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41.
42.
目的:构建pPIC-vMIP-II-TfN酵母表达载体,表达纯化vMIP-II-TfN融合蛋白。方法:利用PCR方法扩增编码人转铁蛋白N端半分子的基因片段,通过酶切、连接、转化等分子克隆方法构建pPIC-vMIP-II-TfN酵母表达载体;电击法转化X33酵母菌;用甲醇诱导重组酵母菌表达融合蛋白,利用硫酸铵沉淀、透析、Ni-NTA层析等技术进行蛋白纯化,SDS-PAGE和Western blot检测蛋白表达和纯化情况,利用趋化实验进行纯化蛋白活性检测。结果:经过两次PCR扩增了一个长约1.1kb的包含Xba I酶切位点的IgG3-TfN基因片段,插入pPIC-vMIP-II的Xba I酶切位点,经菌液PCR鉴定获得重组子,测序结果表明构建载体pPIC-vMIP-II-TfN的表达框正确无误,转化X33酵母菌,用甲醇诱导表达出48kDa的vMIP-II-TfN融合蛋白,经硫酸铵沉淀、透析、Ni-NTA纯化后得到纯度约为95%的vMIP-II-TfN融合蛋白。Western印迹结果表明融合蛋白能与转铁蛋白抗体特异性结合。活性检测表明经过诱导表达的vMIP-II-TfN融合蛋白具有趋化抑制活性。结论:成功构建pPIC-vMIP-II-TfN酵母表达载体,重组酵母工程菌经甲醇诱导成功表达出vMIP-II-TfN融合蛋白,纯化后的vMIP-II-TfN融合蛋白具有趋化抑制活性。 相似文献
43.
谭飞杨连娟莫小辉樊国彪王秀丽 《现代生物医学进展》2011,11(3):456-459
目的:研究解脲脲原体(Ureaplasma Urealyticum,UU)的第1血清型(UU1)、第3血清型(UU3)和第4血清型(UU4)对昆明小鼠下生殖道的致病性。方法:将100只昆明小鼠随机分为5组:空白组、雌二醇组、UU1组、UU3组和UU4组,每组20只;空白组和雌二醇组为对照组,UU1组、UU3组和UU4组为实验组;雌二醇组和实验组雌二醇化后1周,将UU1、UU3和UU4分别接种至UU1、UU3和UU4组小鼠泌尿生殖道,将液体培养基接种至空白组和雌激素组。2周后检测各组小鼠泌尿生殖道的IL-8、SIgA、TNF-α并取小鼠子宫组织行病理检查。结果:实验组小鼠UU接种都获得成功。IL-8、SIgA、TNF-α检测结果显示:实验组和对照组比较有显著性差异;UU4组和UU1组及UU3组比较有显著性差异;空白组和雌二醇组比较无显著性差异;UU1组和UU3组比较无显著性差异。病理显示:UU1、UU3和UU4组昆明小鼠子宫组织有炎细胞浸润,UU4组小鼠宫颈病变更明显。对照组小鼠子宫未见明显改变。结论:UU1、UU3和UU4可能导致昆明小鼠下生殖道产生病理反应;UU4可能短期致病力更强。 相似文献
44.
Prenatal environmental events that disturb neurodevelopment are suspected to increase the risk of psychiatric disorders. Estrogenic hormones such as diethylstilbestrol (DES) and environmental monomers like Bisphenol A (BPA) have the potential to disturb the development of the foetus and especially its brain. We reviewed the epidemiological studies investigating a possible association between prenatal DES or BPA exposure and risk of psychiatric disorders and discussed the hypothetical biological mechanisms linking this prenatal exposure with psychiatric disorders. The principal methodological issues that could represent confounding factors and may explain conflicting results are discussed. Interestingly, prenatal exposure to DES and BPA has been linked to epigenetic alterations associated with urogenital lesions observed in the exposed offspring, supporting the hypothesis that this environmental factor can indeed alter epigenetic regulations. Following the same line of thinking, these endocrine disruptors may modify the epigenetic mechanisms involved in neurodevelopment and, in turn, increase the occurrence of psychiatric disorders. 相似文献
45.
药(毒)物对尸食性蝇类生长发育影响的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
药(毒)物对尸食性蝇类生长发育影响是法医昆虫毒理学领域里一个十分重要的研究方向,其研究结果可对与药(毒)物相关死亡案件的死亡时间作出修正。随着近年来全球毒品及药物滥用情况的日趋严重,其所导致的死亡案件也越来越多。这类案件常常需要应用尸食性蝇类生长发育历期来推算死后经历时间(postmortem interval, PMI)。为了阐明该领域的研究进展以及未来研究的焦点和难点,本文在阐述法医昆虫毒理学概念和特点的基础上,按照不同的药(毒)物分类,对近年来药(毒)物对尸食性蝇类生长发育影响在国内外的研究进展进行了综述。研究表明,某些药(毒)物对尸食性蝇类生长发育具有一定的影响,且这种影响存在种属差异。目前,该领域的研究尚限于宏观现象观察阶段,其研究范围在不断拓宽,既有的研究也在进一步深化,但还有许多问题有待进一步探讨。 相似文献
46.
相思子属三种药材中的氨基酸分析比较 总被引:1,自引:1,他引:0
利用全自动氨基酸分析仪和高效液相色谱仪分析比较相思子属三种药材中氨基酸成分及含量。结果9个样品都检测出17种氨基酸和2种色氨酸衍生物。结论:不同样品中的氨基酸含量有所差异,但其中门冬氨酸、谷氨酸、亮氨酸和赖氨酸的含量相对较高。 相似文献
47.
Activation of TLR-9 induces IL-8 secretion through peroxynitrite signaling in human neutrophils 总被引:3,自引:0,他引:3
József L Khreiss T El Kebir D Filep JG 《Journal of immunology (Baltimore, Md. : 1950)》2006,176(2):1195-1202
Bacterial DNA containing unmethylated CpG motifs is emerging as an important regulator of functions of human neutrophil granulocytes (polymorphonuclear leukocytes (PMN)). These motifs are recognized by TLR-9. Recent studies indicate that peroxynitrite (ONOO-) may function as an intracellular signal for the production of IL-8, one of the key regulators of leukocyte trafficking in inflammation. In this study we investigated whether bacterial DNA (CpG-DNA) could induce ONOO- signaling in human PMN. Human whole blood, isolated PMN (purity, >95%), and high purity (>99%) PMN respond to CpG-DNA, but not to calf thymus DNA, with secretion of IL-8 and, to a lesser extent, IL-6 and TNF. Methylation of cytosines in CpG-DNA resulted in a complete loss of activity. The endosomal acidification inhibitors, bafilomycin A and chloroquine, inhibited CpG-DNA-induced cytokine release from PMN. CpG-DNA-induced IL-8 mRNA expression and release was also blocked by the NO synthase inhibitor Nomega-nitro-L-arginine methyl ester. CpG-DNA evoked concomitant increases in intracellular superoxide and NO levels, leading to enhanced ONOO- formation and, consequently, nuclear accumulation of c-Fos and NF-kappaB. Pharmacological inhibition of NF-kappaB activation attenuated approximately 75% of CpG-DNA-evoked IL-8 release. These results identify ONOO- -dependent activation of NF-kappaB and c-Fos as an important mechanism that mediates PMN responses, including IL-8 gene expression and release, to bacterial DNA and unmethylated CpG motifs in particular. Enhanced ONOO- formation represents a mechanism by which bacterial DNA may contribute to prolongation and amplification of the inflammatory response. 相似文献
48.
目的研究腹内压升高及持续时间对肝脏功能的影响。方法选择SD大鼠45只,随机分为正常对照组,10mmHg腹内压(IAP)模型组,20mmHg腹内压(IAP)模型组,每组15只。各IAP组大鼠以头皮针于腹腔穿刺,通过三通管连接压力计及氮气袋,运用氮气气腹法制作SD大鼠腹内高压动物模型,对照组不充气。各组动物按腹内压持续时间分别于1、2、4h处死,使用全自动生化分析仪检测每个动物的天门冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)。结果 10mmHg和20mmHg IAP持续4h组的血清AST、ALT含量均明显高于持续1h和2h组(P<0.01,P<0.05);20mmHg IAP 2h组血清AST、ALT含量亦明显高于1h组(P<0.05);但10mmHg IAP持续2h组血清AST、ALT含量与1h相比,差异无统计学意义(P>0.05)。IAP维持1h的3组(10mmHg组,20mmHg组,对照组)大鼠的血清AST、ALT含量差异无统计学意义(P>0.05);IAP持续2h,20mmHg IAP组的AST、ALT含量明显高于10mmHg IAP组和对照组;IAP维持4h,20mmHg IAP组血清AST、ALT含量均显著高于对照组(P<0.01),较10mmHg IAP组血清AST含量增高(P<0.05),而ALT间比较无统计学意义(P>0.05);10mmHg IAP组持续4h组血清AST、ALT含量高于对照组4h组(P<0.01,P<0.05)。结论腹内高压可致肝损伤,并与腹腔压力和时间密切相关。SD大鼠腹内高压动物模型的制作简易、稳定可靠,且可重复。 相似文献
49.
50.
莫民帅赖洪飘祖爱华 《现代生物医学进展》2012,12(2):341-343
目的:通过比较2个年份职业病危害因素检测与评价报告,评估职业病防治工作的效果。方法:选取两份有代表性的报告,比较和分析职业病危害防护设施的安装、个人防护用品发放与使用、警示标示以及各项检测结果的合格率。结果:该企业2010年各项调查指标相比2004年明显提高。结论:该企业各项职业病防治工作效果显著,劳动环境明显改善,但仍需注意噪声、木粉尘的危害。 相似文献