全文获取类型
收费全文 | 6474篇 |
免费 | 786篇 |
国内免费 | 470篇 |
出版年
2024年 | 20篇 |
2023年 | 80篇 |
2022年 | 189篇 |
2021年 | 289篇 |
2020年 | 202篇 |
2019年 | 311篇 |
2018年 | 259篇 |
2017年 | 228篇 |
2016年 | 266篇 |
2015年 | 357篇 |
2014年 | 428篇 |
2013年 | 487篇 |
2012年 | 544篇 |
2011年 | 502篇 |
2010年 | 303篇 |
2009年 | 256篇 |
2008年 | 326篇 |
2007年 | 268篇 |
2006年 | 259篇 |
2005年 | 206篇 |
2004年 | 175篇 |
2003年 | 183篇 |
2002年 | 153篇 |
2001年 | 129篇 |
2000年 | 130篇 |
1999年 | 106篇 |
1998年 | 64篇 |
1997年 | 39篇 |
1996年 | 49篇 |
1995年 | 41篇 |
1994年 | 42篇 |
1993年 | 30篇 |
1992年 | 43篇 |
1991年 | 57篇 |
1990年 | 41篇 |
1989年 | 46篇 |
1988年 | 30篇 |
1987年 | 37篇 |
1986年 | 34篇 |
1985年 | 33篇 |
1984年 | 40篇 |
1983年 | 38篇 |
1982年 | 25篇 |
1979年 | 26篇 |
1976年 | 23篇 |
1975年 | 19篇 |
1974年 | 26篇 |
1973年 | 29篇 |
1972年 | 20篇 |
1971年 | 19篇 |
排序方式: 共有7730条查询结果,搜索用时 15 毫秒
111.
柠檬酸合酶(citrate synthase 3, CS3)是细胞代谢途径中的关键酶之一,其活性调节着生物体的物质和能量代谢过程。本研究旨在从苹果全基因组中鉴定CS3基因家族成员,并进行生物信息学和表达模式分析,为研究苹果CS3基因的潜在功能提供理论基础。利用BLASTp基于GDR数据库鉴定苹果CS3家族成员,通过Pfam、SMART、MEGA5.0、clustalx.exe、ExPASy Proteomics Server、MEGAX、SOPMA、MEME和WoLF PSORT等软件分析CS3蛋白序列基本信息、亚细胞定位情况、结构域组成、系统进化关系以及染色体定位情况。利用酸含量的测定和实时荧光定量PCR (real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction, qRT-PCR)技术检测苹果6个CS3的组织表达和诱导表达特性。苹果CS3基因家族包含6个成员,这些CS3蛋白包括473−608个不等的氨基酸残基,等电点分布在7.21−8.82。亚细胞定位结果显示CS3蛋白分别定位在线粒体和叶绿体。系统进化分析可将其分为3类,各亚家族基因数量分别为2个。染色体定位结果显示,CS3基因分布在苹果不同的染色体上。蛋白二级结构以a-螺旋为主,其次是无规则卷曲,b-转角所占比例最小。筛选的6个家族成员在不同苹果组织中均有表达,整体表达趋势从高到低依次为MdCS3.4相对表达含量最高,MdCS3.6次之,其他家族成员相对表达量依次为MdCS3.3>MdCS3.2>MdCS3.1>MdCS3.5。qRT-PCR结果显示,MdCS3.1和MdCS3.3基因在酸含量较低的‘成纪1号’果肉中相对表达量最高,酸含量较高的‘艾斯达’果肉中MdCS3.2和MdCS3.3基因相对表达量最高。因此,本研究对不同苹果品种中CS3基因相对表达量进行了检测,并分析了其在苹果果实酸合成过程中的作用。结果表明,CS3基因在不同苹果品种中的相对表达量存在差异,为后续研究苹果品质形成机制提供了参考。 相似文献
112.
以两种常见园林观赏草:白穗狼尾草(Pennisetum alopecuroides ‘White’)和拂子茅(Calamagrostis epigeios)作为试验材料,利用开顶箱(OTCs)模拟法,研究了不同高浓度臭氧(O3,EO):80 nmol/mol(EO-80)、120 nmol/mol(EO-120)和160 nmol/mol(EO-160)下两种观赏草叶片逆境生理特征的变化规律。结果表明:(1)短期(7 d)内随O3浓度增加,白穗狼尾草叶绿素和类胡萝卜素含量较对照呈下降趋势,拂子茅较对照无显著变化。(2)在EO-120、EO-160下处理7 d时,两种观赏草叶片的净光合速率(Pn)和气孔导度(gs)较对照显著下降,且白穗狼尾草下降的幅度均大于拂子茅。(3)不同高浓度O3胁迫下,两种观赏草叶片丙二醛(MDA)含量较对照均有所升高,其中在EO-160下处理21 d时白穗狼尾草和拂子茅叶片MDA含量分别增加30.2%(P<0.05)和13.5%(P>0.05),表明在EO-160浓度胁迫下白穗狼尾草受到的膜脂过氧化伤害大于拂子茅。(4)在EO-120和EO-160下处理21 d时,白穗狼尾草叶片可溶性蛋白含量较对照分别显著下降24.2%和43.1%,而拂子茅较对照分别下降19.0%和22.9%(P<0.05)。(5)与对照组相比,高浓度O3下两种观赏草叶片的过氧化物酶(POD)活性随胁迫时间延长呈下降趋势,超氧化物歧化酶(SOD)活性呈先升后降。(6)综合以上生理特征比较及主成成分分析表明,佛子茅比白穗狼尾草更耐O3,前者在O3高污染地区可能会有更高的应用价值。 相似文献
113.
Recovering phylogenetic relationships in lineages experiencing intense diversification has always been a persistent challenge in evolutionary studies, including in Gentiana section Chondrophyllae sensu lato (s.l.). Indeed, this subcosmopolitan taxon encompasses more than 180 mostly annual species distributed around the world. We sequenced and assembled 22 new plastomes representing 21 species in section Chondrophyllae s.l. In addition to previously released plastome data, our study includes all main lineages within the section. We reconstructed their phylogenetic relationships based on protein‐coding genes and recombinant DNA (rDNA) cistron sequences, and then investigated plastome structural evolution as well as divergence time. Despite an admittedly humble species cover overall, we recovered a well‐supported phylogenetic tree based on plastome data, and found significant discordance between phylogenetic relationships and taxonomic treatments. Our results show that G. capitata and G. leucomelaena diverged early within the section, which is then further divided into two clades. The divergence time estimation showed that section Chondrophyllae s.l. evolved in the second half of the Oligocene. We found that section Chondrophyllae s.l. had the smallest average plastome size (128 KB) in tribe Gentianeae (Gentianaceae), with frequent gene and sequence losses such as the ndh complex and its flanking regions. In addition, we detected both expansion and contraction of the inverted repeat (IR) regions. Our study suggests that plastome degradation parallels the diversification of this group, and illustrates the strong discordance between phylogenetic relationships and taxonomic treatments, which now need to be carefully revised. 相似文献
114.
115.
116.
大气压辉光放电低温等离子体诱变选育谷氨酰胺转胺酶高产菌株 总被引:6,自引:0,他引:6
以茂源链轮丝菌(Streptoverticillium mobaraense)03-10为出发菌株,采用一种新型的裸露电极大气压辉光放电的冷等离子体技术对链霉菌孢子进行诱变。根据双层平板法菌落显色及诱变处理后菌落形态差异快速筛选谷氨酰胺转胺酶高产突变株。突变率、正突变率分别达到42.8%和20.6%。最后复筛选育出具有较好遗传稳定性和形态稳定性的高产突变株G2-1,酶活达到2.73U/mL,比出发菌株提高了82%。 相似文献
117.
Mahabub Alam Hiroki Shima Yoshitaka Matsuo Nguyen Chi Long Mitsuyo Matsumoto Yusho Ishii Nichika Sato Takato Sugiyama Risa Nobuta Satoshi Hashimoto Liang Liu Mika K. Kaneko Yukinari Kato Toshifumi Inada Kazuhiko Igarashi 《The Journal of biological chemistry》2022,298(7)
Methionine adenosyltransferase (MAT) catalyzes the synthesis of S-adenosylmethionine (SAM). As the sole methyl-donor for methylation of DNA, RNA, and proteins, SAM levels affect gene expression by changing methylation patterns. Expression of MAT2A, the catalytic subunit of isozyme MAT2, is positively correlated with proliferation of cancer cells; however, how MAT2A promotes cell proliferation is largely unknown. Given that the protein synthesis is induced in proliferating cells and that RNA and protein components of translation machinery are methylated, we tested here whether MAT2 and SAM are coupled with protein synthesis. By measuring ongoing protein translation via puromycin labeling, we revealed that MAT2A depletion or chemical inhibition reduced protein synthesis in HeLa and Hepa1 cells. Furthermore, overexpression of MAT2A enhanced protein synthesis, indicating that SAM is limiting under normal culture conditions. In addition, MAT2 inhibition did not accompany reduction in mechanistic target of rapamycin complex 1 activity but nevertheless reduced polysome formation. Polysome-bound RNA sequencing revealed that MAT2 inhibition decreased translation efficiency of some fraction of mRNAs. MAT2A was also found to interact with the proteins involved in rRNA processing and ribosome biogenesis; depletion or inhibition of MAT2 reduced 18S rRNA processing. Finally, quantitative mass spectrometry revealed that some translation factors were dynamically methylated in response to the activity of MAT2A. These observations suggest that cells possess an mTOR-independent regulatory mechanism that tunes translation in response to the levels of SAM. Such a system may acclimate cells for survival when SAM synthesis is reduced, whereas it may support proliferation when SAM is sufficient. 相似文献
118.
外源p21~(WAF1)转染对人成纤维细胞凋亡的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
构建了有义和反义p21WAF1 逆转录病毒表达载体, 分别经脂质体包裹后转染人胚肺二倍体成纤维细胞(2BS)。Southern 印迹杂交证实转染细胞中外源p21 WAF1cDNA 已整合入基因组中。与空载体转染细胞相比, 有义转染细胞的p21WAF1 m RNA 表达上升; 细胞增殖速度明显减慢; 对丁酸钠诱导凋亡的敏感性降低, 表现在细胞存活率升高, 核DNA 梯状断裂片段出现的时间滞后, 断裂片段浓度下降, 流式细胞计检测的凋亡峰面积缩小。而反义转染细胞的p21WAF1 m RNA表达下降; 细胞增殖速度较快; 对丁酸钠诱导凋亡的敏感性上升, 有关表现与有义转染细胞相反。说明2BS细胞内p21WAF1 的表达量与其被丁酸钠诱导凋亡的能力呈负相关。 相似文献
119.
目的:研究脑胶质瘤中p16基因启动子区甲基化情况及其临床意义。方法:用甲基化特异性PCR技术检测42例脑胶质瘤组织和癌旁正常脑组织中p16基因启动子甲基化,并分析该基因启动子甲基化与临床病理特征之间的关系。结果:脑胶质瘤组织中p16基因异常甲基化率(38.27%)显著高于癌旁正常脑组织中p16基因的异常甲基化率(8.8%,P=0.000)。发生甲基化的肿瘤组织或者正常脑组织中p16基因mRNA和蛋白表达显著降低。此外,p16基因异常甲基化和肿瘤病理分级有相关性(P=0.007),而与患者性别、年龄及肿瘤类型等临床特征无关(P=0.669,0.869和0.944)。结论:p16基因启动子区CpG岛高甲基化与p16表达下调相关,推测p16启动子区CpG岛高甲基化是导致p16基因在脑胶质瘤中表达下调的重要因素,有望成为脑胶质瘤早期辅助诊断的分子标志物之一。 相似文献
120.
飞行(学)员ACE基因的多态性 总被引:5,自引:0,他引:5
血管紧张素转化酶 (ACE)第 16内含子的插入 缺失多态性与运动员耐力水平有关 .为了解这一多态性与飞行员飞行耐力的关系 ,对不同阶段飞行人员ACE第 16内含子基因型进行了分析和比较 .结果显示 ,ACEDD基因型百分率在招飞体检应征人员为 12 5 %、基础飞行学院学员 (未飞 )为 11 5 %、飞行学院初教机飞行学员为 10 0 %、歼击机飞行员为 3 0 % .歼击机飞行员组D等位基因频率及DD基因型明显低于其他 3组 (P <0 0 1) ,而后 3组之间无明显差异 (P >0 0 5 ) .进而观察到 ,飞行员体能测试成绩优者 ,无DD基因型 .提示 ,飞行员体能表现与ACE第 16内含子的插入 缺失多态性有关 ,具有I等位基因者 ,体能较好 ,飞行耐力也较好 . 相似文献