四倍体补偿技术的建立及其应用

常规基因剔除小鼠的获得主要是利用ES细胞的全能性先获得嵌合体小鼠,再利用:ES细胞的生殖系传递能力,通过嵌合体与野生型小鼠的交配获得杂合子小鼠.而四倍体补偿技术则可绕过嵌合体小鼠阶段,直接获得基因修饰杂合子小鼠.利用电融合技术和Piezoelectric microinjecfion显微注射技术建立了四倍体补偿技术,小鼠四倍体胚胎的获得率(电融合率)为(93.01±l.37)%,经体外培养囊胚形成率为(82.49±2.08)%.通过显微注射方法将2种129品系小鼠来源的ES细胞(CJ7和SCR012)注射到四倍体囊胚腔中,获得了完全ES细胞来源的小鼠,ES鼠的获得率分别为2.7%和8.3%.经微卫星DNA检测,成体小鼠的10个被检测组织均为129小鼠来源的.同时,也利用基因修饰的ES细胞进行了研究,获得了2种基因修饰的完全ES细胞来源的杂合子小鼠,部分小鼠具有繁殖能力,经繁育已获得了纯合子,其中凝血因子Ⅷ基因敲除小鼠获得了预期的血友病小鼠表型.上述结果说明四倍体补偿技术可应用于基因修饰小鼠的制备.     

圆二色光谱揭示光系统Ⅱ在热处理过程中叶绿素荧光动力学变化的原因

研究了光系统Ⅱ(PSⅡ)在热处理过程中的叶绿素a荧光和圆二色(CD)光谱。在30 ℃～40 ℃热处理过程中,PSⅡ的叶绿素荧光参数Fo'保持稳定不变;当温度大于40 ℃时,Fo' 逐渐升高并在55 ℃达到最大值。在PSⅡ颗粒和富含捕光色素(LHCⅡ)的复合物的热处理过程中,具有超大振幅的CD异常信号出现,并且在40 ℃时, 677 nm的异常CD峰强度达到最大。这些结果暗示在PSⅡ颗粒热处理过程中,PSⅡ颗粒中的LHCⅡ的聚集状态和异常CD信号相关,并且也可能是影响Fo'的一个重要因素。     

非人灵长类动物临床症状与疾病初步诊断的探讨

临床症状是诊断疾病的基础资料,可以作为疾病诊断的出发点和重要根据。在兽医临床中,由于非人灵长类动物不能用语言表达自身感觉,需要根据客观的临床症状观察来发现。所以兽医给动物诊断疾病,必须熟练掌握其各种常见临床症状与疾病的关系,以便根据症状的提示对疾病做出初步诊断。本文根据多年从事非人灵长类动物兽医临床工作的实践经验,从循环、呼吸、消化、泌尿、生殖、神经、造血、肌肉、骨骼、皮肤、代谢及中毒等方面,总结了非人灵长类实验动物常见的临床症状和相应疾病初步诊断的联系。     

一株假单胞菌HZ-1降解石油烃的初步研究

从石油废水活性污泥中分离到一株可以较好降解石油烃的假单胞菌（Pseudomonas sp）HZ-1,采用生物膜法对该菌株在30℃条件下降解某炼油厂废水中的烃类物质进行了研究.研究结果表明不同营养盐NH4NO3、NaH2PO4、NH4Cl对菌株HZ-1处理石油废水的作用不同,终浓度为1000mg/L的NH4NO3对菌株HZ-1处理石油废水效果最佳.并在30℃和pH 8.0的条件下,初步研究了该菌株降解萘的情况,在萘浓度低于78 mg/L的情况下,120 rpm好氧振荡培养144h,这株菌对萘的降解率在86%以上.     

林线附近主要植被类型下土壤非生长季磷素形态

采用Hedley磷素分级方法,比较研究了岷江上游林线附近不同植被类型(高寒灌丛草甸、雪山杜鹃灌丛和岷江冷杉林)非生长季0—20cm土壤无机磷和有机磷形态。结果表明,研究区内土壤总磷平均含量(857.32mg·kg-1)较高,但活性磷含量仅占总磷的10%左右。生物态磷含量占总磷含量的60%以上,表明土壤磷素受生物作用影响较大。3种植被类型下土壤无机磷主要以D.HCl-Pi(稀盐酸提取无机磷)和C.HCl-Pi(浓盐酸提取无机磷)形态存在,活性无机磷和NaOH-Pi含量较少。高寒灌丛草甸土壤D.HCl-Pi和C.HCl-Pi含量均显著高于岷江冷杉,表明其含有更多的钙结合态磷。土壤有机磷与土壤有机碳呈显著正相关,NaOH-Po是有机磷主要的构成形态,占总磷含量的39.39%—53.69%。不同植被类型下土壤有机磷形态间差异较大,岷江冷杉林下土壤NaHCO3-Po和NaOH-Po含量最高,高寒灌丛草甸则含有更多的C.HCl-Po。低温和凋落物积累是造成林线附近土壤有机磷含量较高的重要原因。     

小角X-射线散射法解析多结构域蛋白质或复合物的溶液结构

随着同步辐射装置的建设与发展及各种建模方法的产生与完善,小角X-射线散射（small angle X-ray scattering,SAXS）法已经逐渐成为结构生物学中的一种重要的工具。SAXS可以用于研究溶液中生物大分子的结构及构象变化,蛋白质的组装、折叠等动态过程。本文对SAXS的基本原理、常用的研究技术和建模方法及其应用进行了综述。     

抗VacA+CagA+幽门螺杆菌IgY的抗感染作用研究

为研究抗VacA CagA 幽门螺杆菌(Hp)IgY的抗感染作用,以VacA CagA Hp为抗原免疫蛋鸡,聚乙二醇法和水稀释法从鸡卵黄中提取抗-VacA CagA Hp-IgY,酶联免疫吸附实验(ELISA)测定IgY抗体效价。建立胃腔感染VacA CagAHp的昆明系小鼠模型,观察抗-VacA CagA Hp-IgY对小鼠胃腔感染VacA CagA Hp的防治效果。ELISA法测定IgY效价均为1∶20,480;抗-VacA CagA Hp-IgY防治小鼠胃腔感染VacA CagAHp效果较理想,IgY高、中剂量组效果优于阳性对照组(P<0.05);低剂量组效果等同于阳性对照组(P>0.05)。抗-VacA CagA Hp-IgY较好的体内抗感染作用,提示该IgY有望成为较理想的治疗VacA CagA Hp感染的生物制剂。     

印第安纳沙门氏菌对氯霉素类药物耐药性分析

[目的]调查鸡源沙门氏菌对氯霉素类药物的耐药特征和相关耐药基因的流行情况.[方法]从山东省部分地区鸡孵化场、养殖场、屠宰场分离样品进行沙门氏菌鉴定和药物敏感性试验;设计引物,对氯霉素类药物的耐药基因进行PCR扩增和序列分析.[结果]试验分离到印第安纳沙门氏菌,分离率为23.28％.孵化场、养殖场、屠宰场印第安纳沙门氏菌对氯霉素耐药率分别为50.00％、83.33％和93.30％,对氟苯尼考耐药率为83.33％、100％和100％,对甲砜霉素耐药率为63％、65％和77％.在80株氯霉素类耐药菌株中,54株检测到catA1基因,74株检测到floR基因,5株检测到cmlA基因.[结论]不同来源印第安纳沙门氏菌对氯霉素类药物耐药率存在差异,catA1和floR基因广泛存在于耐药菌株中.     

不同产地川乌炮制前后差异性成分研究北大核心CSCD

为建立川乌及制川乌的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并结合化学计量学方法和主成分含量测定和比较3个不同产地川乌炮制前后的差异成分。该文采用HPLC法,利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)计算相似度,并结合聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)、偏最小二乘判别分析(PLS-DA)、正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)及主成分含量测定结果进行综合分析。结果表明:(1)建立了3个产地15批川乌炮制前后的HPLC指纹图谱,分别标定了25个和14个共有峰,并通过对照品指认出6个共有峰,分别为苯甲酰新乌头原碱(峰16)、苯甲酰乌头原碱(峰17)、苯甲酰次乌头原碱(峰18)、新乌头碱(峰21)、次乌头碱(峰22)、乌头碱(峰23)。(2)化学计量学方法分析显示,川乌炮制前后的30批样品被明显分为2类,15批川乌被分为3类,15批制川乌被分为3类,新乌头碱、次乌头碱等6个成分可能是不同产地川乌炮制前后的潜在差异成分。(3)炮制前后主成分含量测定结果均有不同程度的变化,四川江油所产川乌炮制前后部分成分含量明显高于另外两个产地所产川乌。该研究建立的指纹图谱精密度、重复性、稳定性均较好,结合化学计量学分析方法和主成分含量测定分析,可为不同产地川乌炮制前后质量控制提供参考。     

丁型肝炎病毒的分子生物学研究进展

丁型肝炎病毒(Hepatitis delta virus,HDV)是一种缺陷病毒,必须在嗜肝DNA病毒的辅助下才能复制并组装成有感染的病毒颗粒[1].