。用ABA处理悬浮细胞 2 4h后GUS活性显著升高 ,说明外源ABA能够诱导rd2 9A启动子的表达 ,获得了用于ABA信号转导研究的实用细胞系。在ABA激活表达的细胞介质中加入尼克酰胺 (cADPR合成酶的抑制剂 )或U73 12 2 (PLC抑制剂 )只能部分抑制ABA的效应 ,但如果加入蛋白激酶抑制剂K2 5 2a ,抑制效果达 95 %以上。用可跨膜的cAMP的类似物8_Br_cAMP处理细胞发现 ,它能代替ABA的作用 ;当介质中加入 1mmol/LIBMX(磷酸二酯酶的抑制剂 )增加cAMP的稳定性 ,发现低浓度的 8_Br_cAMP与ABA相同的效应。以上结果表明cAMP参与了烟草悬浮细胞中ABA信号的传递。     

利用ISSR-PCR技术分析香蕉枯萎病菌的遗传多样性

摘要:【目的】应用简单序列重复区间(inter-simple sequence repeats,ISSR)分子标记技术对全国主要香蕉产区95个香蕉枯萎病菌菌株进行ISSR分析,了解其遗传多样性,为香蕉品种的合理布局及枯萎病的防治提供理论依据。【方法】选用8条引物,对香蕉枯萎病菌进行ISSR-PCR分析,采用NTSYSpc v2. 10e软件分析其遗传结构。【结果】从33条随机引物中筛选出8条重复性好、特异性高的引物,共产生52个ISSR分子标记,其中92.3%的片段具有多态性。菌株间的Nei 遗传距离(D)为0.57－1.00,供试菌株以遗传距离为0.68阀值可以分为A、B、C、D、E、和F共6个类群,所占的比例分别为51.06%、5.20%、2.08%、39.58%、1.04%、1.04%。【结论】病原菌菌株间的遗传变异很大,差别很明显,ISSR聚类组群的划分与病原菌的寄主和小种有很明显的相关性。     

16S rRNA Gene-Based Analysis Reveals the Effects of Gestational Diabetes on the Gut Microbiota of Mice During Pregnancy

Hyperglycemia is one of the metabolic characteristics of gestational diabetes mellitus (GDM). Considering that GDM is able to cause changes in the gut bacterial community and function in the mother’s intestine compared with healthy pregnant women, we aimed to clarify the correlation between hyperglycemia and gut microbiota in a GDM mouse model. Mice were divided into four groups: CE0, GDME0, CE18, and GDME18. C and GDM represent the control (C) and GDM groups, while E0 and E18 represent early or late trimesters of embryo day 0 or 18, respectively. GDM mouse models were created by injecting streptozocin on embryo day 0. The gut microbiota was characterized using the Illumina MiSeq platform targeting the V3–4 region of the 16S rRNA. Operational taxonomic unit analysis revealed a significant difference between CE18 and CE0, in which Akkermansia and Prevotellaceae were more abundant in the early trimester group, CE0. Moreover, the Clostridiales_vadinBB60 group was more abundant, while Parasutterella was much lower in GDME18 than in CE18. The gut microbiota community structure correlated with the GDM state, and LEfSe and molecular ecological network analysis further confirmed these diversities. Our research shows that changes in the community structure of the gut microbiota from the early to late trimester correlate with the GDM state. Changes in the abundance of the probiotic bacteria Akkermansia, Prevotellaceae, and Parasutterella may be involved in the GDM state.     

肠道修复：一种利用益生菌减少重金属积累的新思路

近年来受到重金属工业废水的排放及人类日常活动的影响,我国大面积土壤中重金属含量急剧增高。不同重金属可能通过食物链进入人体,给人类健康带来隐患。因此,减少重金属在动物体肠道中的积累是降低重金属危害的一个重要课题。研究显示,一些益生菌能够在体内外环境中有效地结合重金属,但人们对益生菌结合重金属的能力,及其对重金属的肠道修复机理了解较少。本文针对目前镉、铅、铬等重金属对环境与动物体健康造成严重危害的现状,分析了各类重金属的污染来源,概括了益生菌在环境与动物体肠道中对各种重金属的修复情况及作用机理,重点考察了益生菌在动物体肠道环境中与重金属相互作用的机理研究,同时对未来利用益生菌制剂直接减少人体肠道内重金属积累进行了展望。     

缓激肽加强辣椒素引起的关节传入神经细纤维的反应

利用猫膝关节传入神经单纤维记录技术,观察了正常和炎症关节传入Ⅲ、Ⅳ类纤维对缓激肽(BK)的反应以及BK对辣椒素(CAP)反应的影响。在29只猫上共计记录了51条单纤维。其中正常关节22条,炎症关节29条。与正常关节传入纤维比较,炎症关节纤维中有自发放电的单位比例明显增多,且放电频率较高,被动运动分型以低机械阈值的纤维居多,CAP兴奋的阈值也较正常为低。部分纤维在使用BK后,自发放电明显增加。无论在正常还是炎症关节,被BK兴奋的单纤维中约有1/3不被CAP兴奋,而CAP兴奋的纤维则几乎全部可为BK激活,BK兴奋伤害性传入纤维的选择性不如CAP。结果提示:(1)BK可以使关节传入纤维致敏,使其对化学刺激剂CAP反应增强,并可使部分对CAP无反应的单位出现对CAP的反应;(2)炎症造成的致敏背景是外源性炎症介质易化感受器反应的重要条件;(3)对BK的反应性是纤维被BK致敏的一个条件。     

The direct electrocatalysis of phenazine-1-carboxylic acid excreted by Pseudomonas alcaliphila under alkaline condition in microbial fuel cells

In this paper, we reported a kind of exoelectrogens, Pseudomonas alcaliphila (P. alcaliphila) strain MBR, which could excrete phenazine-1-carboxylic acid (PCA) to transfer electron under alkaline condition in microbial fuel cells (MFCs). The electrochemical activity of strain MBR and the extracellular electron transfer mechanism in MFCs were evaluated by cyclic voltammetry (CV) and electricity generation curve measurement. The results indicated a soluble mediator was the key factor for extracellular electron transfer of strain MBR under alkaline condition. The soluble mediator was PCA detected by gas chromatography-mass (GC-MS) analyses.     

山杏苹果酸酶基因的克隆与生物信息学分析

三羧酸转运体系(柠檬酸,苹果酸和丙酮酸)可为脂肪酸生物合成提供原料乙酰辅酶A与还原力NADPH;而苹果酸酶可催化苹果酸发生氧化脱羧而产生NADPH,是调控脂肪酸代谢的重要酶。山杏种子脂肪酸含量丰富、产油率高,是研究植物油脂代谢的良好材料。本研究以山杏为试材,采用RACE克隆和电子拼接相结合的方法,首次从山杏种子中克隆得到苹果酸酶基因(命名为SaME,GenBank上登记号为JX262381),该基因的cDNA编码区全长1923bp、编码640个氨基酸,预测其编码蛋白分子量为70.15kD、等电点为6.38;同时,运用生物信息学方法对SaME基因编码蛋白的理化特性、结构域和亚细胞定位等方面进行预测分析,结果显示,该蛋白定位在细胞的质体膜上,具有苹果酸酶活性,属于NADP-ME超家族。本文对山杏SaME基因的克隆与分析,为进一步探究苹果酸酶对油脂代谢的调控机制奠定了基础。