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101.
An De Bondt Kristel Eggermont Iris Penninckx Inge Goderis Willem F. Broekaert 《Plant cell reports》1996,15(7):549-554
We have previously developed a protocol for efficient gene transfer and regeneration of transgenic calli following cocultivation of apple (cv. Jonagold) explants with Agrobacterium tumefaciens (De Bondt et al. 1994, Plant Cell Reports 13: 587–593). Now we report on the optimization of postcultivation conditions for efficient and reproducible regeneration of transgenic shoots from the apple cultivar Jonagold. Factors which were found to be essential for efficient shoot regeneration were the use of gelrite as a gelling agent and the use of the cytokinin-mimicing thidiazuron in the selective postcultivation medium. Improved transformation efficiencies were obtained by combining the hormones thidiazuron and zeatin and by using leaf explants from in vitro grown shoots not older than 4 weeks after multiplication. Attempts to use phosphinothricin acetyl transferase as a selectable marker were not successful. Using selection on kanamycin under optimal postcultivation conditions, about 2% of the leaf explants developed transgenic shoots or shoot clusters. The presence and expression of the transferred genes was verified by -glucuronidase assays and Southern analysis. The transformation procedure has also been succesfully applied to several other apple cultivars.Abbreviations BAP
benzylaminopurine
- CTAB
hexadecyltrimethylammoniumbromide
- Na2EDTA
ethylenediamine-tetra-acetate ferric-sodium salt
- FeNaEDTA
ethylenediamine-tetra-acetate ferric-sodium salt
- GA3
gibberellic acid 3
- GusA
-glucuronidase
-
gusA
-glucuronidase gene of Escherichia coli
- IAA
indole acetic acid
- IBA
indole butyric acid
- 2iP
N6-2-isopentenyl adenine
- NAA
naphthalene acetic acid
-
nptII
neomycinphosphotransferase II gene
-
bar
phosphinothricin acetyl transferase gene
- PCR
polymerase chain reaction
- PPT
phosphinothricin
- STS
silver thiosulphate
- T-DNA
transferred DNA
- TDZ
thidiazuron
- X-Gluc
5-bromo-4-chloro-3-indolyl -D-glucuronide
- Zea
trans-Zeatin 相似文献
102.
芸苔属青菜(Brassica chinensis)与紫菜苔(B. cam pestrisvar. purpurea)的花粉经低温水合、热激、渗激三步程序,分离出大量具萌发能力的脱外壁花粉,脱外壁率可高达60% 以上。在含有碳源与氮源及Roberts培养基盐成分的碱性PEG 培养基中,首次使芸苔属脱外壁花粉萌发,萌发率可达33% ~41% 。在扫描电镜下观察了花粉脱外壁与萌发的过程。讨论了不同植物花粉脱外壁的方法与花粉壁生物学特点的对应关系,以及外壁对花粉萌发的可能作用 相似文献
103.
细胞外Ca^2+内流入胞质的机制 总被引:11,自引:0,他引:11
细胞外Ca^2+主要是通过塌压依赖性Ca^2+通道和钙池耗竭依赖性Ca^2+通道而内流的。前者主要见于电兴奋细胞,这一过程比较清楚;后者主要见非兴奋细胞,情况远较复杂:外来信号激活内贮钙池,钙池在释放Ca^2+同时通过目前尚不清楚的途径将直接或间接传至质膜Ca^2+通道,而诱发Ca^2+内流。 相似文献
104.
小麦与玉米及鸭茅状摩擦禾远缘杂交的胚发育过程中同工酶和蛋白质的变化 总被引:2,自引:0,他引:2
通过比较小麦与玉米及鸭茅状摩擦禾属间杂交获得的胚与小麦正常自交的胚之间在不同发育时期过氧化物酶和酯酶的同工酶谱,发现过氧化物酶同工酶表现出时空顺序的特异性变化。在同一发育时期,远缘杂交的具胚子房和无胚子房之间存在过氧化物酶同工酶谱的差异,这可能涉及到与胚发育相关的同工酶的出现。远缘杂交的具胚子房和正常自交的小麦子房之间也有一定的酶谱差异。同时,同一材料还表现出不同发育时期的过氧化物酶酶谱差别。在远缘杂交后的胚发育期间,酯酶同工酶的时空表达不如过氧化物酶显著。此外,对远缘杂交后的胚中的水溶性蛋白质进行了SD S-PAGE分析,初步的分析结果表明,可能存在与胚发育相关的蛋白质。 相似文献
105.
106.
PreparationofMeioticKarytypeofMouseOocyteLiChaojunYanLeipingZhangXiranChenYifeng(BiologyDepartmentofNanjingNormalUniversity,Nanjing210097)哺乳动物的卵母细胞的减数分裂过程中存在两次自发的停滞现象,第一次是在第一次减数分裂前期的双线期,这一静止期持续很长时间,一直到动物性成熟后卵母细胞进入发有周刎,在保住腺激素的作用下,卵母细胞的第一次减数分裂才重新启动.完成第一次减数分裂后.又停滞在第二次减数分裂的中期,在椅子或化学因素刺激的作用下,完成第二次减数分裂[4].因此,对哺乳动物的卵母细胞在一… 相似文献
107.
48例原发性闭经患者的细胞遗传学分析 总被引:9,自引:1,他引:8
郑克勤 李永全 潘超仁 周汝滨 廖霞 陈小萍ZHENG Ke-Qin LI Yong-Quan PAN Chao-Ren ZHOU Ru-Bin LIAO Xia CHEN Xiao-Ping 《遗传》1996,18(1):33-35
本文报告对48例原发闭经患者的临床和细胞遣传学分析,共发现染色体异常17例,占35.4%,其中包括45,X,7例;45,X/46,XX,2例;X染色体结构异常5例;核型中有Y染色体3例。讨论了原发闭经的细胞遗传学病因及异常核型与表型的关系。 相似文献
108.
标本采自广西宜山、天等和贵州独山、紫云等地的早二叠世地层中。Zellia富集于层面,大多和Pseudoschwagerina,Sphaeroschwagerina,Robustoschwagerina共生,在确定石炭二叠系界线时具有一定的地层意义。现对Zelia的属征加以阐述、讨论和归并,并对其地理地层分布作一简介 相似文献
109.
应用透射电镜技术,研究中华双腔吸虫的精子发生,并与其它复殖吸虫进行比较,提出了复殖吸虫精子发生的一般过程,结果显示它与大多数复殖吸虫精子发生的超微结构相似,原始的精原细胞经过次有丝分裂,两次减数分裂成为精细胞,它经过分化,形态变化后成为成熟精子,精子形成共分为六个阶段。其中形成共分为六个阶段,其中有以下首次报道的特征,(1)中央胞持区的生长速度在开始时比鞭毛裂快;(2)在鞭毛与中央胞质区融合前,线 相似文献
110.
将菠菜叶片匀浆后.用差速离心和梯度率心分离叶绿体、过氧物酶体、微粒体等细胞器和100000×g上清法部分。用酶活测定法测定各部分甜菜碱醛脱氢酶(BADH)的活性;用免疫扩散法鉴定各组分的BADH。除叶绿体外,过氧物酶体、微粒体.以及100000×g上清液中也存在BADH。 相似文献