不依赖天然外显子的蛋白质内含子定向进化筛选系统

蛋白质剪接技术为在蛋白质水平上直接对蛋白质进行修饰和加工提供了一种全新的解决方案,因而在蛋白质工程及相关领域具有非常广阔的应用前景。现阶段,大部分天然的蛋白质内含子在异源蛋白质中剪接活性非常低,极大限制了蛋白质内含子的开发和应用。为了开发一个可以同时对蛋白质内含子通用性和剪接活性进行筛选的系统,利用Bsa I限制性内切酶识别位点和切割不重合的特性,将Ter ThyX内含子(不含外显子序列)插入到卡那霉素抗性蛋白基因的多个位点。并且摒弃了以往需要结合天然外显子以实现剪接的方法,可以同时对蛋白质内含子的剪接活性和通用性进行筛选。Western blot结果和卡那霉素平板生长结果表明,通过卡那霉素筛选系统可以精确的将蛋白质内含子剪接反应与卡那霉素抗性结合起来,仅从卡那霉素平板上的菌落生长情况即可完成蛋白质内含子剪接活性阳性突变的筛选,是一个快速,稳定的定向进化筛选系统。     

腹腔镜胆囊切除术治疗高龄患者急性胆囊炎的临床观察

目的：探讨腹腔镜胆囊切除术治疗高龄患者急性胆囊炎的应用价值。方法：回顾性分析2005年1月．2011年12月我院收治的210例65岁以上因急性胆囊炎实施胆囊切除术的老年患者的临床资料,按手术方式分为腹腔镜组（LC组）和剖腹胆囊切除术组（OC组）,分析和比较两组患者的手术时间、术后肠功能恢复时间及住院时间,术中出血、腹腔引流量和术后并发症的发生情况。结果：与OC组比较,LC组的手术时间、术后肠功能恢复时间及住院时间均显著缩短,差异有统计学意义（P〈0．01）;但两组之间术中出血、腹腔引流量和术后并发症的发生率差异均无统计学意义（P〉0．05）。LC组中转开腹10例,占7_35％;其中粘连严重导致胆囊三角解剖不清6例,无法控制的出血2例,结石嵌顿胆囊管2例。结论：老年急性胆囊炎患者在条件合适的情况下行腹腔镜胆囊切除术治疗有助于患者更快地恢复．具有较强的临床应用价值。     

柑橘木虱蜜露排泄机制:进展与展望

半翅目昆虫柑橘木虱Diaphorina citri是柑橘类果树重要害虫,主要以高渗透压的植物韧皮部汁液为食,是柑橘毁灭性病害——柑橘黄龙病(HLB)的主要传播媒介。柑橘木虱取食韧皮部汁液时自身进化出一套完整的渗透调节机制调节其体内渗透压,将体内过量摄入的糖类转化成长链寡糖并以蜜露形式排出体外。本文从柑橘木虱蜜露排泄行为、蜜露组成成分以及影响蜜露排泄的多个因素进行了论述,同时综述了可能参与柑橘木虱蜜露排泄行为的渗透调节基因。研究表明,柑橘木虱雌雄成虫及若虫在蜜露排泄行为上存在显著差异,且排泄的蜜露在颜色、纹路及组成成分方面均有不同;寄主植物、杀虫剂、病原微生物及天敌化合物均会影响柑橘木虱蜜露排泄行为。分子机制探究发现,α-葡萄糖苷水解酶、水通道蛋白及糖基转移酶基因等关键渗透调节基因可能参与调控柑橘木虱蜜露排泄行为。本文可为未来有关柑橘木虱蜜露排泄行为方面的研究以及为研制柑橘木虱防治新型药剂开发新靶标提供参考。     

水稻Rop基因OsRac5表达特性

Rop在植物生长、发育、免疫及环境信号应答等多种生物学过程中具有重要作用。已有研究显示水稻Rop基因OsRac5可能与育性控制有关,但是该基因的表达特性,以及非生物胁迫和植物生长物质对其表达的影响尚不清楚。本文采用qRT-PCR技术检测了OsRac5在水稻生长发育过程中、非生物胁迫以及植物生长物质处理条件下的表达特性,结果显示OsRac5在水稻生长发育过程中在多种组织广泛表达,尤其在根和雌雄蕊形成期的幼穗中高表达;干旱、高盐和低温等非生物胁迫均能诱导OsRac5表达;ABA、GAs、6-BA等植物生长物质能上调OsRac5基因表达,提示该基因与水稻幼穗发育、抗逆性及细胞生长等过程相关。     

Optimal stomatal conductance in relation to photosynthesis in climatically contrasting Eucalyptus species under drought

Models of stomatal conductance (g_s) are based on coupling between g_s and CO₂ assimilation (A_net), and it is often assumed that the slope of this relationship (‘g₁’) is constant across species. However, if different plant species have adapted to different access costs of water, then there will be differences in g₁ among species. We hypothesized that g₁ should vary among species adapted to different climates, and tested the theory and its linkage to plant hydraulics using four Eucalyptus species from different climatic origins in a common garden. Optimal stomatal theory predicts that species from sub‐humid zones have a lower marginal water cost of C gain, hence lower g₁ than humid‐zone species. In agreement with the theory that g₁ is related to tissue carbon costs for water supply, we found a relationship between wood density and g₁ across Eucalyptus species of contrasting climatic origins. There were significant reductions in the parameter g₁ during drought in humid but not sub‐humid species, with the latter group maintaining g₁ in drought. There are strong differences in stomatal behaviour among related tree species in agreement with optimal stomatal theory, and these differences are consistent with the economics involved in water uptake and transport for carbon gain.     

蒙药材莲座蓟化学成分的研究

从莲座蓟(Cirsium Esculentum C.A.Mey)植物的根及根茎中分离得到6个化合物,经波谱数据分析分别鉴定为β-谷甾醇(1)、5,7-二羟基-6,4’-二甲氧基黄酮(2)、刺槐素(3)、β-胡萝卜苷(4)、蒙花苷(5)、绿原酸(6)。上述化合物均为首次从该植物中分离得到。     

伤口分泌物的病原菌分布及耐药性分析

目的调查福建省龙岩市第二医院伤口分泌物病原菌的分布及耐药情况,为合理应用抗生素提供依据。方法收集2012年1月至2013年5月患者伤口分泌物标本,采用常规方法进行分离培养,用VITEK-2 Compact全自动微生物分析仪系统进行鉴定及药敏分析。结果送检503份标本,培养阳性272份,阳性率为54. 1% ;病原菌检出343株,其中革兰阴性菌189株占55. 1%,革兰阳性菌151株占44.0%,真菌3株占0.9% ;前5位的病原菌分别为金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）的检出率分别是30.4%、82. 1%。粪肠球菌中耐高浓度氨基糖苷类肠球菌（HLAR）的检出率为55%。革兰阳性菌对万古霉素、替加环素、利奈唑胺未出现耐药菌株。铜绿假单胞菌、肠杆菌科细菌对亚胺培南的耐药率分别为5. 6%、0。大肠埃希菌中超广谱P-内酰胺酶（ESBL）的检出率是42.9%。鲍曼不动杆菌对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率最低为25.0%,对其他抗菌药物耐药严重,多数抗菌药物的耐药率均〉45%。结论伤口感染的主要病原菌是革兰阴性菌,多重耐药菌株比例较高,临床应根据药敏结果合理选用抗生素,减少新的耐药菌株出现。