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81.
通过体细胞核移植技术制作了人胰岛素原转基因牛。在CMV启动子指导下以内部核糖体进入位点序列(IRES)连接的新霉素抗性基因和绿色荧光蛋白基因组成了双重标记基因的筛选系统,用于转基因细胞的富集以及细胞和植入前胚胎的筛选。转基因通过电穿孔的方法(900V/cm,5ms)转入体外培养的牛胎儿成纤维细胞,基因转染细胞在添加G418 (800μg/mL)的培养基中培养10天以富集转基因细胞。选择表达绿色荧光蛋白的转基因细胞作为核供体进行体细胞核移植,重构胚经体外培养至囊胚阶段,选择表达绿色荧光蛋白的囊胚进行胚胎移植。为比较基因转染以及供体细胞所处周期对转基因细胞核移植胚胎发育的影响,用作核移植供体的转基因细胞或非转基因细胞先饥饿培养2—4天(0.5 ?S) ,然后恢复培养(10?S) 10 h使细胞同步化于G1期,以正常培养的细胞作为对照进行核移植。结果表明,转基因细胞作为核供体得到的核移植胚胎的体外囊胚发育率低于以非转基因细胞为核供体的对照组(23.2% VS 35.2 %,P<0.05) ;转基因细胞周期同步化处理与否对其克隆胚囊胚发育率无显著影响(23.2% VS 18.9 %,P>0.05)。胚胎移植后2个月直肠检查发现7头受体牛(每头移植2—4枚胚胎)中有一头妊娠,并最终发育足月产下一头小牛。聚合酶链反应(PCR)检测和DNA测序分析表明其为转人胰岛素原基因的转基因克隆牛。 相似文献
82.
通过基因芯片技术观察汉坦病毒感染细胞后整合素受体信号转导相关基因的差异表达,以探讨汉坦病毒进入细胞的分子机制。用汉滩病毒76—118株感染原代人胚肺成纤维细胞,同时设立正常对照细胞,于感染后第6h、24h和96h同时抽提感染组与正常对照组细胞总RNA,利用荧光标记dUTP逆转录制备cDNA探针,与人类受体及信号转导类表达谱芯片杂交,并对Cy3、Cy5荧光信号做扫描分析。结果显示有37项基因出现差异表达,其中31项基因在感染后6h出现差异表达,13项下调、18项上调;但在感染后24h和96h分别只有5项和4项基因出现表达差异;而且整合素信号转导通路中的重要基因如一些蛋白激酶相关基因在感染6h表达增强,丝化增强子1在感染6h和96h表达下调,微管相关蛋白1A在感染6h表达上调、感染24h和96h表达下调。这些进一步说明汉坦病毒感染细胞与整合素有关。 相似文献
83.
磷对海水胁迫下芦荟幼苗离子分布的影响 总被引:6,自引:0,他引:6
研究了磷对海水胁迫下库拉索芦荟(A loe vera)幼苗干物质积累、植株含水量、在器官和组织水平上离子分布的影响。增磷显著缓解海水胁迫对芦荟生长的抑制,明显提高海水胁迫下芦荟幼苗的干物质积累和含水量。器官离子含量和X射线微区分析结果都表明,30%浓度海水胁迫下,外源磷水平的提高能显著降低芦荟幼苗根系N a 、C l-的吸收,增强K 、C a2 向地上部的运输和分配,从而维持叶片较高的K /N a 、C a2 /N a 比率,而这很可能是增磷提高芦荟对海水胁迫抗性的主要原因之一。 相似文献
84.
85.
86.
87.
目的:探讨食管穿孔的诊断、临床特征与外科治疗方法.方法:回顾分析1999年-2009年我院收治的食管穿孔22例.结果:本组病例4例保守治疗,2例行颈部脓肿切开引流,8例行单纯食管穿孔修补术,3例行纵隔及胸腔脓肿清除术并引流,1例行食管下段切除、胃代食管弓上吻合术,2例行食管修补并肺叶切除,2例行空肠双管造瘘加纵隔胸腔引流,2例因经济原因放弃治疗出院.治愈19例,治愈率86.3%,死亡1例,死亡率4.5%.结论:早期诊断和及时采取正确的处理措施是提高本病治愈率,降低死亡率的关键. 相似文献
88.
用苯肼与丙烯醛和乙酰氨基丙二酸二乙酯的加成产物进行缩合反应 ,生成苯腙化合物 ,然后在酸性条件下环化 ,再在碱性条件下脱羧 ,最后对其水解就可得到DL -色氨酸 ,总收率为 4 3.9%。 相似文献
89.
石香薷挥发油抑菌和免疫应答作用 总被引:3,自引:0,他引:3
对石香薷挥发油(简称香薷油)的抑菌和对机体免疫功能影响进行了初步的研究。结果表明:香薷油具有广谱的抑菌作用,能增强机体特异性和非特异性免疫应答,提高机体的防御机制。 相似文献
90.