CRISPR-Cas9应用于病毒性传染病防控的研究进展

病毒性传染病是威胁人类健康的重要因素,迫切需要新的治疗方法来降低由急性病毒感染如鼻病毒和登革热病毒以及慢性病毒感染如人类免疫缺陷病毒1和乙型肝炎病毒引起的发病率和死亡率.随着分子生物学技术的发展,靶向序列特异性的基因编辑技术成为传染病治疗的有力工具.其中规律成簇间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)-CRISPR相关蛋白9(CRISPR associated protein 9,Cas9)凭借其高效、简便、高特异性等特点被广泛应用于细胞系和动物模型中的传染病治疗,从而成为有前景的新型传染病治疗模式.目前,利用病毒和非病毒载体将Cas9以DNA、m RNA或蛋白质的形式递送到细胞中的可行性研究和评估CRISPR-Cas9体内适用性的临床试验已经在进行中.本篇综述中,我们将对CRISPR-Cas9的原理,其应用于传染病治疗的最新研究进展以及该技术面临的挑战和可预测性的解决方法等加以概述,并进一步展望其未来的发展方向.     

爪鲵呼吸器官的胚后发育

应用石蜡切片和扫描电镜技术,对爪鲵(Onychodactylus fischeri)幼体、亚成体和成体3个不同发育阶段的皮肤、外鳃、咽等呼吸器官进行了显微观察与比较分析,旨在揭示爪鲵不同发育阶段各呼吸器官的演化规律.结果表明,爪鲵的皮肤随年龄的增长而逐渐增厚,幼体阶段其背腹皮肤厚度相差不大,亚成体及成体背部皮肤明显厚于腹部;外鳃是幼体和亚成体爪鲵呼吸器官的重要组成部分,随着发育外鳃逐渐完善,到亚成体阶段达到顶峰,随后逐步退化;咽部是爪鲵的重要呼吸器官,幼体期口腔和咽发育不完善,亚成体咽部逐渐发育,至成体时发育完善.     

影响农杆菌介导白细胞介素-2基因转化番茄的因素研究

利用农杆菌介导法将白细胞介素-2基因（il-2）导入番茄中,对影响其转化的因素进行了分析。结果表明：农杆菌菌种（EHA105和C58C1）、外植体类型（子叶和下胚轴）、带有不同筛选标记（Kan^r、PPT^r、Hyg^r）的载体质粒几个因素对芽诱导分化及转化均有影响。实验共接种转化2018个子叶和下胚轴外植体,获得了47株抗性再生株,对其进行il-2的PCR扩增检测,有44株呈阳性。PCR-Southern杂交证实PCR结果可靠,显示il-2基因已导入到番茄中。     

风箱果有性繁殖研究

对风箱果（Physocarpus amurensis）适宜的采种时期、不同母树种子的成熟差异和幼苗的生长特征进行了研究。结果表明,风箱果种子的最适采种期在7月末,种子成熟后有休眠特性;方差分析表明,不同植株间种子的发芽率和千粒重都达到极显著水平（p<0.01）,并且发芽率与种子重量呈正相关,其相关程度最佳的为幂函数,确定系数是75.75%（p<0.01）;风箱果幼苗类型为子叶出土型,幼苗生物量对根的投资最大,其次是叶,茎的最少,在这3部分生物量投资中,对根和叶的投资比较稳定（其变异系数分别为6.8%和11.03%）,对茎的生物量投资具有较大的变异（其变异系数为21.81%）。基径是衡量风箱果幼苗空间大小的重要数量指标。风箱果构件生物量（根生物量、茎生物量、叶生物量及总生物量）各组分均随基径的增加,呈线性函数形式增长,这表明随着植株的空间扩展,各构件有着相同的物质生产与积累规律。     

大把子杯桩菇：产自山西的一个新物种

基于多基因片段的系统发育分析显示,山西省吕梁山区俗称为大把子的一种传统野生食用蘑菇是隶属于假杯伞科Pseudoclitocybaceae杯桩菇属Clitopaxillus的一个分类学新物种,本研究将其定名为大把子杯桩菇C. dabazi。该种与分布于欧洲的C. alexandri和C. fibulatus形态特征相似并且有密切的亲缘关系。大把子杯桩菇的鉴别特征为菌盖半球形,菌盖边缘稍内卷,土黄褐色至灰白褐色,菌柄粗棒状,具蘑菇香味。大把子杯桩菇在秋季发生,在整个吕梁山脉均有分布,在中北部的管涔山、关帝山区域,主要生长于云杉Picea sp.、落叶松Larix sp.林内的草地上;而在南部的五鹿山一带,则发生于松Pinus sp.、栎Quercus spp.混交林内草地上。本文还提供了杯桩菇属已知3个物种的分种检索表。     

RNAi抑制过氧化物酶基因Rsprx1表达促进萝卜花青素的积累

过氧化物酶是一类广泛存在于生物中的氧化还原酶,被认为参与植物花青素的代谢．本实验利用RNAi技术,干扰萝卜过氧化物酶基因Rsprx1表达. 结果表明, RNAi干扰载体的萝卜植株中过氧化物酶基因(Rsprx1)表达被抑制,过氧化物酶活性显著降低,过氧化物酶同工酶条带减少|而花青素含量在处理第9 d达到最大值|花青苷种类和含量有较大变化: 天竺葵素-3-阿魏酰葡糖苷-5-丙二酰基葡糖苷、天竺葵素-3-ρ-香豆酰二葡糖苷-5-丙二酰基葡糖苷、天竺葵素-3-阿魏酰二葡糖苷-5-丙二酰基葡糖苷和天竺葵素-3-二ρ-香豆酰二葡糖苷5-丙二酰基葡糖苷含量升高; 天竺葵素-3-二葡糖苷-5-葡糖苷、天竺葵素-3-葡糖苷-5-葡糖苷和天竺葵素-3-酰化二葡糖苷-5-葡糖苷含量降低|花青素合成相关基因（Chs、Chi、Dfr、F3h和Ldox）及转录因子（Tt8）的mRNA表达水平在RNAi处理后早期有明显上调．这些结果均表明,萝卜过氧化物酶Rsprx1参与花青素的合成代谢．     

Nbr1-regulated autophagy in Lactoferrin-induced osteoblastic differentiation

ABSTRACT

The molecular mechanism of autophagy in Lactoferrin (LF) induced osteoblast differentiation is not fully demonstrated. In this study, alkaline phosphatase (ALP) activity, alizarin red S staining and ELISA were used to study N-terminal propeptide of type I procollagen (PINP) expression. mRFP-GFP-LC3 adenoviruses, mono-dansylcadaverine (MDC) staining, scanning electron microscopy, and western blot analysis was employed to probe the LF induced autophagy. The interaction between autophagy receptor Neighbor of Brca1 gene (Nbr1) and pp38 was studied. 3-methyladenine (3-MA) and chloroquine (CQ) could inhibit the activity of ALP, PINP and the autophagy in LF group. LF treatment could up-regulate and down-regulate the expressions of pp38 and Nbr1with a dose-dependent manner, respectively. LF could inhibit the recognition of pp38 and Nbr1. In addition, LF can prompt Nbr1-medicated autophagy and prevent pp38 degradation by autophagy. LF can induce Nbr1-mediated autophagy and inhibit pp38 entering into autophagy flux in the physiological process of osteoblast differentiation.

Abbreviations: CQ:chloroquine;LF: Lactoferrin; 3-MA: 3-methyladenine; ALP: Alkaline phosphatase; ANOVA: Analysis of variance; CCK-8: Cell Counting Kit-8; LC3: Microtubule-associated protein light chain3; MDC: Monodansylcadaverine; Nbr1: neighbor of Brca1 gene; PINP: N-terminal propeptide of type I procollagen; PVDF: Polychlorotrifluoroethylene; pp38: phosphorylation p38; RAPA: Rapamycin; SDS: sodium dodecyl sulfate.     

Description of a new record species of Heterodera from China (Tylenchida, Heteroderidae)

A new record species Heterodera ripae was found in the rhizosphere soil of nettle (Urtica sp.) on the bank of the Mangniu River in Shenyang City, Liaoning Province, China. The new record species can be characterized by vulval cone bifenestrate with circular or subcircular semifenestrae, vulval slit length averaging 34.2 μm, vulval bridge mostly broad, underbridge weak, bullae absent; the second-stage larvae stylet knobs rather wide and slightly projecting anteriorly, tail length averaging 43.7 μm and hyaline region length averaging 22.3 μm.     

精确重建古大气CO2浓度的气孔方法

为了更好地理解大气CO2浓度与气候之间的耦合关系,维护自然与人类社会的可持续发展,精确重建古大气CO2浓度的变化尤为重要。在众多研究古大气CO2浓度的方法中,化石植物叶片气孔方法已被证明是一种比较精确和理想的方法。文章介绍了气孔方法恢复古大气CO2浓度的概念、方法以及最新应用,用气孔比率法恢复了中国西北地区早、中侏罗世的大气CO2浓度变化。其趋势为：从早侏罗世普林斯巴赫期一中侏罗世阿林期一巴柔期,大气CO2浓度先是下降,而后持续上升,整个时期的大气CO2浓度在1000—1500ppmv之间,这种趋势与Bernet的碳平衡模型基本一致,并指出恢复的古大气CO2浓度低于碳平衡模型值可能是由于海拔引起的。最后提出了几个方面的研究前景。