Comparative Study of Cultured Burkitt Tumor Cells by Immunofluorescence, Autoradiography, and Electron Microscopy

Cultured Burkitt cells were examined by immunofluorescence, autoradiography, and electron microscopy in an effort to identify the stainable cells with those harboring herpes-type virus particles. Immediately after a 2-hr pulse of (3)H-thymidine, from 30 to 60% of the cells revealed heavy nuclear labeling. In most cases the grains were evenly dispersed, but in about 3 to 5% the grains showed a focal distribution and occasionally they extended into the cytoplasm. Such nuclear foci were rarely seen at 8 hr after the pulse. When the analysis was restricted to preselected immunofluorescent cells, up to 80% showed label at 8 hr and cytoplasmic grains were prominent. To reduce cellular deoxyribonucleic acid (DNA) synthesis, cells were X-irradiated with 3,000 to 6,000 R, and the isotope pulse was applied 1, 4, or 7 days later. Whereas the total number of labeled cells decreased in roughly twofold steps at the respective intervals (from 40 to 10%), the incorporation of (3)H-thymidine into fluorescent cells was not affected by X irradiation. In each series, about 70% of the fluorescent cells contained label when they were examined at 24 and 48 hr after the pulse, whereas at 8 and 72 hr fewer were positive. At the earlier intervals, unlabeled fluorescent cells most likely represented cells which had completed viral DNA synthesis prior to the pulse; at the later intervals, unlabeled fluorescent cells were probably cells which commenced viral replication after the pulse. These data support the conclusion that the immunofluorescent cells are the ones which harbor virus, and also confirm the expectation that the virus is a DNA virus from a member of the herpes group. This conclusion was firmly established by sectioning and electron microscopic examination of individual fluorescent cells, all of which contained numerous virus particles, whereas the nonstained cells prepared in a similar manner were free of them.     

Histochemische Aspekte bei der Azanfärbung des Knochens

Zusammenfassung In der vorliegenden Arbeit wird untersucht, in welcher Weise chemische Gruppierungen der Grund- und Kittsubstanz die Azanfärbung des lamellären Knochens beeinflussen.Es wurde dabei gezeigt, daß für die Aufnahme von Azokarmin Amino- und Iminogruppen große Bedeutung besitzen. Ihre Zerstörung führt zum Verlust der Azokarminfärbung bei 18° C undph 5,82. Mit heißen Lösungen dieses Farbstoffes vonph 2,58 hingegen (Azokarminbad bei der Azanfärbung) ist noch eine Anfärbung des Knochens herbeizuführen. Sie gelingt auch mit der erstgenannten Lösung nach Einwirkung verdünnter Säuren bei 60° C. Die Aufnahme von Azokarmin bei der Azanmethode wird daher auf eine Veränderung derKittsubstanz des Knochens durch das heiße Färbebad bezogen.Anilinblau wird ebenfalls von den Aminogruppen des Gewebes gebunden, es kann jedoch auch durch seine basischen Phenylaminogruppen eine Bindung mit sauren Gruppen des Substrats eingehen. Die Anwendung von Phosphorwolframsäure macht dem Anilinblau außerdem vermehrt basische Gruppen zugänglich. Eine vorhergehende Azokarminfärbung erlaubt daher oft noch eine Aufnahme von Anilinblau durch den Knochen. Am kollagenen Bindegewebe findet wegen der geringen Anzahl der Aminogruppen keine Hemmung durch Azokarmin statt.Mit 1 Textabbildung     

Kurze Mitteilungen

Ohne Zusammenfassung     

Beitrag zur Histochemie der Laktatdehydrogenase

Zusammenfassung Nach Verminderung der Diffusion des Enzyms in das Inkubations-medium durch Inkubation in einem Polyvinylalkohol-Gel und nach Substitution der NADH₂: Tetrazoliumsalzoxidoreduktase durch PMS erhält man mit der konventionellen Methode zum Nachweis der LDH an der Rattenniere ein neuartiges Verteilungsmuster der Gesamt-aktivität, das im Gegensatz zu dem bekannten histochemischen Bild eine gute Übereinstimmung mit quantitativen biochemischen Befunden nach Mikrodissektion von Nierenschnitten zeigt. Unter Einhaltung der obengenannten Bedingungen gelingt an der Rattenniere ebenso wie an der Skeletmuskulatur eine selektive Darstellung des H-Typs der LDH-Isoenzyme, wenn dem Inkubationsmedium Harnstoff zugesetzt wird.

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Summary A completely novel distribution pattern of the total activity of LDH in the rat kidney was obtained by using polyvinyl alcohol gels as incubation medium (thus preventing the enzyme from diffusing into the incubation medium), substituting NADH₂: tetrazolium-oxidoreductase by PMS and using conventional methods for the determination of LDH. In contrast to the usual histochemical findings this method corresponds very well to quantitative biochemical findings after micro-dissection of the renal sections. If the above mentioned conditions are oberserved and urea is added to the incubation medium a selective demonstration of the H-type of LDH-isoenzymes is possible in the rat kidney and skeletal musculature.

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Fräulein B. Rindfleisch danke ich für ihre zuverlässige technische Assistenz und für wertvolle Hinweise.     

Kurze Mitteilungen

Zusammenfassung Ein Paar Türkentauben brütete vom 29. 1. bis 15. 2. 1966 auf einem Straßenbaum in Berlin-Tempelhof. Es wurde nur ein Ei gelegt. Nach 17 Tagen schlüpfte das gelbbedaunte Junge. Es ist dann kurz danach, wahrscheinlich beim Umherkriechen auf dem Nestrand, erfroren. Die Umstände, unter denen die Brut erfolgte, waren äußerst ungünstig. Die Temperatur lag seit dem 7. 2. 1966 dauernd unter Null (–9 und –13 Grad). Die brütende Taube hatte von Anfang an auf dem Nestrand brüten müssen, da die Mulde schon vor der Eiablage völlig mit Schnee bedeckt war. Der brütende Vogel war mehrere Tage und Nächte von einem hohen Schneewall umgeben, der sich auf dem Nest gebildet hatte. Dieses Nest wurde von Mai 1964 an viermal von einem Türkentaubenpaar zum Brüten benutzt. Es wird vermutet, daß zum mindesten der eine Partner, der Tauber, während der ganzen Zeit derselbe geblieben ist.     

Die Ultrastruktur der Kapillarwand in der menschlichen Placenta zur Zeit der Schwangerschaftsmitte

Zusammenfassung Die Wand der Kapillaren in der menschlichen Placenta aus der Schwangerschaftsmitte wird elektronenmikroskopisch untersucht und zu der Wand des Sinusoides der reifen Placenta in Beziehung gesetzt. Bereits zur Zeit der Schwangerschaftsmitte sind vereinzelt Sinusoide nachweisbar, doch treten sie gegenüber den Kapillaren zahlenmäßig in den Hintergrund.Die Kapillaren des Zottenbinnenraumes besitzen keine Basalmembran; sie sitzen meist, nur durch einen Spalt getrennt, einer Pericytenschicht auf. Die Pericyten haben häufig fußförmige Ausläufer, die die Basalmembran des Cytotrophoblasten erreichen. Die Kapillarendothelien sind zwar einreihig angeordnet, überlappen aber einander in ausgedehnter Weise.Im Cytoplasma der Kapillarendothelien findet man häufig eine feinfilamentäre Zeichnung, jedoch nur nach Kaliumpermanganat-Kontrastierung.Die Kapillaren der unreifen Placenta sind durch das Fehlen der Basalmembran, durch die ungewöhnliche Dicke und durch die starke Überlappung ihres Endothels für eine Gefügedilatation besonders geeignet.Mit Unterstützung durch die Deutsche Forschungsgemeinschaft.     

The atokous-epitokous border is determined before the onset of heteronereid development in Platynereis dumerilii (Annelida,Polychaeta)

Summary In most nereids sexual maturation is accompanied by a dramatic reorganization of the body that enables swarming of the formerly benthic worms. However, a border exists between unchanged anterior (atokous) and metamorphosed posterior (epitokous) segments. The site of this atokous-epitokous border (a/e border) is different in sexually mature males and females of Platynereis dumerilii. There is no correlation between the total number of setigerous segments of a specimen and the location of the a/e border. The location of the a/e border and sexual development are affected neither by cutting off caudal segments of juveniles (including the prospective a/e border) nor by transecting the ventral nerve cord. When parapodia are transplanted from prospective epitokous regions to prospective atokous regions and vice versa, they maintain their original character during metamorphosis. The results presented here suggest that prospective atokous as well as epitokous characters are determined at or only very shortly after formation of the respective segments. Thus the a/e border is established well in advance of the onset of epitokous metamorphosis.