Differential stepwise evolution of SARS coronavirus functional proteins in different host species

Background  

SARS coronavirus (SARS-CoV) was identified as the etiological agent of SARS, and extensive investigations indicated that it originated from an animal source (probably bats) and was recently introduced into the human population via wildlife animals from wet markets in southern China. Previous studies revealed that the spike (S) protein of SARS had experienced adaptive evolution, but whether other functional proteins of SARS have undergone adaptive evolution is not known.     

地厉螨属一新种(蜱螨亚纲,厉螨科)

记述地厉螨属Dipolaelaps Zemskaya et Piontkovskaya,1960一新种:同心地厉螨Dipolaelaps tongxinensis Baiet Lu,sp.nov.,标本采自宁夏回族自治区同心县阿拉善黄鼠Citellus alaschanicus Buchner,1888巢穴内.模式标本均保存于军事医学科学院微生物流行病研究所医学昆虫标本馆和宁夏回族自治区疾病预防控制中心.     

猪胸膜肺炎放线杆菌血清1型RTX毒素I的N-端表达多肽具有良好的免疫原性

ApxI外毒素是猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)最重要的毒力因子,为了研究其N端多肽的免疫原性,分别将apxIA基因的全长编码区(apxIA,3146bp)及其5′端1140bp的片段(apxIA5)克隆到原核表达载体pET28a,经IPTG诱导后在大肠杆菌中实现了表达,表达产物ApxIA和ApxIAN均以包涵体的形式存在,Westernblot检测证实两种表达产物均具有免疫反应性。将纯化的重组蛋白(rApxIA和rApxIAN)和提取的天然毒素ApxI(nApxI)分别经腹腔免疫BALBc小鼠,于免疫前、免疫2周和4周后分别检测了ELISA抗体和毒素中和抗体水平,结果表明,rApxIAN免疫组的ELISA抗体显著低于rApxIA免疫组和nApxI免疫组,但rApxIAN免疫组血清中和试验中测定的溶血素单位与rApxIA及天然nApxI免疫组没有显著差异。第二次免疫2周后,用1个LD50的APP血清1型J101株和2型标准菌株攻击试验动物,rApxIAN免疫组对血清1型和2型菌株的保护率分别为80%和100%。     

肺腺癌靶向性超氧化物歧化酶的构建及功能分析

临床上,超氧化物歧化酶(SOD)的低肿瘤细胞定位能力限制了其在抗肿瘤领域的广泛应用,这一直是国内外学者们试图解决的难点.研究中,以基因工程方法连接念珠藻Fe-SOD(iron-superoxidedismutase)基因和抗SPC-A-1肺腺癌LC-1ScFv(singlechainFv)基因,并融合表达获得了SOD-ScFv融合蛋白.纯化后SOD-ScFv表现出SOD和ScFv的双重活性.SPC-A-1肺腺癌细胞中,融合蛋白的异硫氰酸荧光素(FITC)染色追踪和自由基含量分析表明,SOD-ScFv具备识别SPC-A-1肺腺癌细胞、透膜并清除胞内自由基的功能,最终达到抑制肿瘤细胞生长的目的.研究提出的靶向抗肿瘤机制将克服临床上SOD无目标趋向性和难于进入实体瘤的两大应用局限性,并提供了一种利用LC-1ScFv来靶向投递抗肿瘤药物的思路.     

Adiponectin 基因剔除LacZ基因敲入小鼠模型的建立

adiponectin是脂肪细胞特异分泌的一种活性蛋白质,具有增加胰岛素敏感性、抗炎及抗动脉硬化等活性.建立adiponectin基因剔除β-半乳糖苷酶基因(LacZ)敲入小鼠模型,可为整体动物水平研究adiponectin基因功能及其表达调控机制等提供理想工具.根据生物信息学方法获得adiponectin基因组序列,设计基因剔除及敲入策略,在adiponectin基因第2和第3号外显子剔除的同时,在其ATG和信号肽序列后顺接LacZ基因完整编码序列,构建完成了Adipo-LacZ-XpPNT基因剔除质粒.通过电穿孔将打靶质粒转入ES细胞,以G418和ganciclovir进行药物筛选,获得药物抗性的ES细胞克隆,PCR和DNA印迹鉴定出正确同源重组克隆.将同源重组的ES细胞克隆注入小鼠囊胚得到嵌合体小鼠,嵌合体小鼠与C57BL/6J小鼠交配产生杂合子小鼠,杂合子间交配获得adiponectin基因剔除LacZ基因敲入纯合子小鼠.经RT-PCR、RNA印迹和ELISA检测证实纯合子小鼠脂肪和血清中adiponectin基因表达呈阴性.RT-PCR、RNA印迹及蛋白质印迹检测发现,LacZ基因在突变小鼠脂肪组织中有特异性表达,其表达谱与内源性adiponectin基因的表达谱一致.但在脂肪组织及外周血中未能检测到LacZ活性,且血清中LacZ蛋白亦呈阴性.由此成功建立了adiponectin基因完全灭活及LacZ基因以内源性adiponectin基因表达谱表达的小鼠模型,为进一步研究该基因功能及其表达调控创造了有利条件.     

中国西南地区水龙骨属植物(水龙骨科)孢子形态研究

利用光学显微镜和扫描电子显微镜对水龙骨属(PolypodiodesCh ing)植物11种(包括1变种)的孢子进行了观察和比较研究。其中,大部分种为首次报道。水龙骨属植物的孢子单裂缝,两侧对称,极面观椭圆形,赤道面观豆形或超半圆形,表面具疣状纹饰,多不具周壁。对光茎水龙骨(P.wattii)和日本水龙骨(P.niponica)、栗柄水龙骨(P.m icrorhizoma)与篦齿蕨(M etapolypodium manm eiense)亲缘关系进行了讨论,为该属植物的系统分类提供了孢粉学方面的证据。根据水龙骨属植物孢粉形态上的证据,水龙骨属植物是一个自然的分类群,赞成秦仁昌1978分类系统的分类处理。     

Gestation temperature affects sexual phenotype, morphology, locomotor performance, and growth of neonatal brown forest skinks, Sphenomorphus indicus

We maintained pregnant Sphenomorphus indicus under four thermal conditions for the whole gestation period to assess the effects of gestation temperature on offspring phenotypes. Parturition occurred between late June and early August, with females at high body temperatures giving birth earlier than those maintained at low body temperatures. Litter size, litter mass, and postpartum body mass did not differ among treatments, and females with relatively higher fecundity produced smaller offspring. Females gave birth to predominantly female offspring (85.7% of the 14 sexed offspring were females) at 24 °C and to predominantly male offspring (76.5% of the 17 sexed offspring were males) at 28 °C. Females with the opportunity to regulate body temperature produced a mix of sexes that did not differ from equality. Offspring produced in different treatments differed in head size, hind-limb length, and tympanum length, but not in snout-vent length, tail length, body mass, fore-limb length, and eye length. Offspring produced at 28 °C were not only smaller in head size, but also shorter in hind-limb length and tympanum length than those offspring produced at lower temperatures. Offspring produced at 28 °C performed more poorly in the racetrack and grew more slowly than offspring produced in the other three treatments. Taken together, our results show that S. indicus might be a temperature-dependent sex determination species and that offspring phenotypes are impaired at high gestation temperatures but maximized at relatively low gestation temperatures.  © 2006 The Linnean Society of London, Biological Journal of the Linnean Society , 2006, 88 , 453–463.     

药用植物次生代谢的生物学作用及生态环境因子的影响

药用植物的很多有效成分为植物的次生代谢产物,包括生物碱、萜类、酚类、甙类等。这些次生代谢产物在植物的生理调节、自身保护、生存竞争、协调与环境关系等生命活动的许多方面均起着重要作用。各种生态环境因素包括光、温度、土壤、空气以及生物因素均影响到药用植物的次生代谢过程。对药用植物次生代谢成分与生态环境因素的关系进行研究有利于揭示药用植物药用有效成分地域性差异的原因,可为药用植物的育种、栽培提供理论依据。     

栽培藏药材麻花艽中四种苦苷类成分含量的季节性变化

采用高效液相色谱法,测定了栽培藏药材麻花艽根中龙胆苦苷、落干酸、獐牙菜苦苷和獐牙菜苷四种苦苷类成分的含量及其在不同生长期的动态变化。结果表明,四种苦苷类成分随植物的发育节律而波动。龙胆苦苷的含量是评价药材质量的重要指标。龙胆苦苷的含量虽然在7月有个积累的高峰期,但7月为花期,从资源可持续利用的角度考虑,不宜定为采收期,到9月含量又有所增加,故而确定栽培藏药麻花艽根的适宜采收期应在9~10月之间。     

人工红树林中黑口滨螺和黑线蜒螺分布的差异性

研究了福建九龙江河口不同林龄、不同红树种类的人工林中黑口滨螺（Littoraia elanostoma）和黑线蜒螺（Nerita lineata）的分布情况.结果表明,黑线蜒螺主要分布于秋茄林内,且其生物量随林龄增加而增加;桐花树林内黑口滨螺的生物量和密度均大于林龄相近的秋茄林,但个体大小则小于秋茄林.黑口滨螺的生物量在桐花树林内随林龄增加呈现先增加后减少的趋势,而在秋茄林内则随林龄增加而减少.这种差异性反映了人工红树林植物种类及其演替过程对腹足类动物分布的影响.