首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
文章检索
  按 检索   检索词:      
出版年份:   被引次数:   他引次数: 提示:输入*表示无穷大
  收费全文   5524篇
  免费   783篇
  国内免费   3604篇
  2024年   63篇
  2023年   205篇
  2022年   314篇
  2021年   338篇
  2020年   345篇
  2019年   389篇
  2018年   262篇
  2017年   251篇
  2016年   232篇
  2015年   290篇
  2014年   498篇
  2013年   414篇
  2012年   583篇
  2011年   562篇
  2010年   530篇
  2009年   564篇
  2008年   591篇
  2007年   547篇
  2006年   505篇
  2005年   479篇
  2004年   380篇
  2003年   284篇
  2002年   266篇
  2001年   238篇
  2000年   244篇
  1999年   140篇
  1998年   68篇
  1997年   48篇
  1996年   40篇
  1995年   37篇
  1994年   28篇
  1993年   8篇
  1992年   15篇
  1991年   21篇
  1990年   16篇
  1989年   21篇
  1988年   14篇
  1987年   13篇
  1986年   12篇
  1985年   17篇
  1984年   6篇
  1983年   8篇
  1982年   11篇
  1981年   8篇
  1980年   2篇
  1976年   1篇
  1950年   3篇
排序方式: 共有9911条查询结果,搜索用时 421 毫秒
961.
易继平  周亚芳  杜鹃  江泓 《生物磁学》2009,(14):2670-2672
目的:总结结核性脑膜脑炎并结核性脊髓炎的临床特点、治疗方法及预后。方法:对2例结核性脑膜脑炎并结核性脊髓炎患者的临床资料、实验室检查、影像学资料、组织病理学、治疗方法及预后进行分析。结果:2例患者均有头痛、颅神经麻痹、脑膜刺激征、双下肢乏力、感觉障碍;脑脊液中蛋白明显升高;MRI检查显示有脑膜强化、颅内强化灶及相应节段脊髓肿胀;全身抗痨联合鞘内注射异烟肼和地塞米松治疗有效。结论:结核性脑膜脑炎患者如出现脊髓受损表现或脑脊液蛋白明显增高,而腰穿压力正常或降低等应考虑合并结核性脊髓炎的可能性。早期全身抗痨联合鞘内给药疗效确切。  相似文献   
962.
耿红冉  郑玉玲  姜永强 《生物磁学》2009,(14):2798-2800
猪链球菌是一种全球性严重人兽共患病病原体,因为缺乏有效疫苗,使感染难以控制。目前疫苗研究主要集中在血清2型,因其流行范围最广。猪链球菌疫苗研究的方法包括构建基因表达文库、免疫蛋白质组学方法、反向疫苗学方法和其它传统方法。本文对目前为止所识别和评价的猪链球菌2型疫苗候选分子进行综述,包括全菌疫苗、英膜多糖、蛋白抗原。其中很多疫苗候选分子对小鼠或者猪有保护效果,而要获得针对更多血清型的通用疫苗则需要更多努力。  相似文献   
963.
吩嗪-1-羧酸(phenazine-1-carboxylic acid, PCA)是促进根际生长假单胞菌分泌的重要抗菌物质。采用Plackett-Burman(PB)设计和响应面法(response surface method, RSM)对假单胞菌株M18(Pseudomonas sp. M18)的gacA基因突变株M18G的次级代谢产物PCA发酵的营养条件进行建模。运用Plackett-Burman(PB)设计试验,从12个营养成分中筛选出4个关键的组分,进而采用RSM 法对这4个因素进行中心组合设计试验,建立回归方程并进行统计学分析,绘制各营养因子之间的关系图。实验结果表明:建立的模型能合理地模拟并优化发酵中各参数及其浓度,确定发酵培养基的成分和浓度为:黄豆粉33.4g/L,葡萄糖12.7g/L,大豆蛋白胨10.9g/L和乙醇13.8 g/L, M18G菌株经60 h发酵培养,最高PCA产率能达到1.89 g/L,比优化前提高了6倍左右。各营养因子的等值线图表明黄豆粉和乙醇在PCA高产发酵中起到更为关键的作用,因此提供了提高PCA发酵产量的有效方法,并为其未来商业化应用奠定了基础。  相似文献   
964.
微生物脂肪酶蛋白质工程*   总被引:1,自引:0,他引:1  
微生物脂肪酶催化的化学反应具有严格的立体选择性、位点选择性等专一性,催化活性高而副反应少,催化反应不需要辅助因子等特点,因此广泛应用于工农业生产中的诸多领域。利用蛋白质工程技术,提高微生物脂肪酶的特异性、活性和稳定性,对提高微生物脂肪酶制剂产品的市场竞争能力,扩大微生物脂肪酶的应用领域,具有重要的意义。综述了蛋白质工程技术在微生物脂肪酶改性方面的应用现状、存在问题及前景。  相似文献   
965.
以鱼油下脚料为原料.以固定化Geotrichum sp.脂肪酶为催化剂,选择性水解粗鱼油,使目标脂肪酸EPA和DHA富集于甘油骨架上,显著提高了甘油酯中EPA和DHA的质量分数。通过单因素试验和响应面分析得出最佳水解条件:2g粗鱼油,2.5g水,221.3U脂肪酶,30℃,反应11.7h。最佳条件下的水解度为42.1%。EPA和DHA质量分数分别为7.8%和41.1%。经过二次水解后,水解度提高到45.9%,EPA和DHA质量分数分别提高到8.5%和42%。与初始鱼油相比,分别提高了2倍和2.2倍。  相似文献   
966.
脂肪酶二步法催化鱼油下脚料富集DHA   总被引:1,自引:1,他引:0  
采用Pseudomonas sp.脂肪酶水解,Geotrichum sp.脂肪酶选择性酯化的两步法显著提高游离脂肪酸(FFA)中二十二碳六烯酸(DHA)的含量。通过筛选合适的底物醇,优化水解和选择性酯化反应条件达到富集DHA的目的。结果表明月桂醇为选择性酯化的最适底物醇。确定的最佳水解条件:4g反应底物,m(水)/m(粗鱼油)=1,1000 U Pseudomonas sp.脂肪酶,40℃,搅拌速度200r/min,反应24h;最佳酯化条件:3g反应底物,n(FFA)/n(醇)=1/2,1000 U固定化Geotrichum sp.脂肪酶,1g正己烷,30℃,200r/min搅拌,反应20h。经过水解和一次选择性酯化反应后,DHA含量从原料粗鱼油中的18.9%提纯到72.8%;经二次选择性酯化后,DHA含量上升到92%。脂肪酶水解-选择性酯化的两步法是富集DHA的有效方法。  相似文献   
967.
利用木霉与根霉两步发酵秸秆制备L-乳酸研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
以秸秆为原料进行生物转化大量制备有机酸意义重大.在秸秆汽爆法预处理的基础上,以绿色木霉为菌种转化制备秸秆糖,对降解单糖接种米根霉进行二次发酵制备L-乳酸.试验结果表明,第一步绿色木霉固态培养制备纤维素酶时,控温30℃、通气0.12L/(L.min)、发酵40h后制备干曲,后按10g干曲/L汽爆液的配比进行55℃酶解36h,五、六碳糖累积浓度达到86g/L.第二步米根霉发酵时,控制温度32℃、通气0.4L/(L·min)、转速450r/min,发酵48h,最终产L-乳酸累积浓度为81.6g/L.秸秆制备L-乳酸的两步发酵法发酵工艺具有推广价值.  相似文献   
968.
毛木耳子实体中活性多糖APPⅡA的分离纯化与结构初探   总被引:1,自引:0,他引:1  
毛木耳Auricularia polytricha子实体500g经热水浸提、乙醇沉淀、Sevage法脱蛋白后,得到粗多糖3.94g,得率为0.79%。经小鼠S180载体实验证实,50mg/kg该粗多糖对肿瘤的抑制率达47.89%,呈极显著差异。利用离子交换柱对其进行分离,共得到三个部分,分别命名为APPⅠ、APPⅡ、APPⅢ。其中,APPⅡ对小鼠S180的抑制率达到56.36%,明显优于其他两部分。通过SephacrylS300凝胶过滤层析柱后,APPⅡ被进一步分离为A和B两个部分,APPⅡA的抑瘤率为53.61%,远高于APPⅡB,呈极显著差异。通过紫外光谱、红外光谱等方法对该单一多糖组分进行结构分析,表明APPⅡA为一相对分子质量约为110,000Da、可能同时具有α和β构象的杂多糖,主要有木糖和甘露糖组成,且纯度较高,含有硫酸基。  相似文献   
969.
就目前的教学状况而言,大学教育的教学改革是顺应时代发展要求的必然趋势,教学的方法与手段亦应不断地紧跟信息时代的高速发展的要求.诸如多媒体等信息化教学模式在当代大学的课堂教学中的应用越来越走向普及.然而,在如何正确对待和使用多媒体教学的方式与方法上仍存在各种各样的争议及误区,并且这些争议和误区已经不再是某些个案的简单累积.本文拟通过对多媒体在现代基础医学课程<人体寄生虫学>的本科教学中的实际应用进行综合的评价,并结合自身在多媒体教学过程中积累下来的一些认识,既对多媒体教学的优势加以肯定,同时也对于其应用中的困境进行客观的阐述和说明,并提出几点较为可行的解决办法,借此来探讨多媒体教学的教学方略.  相似文献   
970.
心肌干细胞培养和纯化的实验方法研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的:探讨心肌干细胞(CSC)体外分离、培养和纯化方法,以建立重复性好、稳定性高的CSC培养的方法.方法:用不同的消化方法来分C57BL小鼠心脏组织中的细胞,将获得的细胞置于自行拟定的心肌干细胞培养液中培养.以c-kit、Sca-l和Sca-l/c-kit作为干细胞标记,用免疫磁珠法纯化细胞.用流式细胞仪、免疫荧光显微镜、激光共聚焦显微镜检测分选后所得细胞表面标记表达,并对比观察分选前后细胞生长情况,进一步了解CSC的生物学特性.结果:①从小鼠心肌组织中分离培养所得的细胞中,含有一种类似于文献报道中所提及CSC形态的细胞.②用免疫磁珠法可以分选出高纯度的CSC,实验中分选出CSC分别具有c-kit+-CD34-lin-、Sea-I+-CD34low-Lin-、Sea-1+c--kit+-CD34low-Lin-的表型.③分选后的干细胞经过1~2d的滞留期后,贴壁生长的细胞形态相对均一;而传代后细胞贴壁迅速,细胞形态多样.结论:从C57BL小鼠心脏中可以分离、培养获得CSC,并可用免疫磁珠法得以纯化.  相似文献   
设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号