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Complete enzymatic deglycosylation of native sex steroid-binding protein (SBP or SHBG) of human and rabbit plasma: effect on the steroid-binding activity.
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P. H. Petra P. R. Griffin J. R. Yates rd K. Moore W. Zhang 《Protein science : a publication of the Protein Society》1992,1(7):902-909
An enzymatic procedure for the complete removal of the N-linked and O-linked oligosaccharide side chains of the sex steroid-binding proteins (SBP or SHBG) of human and rabbit plasma under native conditions is described. Deglycosylation was catalyzed by N-glycanase, neuraminidase, and O-glycanase and was monitored by SDS-PAGE, lectin blotting, and molecular weight analyses by electrospray mass spectrometry. Digestion of rabbit SBP with N-glycanase generated a major 39,777-Da protein and two minor ones of 39,389 and 39,545 Da. The molecular weight of the major protein agrees with the molecular weight calculated from the sequence of the sugar-free polypeptide monomer (39,769 Da: Griffin, P.R., Kumar, S., Shabanowitz, J., Charbonneau, H., Namkung, P.C., Walsh, K.A., Hunt, D.F., & Petra, P.H., 1989, J. Biol. Chem. 264, 19066-19075), whereas the other two are deglycosylated proteolytic cleavage products lacking the TQR and TQ sequences at the amino-terminus. The N- and O-linked side chains of human SBP were removed by sequential digestion with N-glycanase and neuraminidase/O-glycanase. A 38,771-Da protein was generated, which agrees well with the molecular weight of the sugar-free polypeptide monomer (Walsh, K.A., Titani, K., Kumar, S., Hayes, R., & Petra, P.H., 1986, Biochemistry 25, 7584-7590). N-deglycosylation of human and rabbit SBP has no effect on the steroid-binding activity, but removal of the O-linked side chains of N-deglycosylated human SBP results in an apparent 50% loss of steroid-binding activity and an increase in the Kd for the binding of 5 alpha-dihydrotestosterone from 0.3 mM to 0.9 nM.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS) 相似文献
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榆中贝母(Fritillaria yuzhongensis)生长于马啣山的高山地带,全生育期约100 d左右,是一种生育期较短的类短命植物。在果实成熟时,种子的胚发育不全,具有后熟作用的特点,包括形态后熟和生理后热两个阶段;因此,需要一定时期的低温处理,才能完成后熟过程,以解除休眠,促使种子发芽。本试验表明:榆中贝母完成形态后熟过程的最佳温度是7℃左右,经过100d以上的低温处理才能使原胚发育成熟,继续在7℃低温下处理70d以上,才能完成生理后熟过程。榆中贝母种子休眠时间长,需要经过170d以上的低温处理,种子才能萌发。本试验结果为榆中贝母种子的萌发提出了适宜的温度范围和低温处理时间,为提高种子的出苗率和缩短栽培年限提供了科学依据。 相似文献
224.
氧化塘中细菌种群组成动态 总被引:2,自引:0,他引:2
对武汉地区氧化塘中的细菌数量、细菌种类、种群组成、优势种及群落多样性进行了初步研究。从氧化塘中分离的细菌经鉴定属于12个属,主要有假单胞菌属(Pseudomonas)、棒杆菌属(corynebacterium)、无色杆菌属(Achromobacter)和微杆菌属(Microbacterium),其它菌属是芽孢杆菌属(Bacillus)、色杆菌属(Chromobacterium)、短杆菌属(Brevibacterium)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、微球菌属(Micrococcus)、黄杆菌属(Flavobacterium)、埃希氏菌属(Escherichia)和链球菌属(Streptococcus)。在5个小塘中,细菌数量、种群组成和群落多样性指数都有不同,这与各塘的污染程度有关。由此,多样性指数可用于监测氧化塘的净化效果。 相似文献
225.
灭幼脲Ⅲ号在好气水环境中的降解代谢的初步研究 总被引:1,自引:1,他引:0
本文研究了新农药灭幼脲Ⅲ号在好气水环境中的降解与代谢。在避光条件下,观察了灭菌组与实验组中灭幼脲Ⅲ号及其主要代谢产物的消长过程,比较了它的化学水解与微生物降解的差异。在室内模拟好气系统中,研究了母体化合物在水体中的残留动态和生物降解半衰期,及其初期主要代谢途径的转化产物,同时分别用高效液相色谱法,紫外吸收光谱扫描,以及特征有机质谱图,对灭幼脲Ⅲ号的两种主要代谢产物进行了定性定量测定。结果表明:灭幼脲Ⅲ号在室内好气环境中较易水解,而且水中微生物的存在能加速它的降解,母体化合物在水体中初期代谢主要途径为分子中的苯甲酰碳与脲氮键首先开裂,生成邻氯苯甲酸(CBA)和对氯苯基脲素(CPU)。 相似文献
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227.
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229.
不同利用方式下稻田效益的综合评价 总被引:1,自引:0,他引:1
一、引言评价是多目标系统优化和决策的基础。和任何其他农业生态系统一样,稻田生态系统具有多目标、多功能的特点,单项指标难以反映系统的优劣。目前,川东南地区稻田开发利用方式多种多样,但效益评价主要是采用简单的比较分析或粗放的定性描述,尚未形成系统的 相似文献
230.
本研究观察了肾血管性高血压大鼠(RHR)肥大左室的等容峰压-容积关系(PIPVR)和左室压力最大上升速率-容积关系(PRPVR)的曲线特征,并用两曲线的升支斜率E_(max)和dE/dt_(max)及曲线的特征参数评价了RHR(8周)左室的收缩能力及其对异丙肾上腺素的反应性。结果显示,大鼠高血压8周后左室发生明显肥大;与同龄假手术对照大鼠(SOR)相似,RHR的PIPVR和PRPVR也呈指数曲线形式;与SOR比较,RHR左室的PIPVR和PRPVR左上移位,E_(max)、dE/dt_(max)显著增大(P均<0.01),分别增加78%和97%,曲线的特征参数K_1、K_2、B_1和B_2也明显高于SOR(P均<0.05),分别增加37%、32%、25%和57%;灌注异丙肾上腺素(0.94μg/min)后,上述指标的增加幅度均较SOR低(P均<0.05)。结果提示,压力超负荷心肌肥大并不影响PIPVR的非线性特征,基础状态下,RHR肥大左室的收缩能力增强,但对异丙肾上腺素的反应性降低。 相似文献