蛋白核酸合成抑制剂和蛋白磷酸化对基因表达的调节

环己酰亚胺和放线菌素D明显降低小麦幼苗中BADH基因的表达,表明BADH基因表达在转录和转译水平上受到调控。氯霉素则有增加表达的效应。线粒体可能形成阻遏蛋白参与调节。H7和甘露糖降低BADH基因表达,相应地冈田酸(Okadaic acid)明显增加表达,说明蛋白磷酸化积极参与小麦幼苗中BADH基因表达的调节。     

小鼠受精卵早期发育过程中PKA在M/G1期进程中的作用

为研究小鼠体内l-细胞期受精卵蛋白激酶A(PKA)对M/G1期进程的影响,应用热稳定性抑制剂PKI显微注射入l-细胞期受精卵内,观察M期促进因子(MPF)及PKA活性变化以及MPF调节亚基Cyclin B含量情况。发现PKI显微注射后PKA活性低,而MPF活性在hCG后27．5h即达高峰,较对照组提前30分钟。PKI达一定浓度则MPF活性不下降,出现M/G1阻滞;与此同时Western blotting法显示PKI注射后Cyclin B含量在M末期相当于M中期水平。结果表明,PKI显微注射抑制PKA活性后MPF活性呈高峰值,高浓度PKI显微注射可引起M/Gl阻滞,其机制与PKI干扰了Cyclin B降解有关。     

核果茶属的气孔器类型及其系统学意义

为了检验有关核果茶属气孔器类型不同的研究结果 ,使用从模式标本上获取的实验材料重新观察了耿煊 (H .Keng)在 1 962年报道过的具有毛茛型气孔器的核果茶属 3个种的叶片下表皮 ,得到了与耿煊不同的研究结果 ,即核果茶属的气孔器属大头茶型 ,与邻近的石笔木属、拟核果茶属乃至山茶亚科的气孔器类型一致。结果提示 ,气孔器类型可以作为划分山茶亚科和厚皮香亚科的依据     

家兔精子膜蛋白rSP10在大肠杆菌中的高效表达及其抗血清的制备

为研究家兔精子膜蛋白rSP10在精子膜上的定位及其免疫原性,将不含编码信号肽序列的rsp10基因插入表达载体pET30a中,N端具有His6肽的融合蛋白re-rSP10得到高效表达,表达产物达细菌总蛋白的67%。经DEAE柱层析纯化表达产物,re-rSP10,产量约为50mg/mL培养物。Western实验结果表明,精子膜蛋白多克隆抗体能识别re-rsp10,说明大肠杆菌表达的re-rSP10具有免疫原性。用纯化的re-rSP10免疫雌性兔,得到re-rSP10专一性多克隆抗血清。将re-rSP10专一性多克隆抗血清加入获能精子中,发现SP10专一性多克隆抗血清严重影响获能精子的运动并且表现为剂量依赖性,但获能精子凝集现象并不明显。     

VEGF受体KDR胞外区基因的克隆及其在昆虫细胞中的表达

VEGF(血管内皮细胞生长因子,Vascular Endothelial Growth Factor)是刺激内皮细胞增殖和新生血管形成的最重要因子,与多种实体瘤的生长和转移密切相关。应用其可溶性受体阻断它的病理作用是一个非常有前景的课题。将VEGF受体KDR胞外区前三个Loop 969碱基对的cDNA片段克隆到杆状病毒表达载体pFastBacI,与杆状病毒表达载体Bacmid同源重组后,转染昆虫细胞SF9,获得重组杆状病毒并证明了目的基因的高效表达。经Western blot证实表达产物的特异性。经ELISA和体外生物学活性检测表明表达产物可阻断VEGF的生物学活性,抑制鸡胚CAM血管的生长。     

鸡贫血病毒全基因组点突变体的体外构建及其在宿主细胞MSB1的转染研究

在已构建鸡贫血病毒（CAV）全基因组体外克隆（pCAV2.4)的基础上,设计一对特定引物,用CPR定向点突变方法扩增出含有完整的EcoRI位点的CAV全基因组（2.3kb）,并克隆入pUC18载体中,获得阳性克隆,命名为pCAVE^ 。经酶切鉴定和序列分析EcoRI位点两侧序列,原先不完整的EcoRI位点（－GACTTC－）已被定向点突变为完整的EcoRI位点（－GAATTC-)。对重组质粒pCAVE^ 以EcoRI酶切回收CAV全基因组DNA,在体外连接并经纯化后,经Effectene转染易感宿主细胞MSB1。将转染细胞培养上清连续传代8次以后,出现病毒复制（MSB1细胞培养基颜色不再变黄）。取此时细胞培养液感染无CAV的1日SPF小鸡,14天出现典型的鸡盆血症状和胸腺萎缩、骨髓脂肪变性等病变。获得了能在体外自主复制并组装成完整CAV病毒子的感染性核酸。     

禽白血病病毒J亚群env基因的克隆和序列分析

应用多聚酶链反应（PCR）的方法增出ADOL－4817毒株的囊膜蛋白env基因,并克隆进大肠杆菌。经核酸序列分析证明,env基因的大小为1746bp,其中gp85和gp37mh 1554bp组成,可翻译成517个氨基酸,分子量为57.7kD。根据糖基化位点N－X－S／T的特点,发现ADOL－4817的env蛋白有15个潜在的糖基化位点。同源性分析证明,ADOL－4817的env基因与其它ALV－J的env基因序列同源性为88.8％－92.4%,而与外源性ALVs的相应序列的同源性仅为40.5％－51.4％,然而,与内源性的EAV－HP毒株的类env基因的同源性高达91.2％;另外,ADOL－4817毒株的gp37d C末端多了13个氨基酸,这些结果提示,ALV－J的env基因存在广泛的变异性,env基因可能来源于内源性和外源性ALVs的重组。     

Distribution of lysozyme and protease, and amino acid concentration in the guts of a wood-feeding termite, Reticulitermes speratus (Kolbe): possible digestion of symbiont bacteria transferred by trophallaxis

Distribution of lysozyme and protease, and amino acid concentration in the guts of a wood‐feeding termite, Reticulitermes speratus (Kolbe) (Isoptera, Rhinotermitidae) were studied to examine the possibility that termites digest symbiont bacteria transferred by trophallaxis. Total lysozyme activity was found predominantly in the salivary gland and to a minor extent in the digestive tracts. However, specific lysozyme activity was high in the foregut as well as in the salivary gland. The similarity of the lysozyme pH profile of the salivary gland and of the foregut suggested that the foregut lysozyme came from the salivary gland. Major protease activity having the optimum pH of 7.5 was found in the midgut. Total free amino acid amount and concentration in the midgut was higher than elsewhere in the digestive tract. The possibility that lysozyme secreted from the salivary gland into the foregut digests hindgut bacteria transferred by trophallaxis was discussed.     

末端氧化途径对小麦芽中的BADH基因表达的调节

KCN(2mol/L),antimycinA(2.7μmol/L),NaN3(6mmol/L)和SHAM(salicylhydroxamicacid,5mmol/L)分别降低小麦芽中的BADH基因表达约40%,41%,46%和22.0%,而ATP,ADP分别增加BADH基因表达约33%和34%,DNP(2,4-dinitrophenol,1mmol/L)降低BADH基因表达约30%。这些结果表明,正常运转的末端氧化途径所形成的高能化合物对BADH基因表达是重要和必需的,细胞色素途径比交替途径对BADH基因表达有更大的影响。这是首次对“多条路线”假说关于呼吸代谢调节植物基因表达的观点提供直接的证据。