固定化脂肪酶选择性水解废弃鱼油富集DHA和EPA甘油酯

以鱼油下脚料为原料．以固定化Geotrichum sp．脂肪酶为催化剂,选择性水解粗鱼油,使目标脂肪酸EPA和DHA富集于甘油骨架上,显著提高了甘油酯中EPA和DHA的质量分数。通过单因素试验和响应面分析得出最佳水解条件：2g粗鱼油,2．5g水,221．3U脂肪酶,30℃,反应11．7h。最佳条件下的水解度为42．1％。EPA和DHA质量分数分别为7．8％和41．1％。经过二次水解后,水解度提高到45．9％,EPA和DHA质量分数分别提高到8．5％和42％。与初始鱼油相比,分别提高了2倍和2．2倍。     

脂肪酶二步法催化鱼油下脚料富集DHA

采用Pseudomonas sp．脂肪酶水解,Geotrichum sp．脂肪酶选择性酯化的两步法显著提高游离脂肪酸（FFA）中二十二碳六烯酸（DHA）的含量。通过筛选合适的底物醇,优化水解和选择性酯化反应条件达到富集DHA的目的。结果表明月桂醇为选择性酯化的最适底物醇。确定的最佳水解条件：4g反应底物,m（水）／m（粗鱼油）=1,1000 U Pseudomonas sp．脂肪酶,40℃,搅拌速度200r／min,反应24h;最佳酯化条件：3g反应底物,n（FFA）／n（醇）=1／2,1000 U固定化Geotrichum sp．脂肪酶,1g正己烷,30℃,200r／min搅拌,反应20h。经过水解和一次选择性酯化反应后,DHA含量从原料粗鱼油中的18．9％提纯到72．8％;经二次选择性酯化后,DHA含量上升到92％。脂肪酶水解-选择性酯化的两步法是富集DHA的有效方法。     

利用木霉与根霉两步发酵秸秆制备L-乳酸研究

以秸秆为原料进行生物转化大量制备有机酸意义重大.在秸秆汽爆法预处理的基础上,以绿色木霉为菌种转化制备秸秆糖,对降解单糖接种米根霉进行二次发酵制备L-乳酸.试验结果表明,第一步绿色木霉固态培养制备纤维素酶时,控温30℃、通气0.12L/(L.min)、发酵40h后制备干曲,后按10g干曲/L汽爆液的配比进行55℃酶解36h,五、六碳糖累积浓度达到86g/L.第二步米根霉发酵时,控制温度32℃、通气0.4L/(L·min)、转速450r/min,发酵48h,最终产L-乳酸累积浓度为81.6g/L.秸秆制备L-乳酸的两步发酵法发酵工艺具有推广价值.     

毛木耳子实体中活性多糖APPⅡA的分离纯化与结构初探

毛木耳Auricularia polytricha子实体500g经热水浸提、乙醇沉淀、Sevage法脱蛋白后,得到粗多糖3.94g,得率为0.79%。经小鼠S180载体实验证实,50mg/kg该粗多糖对肿瘤的抑制率达47.89%,呈极显著差异。利用离子交换柱对其进行分离,共得到三个部分,分别命名为APPⅠ、APPⅡ、APPⅢ。其中,APPⅡ对小鼠S180的抑制率达到56.36%,明显优于其他两部分。通过SephacrylS300凝胶过滤层析柱后,APPⅡ被进一步分离为A和B两个部分,APPⅡA的抑瘤率为53.61%,远高于APPⅡB,呈极显著差异。通过紫外光谱、红外光谱等方法对该单一多糖组分进行结构分析,表明APPⅡA为一相对分子质量约为110,000Da、可能同时具有α和β构象的杂多糖,主要有木糖和甘露糖组成,且纯度较高,含有硫酸基。     

《人体寄生虫学》多媒体教学经验交流

就目前的教学状况而言,大学教育的教学改革是顺应时代发展要求的必然趋势,教学的方法与手段亦应不断地紧跟信息时代的高速发展的要求.诸如多媒体等信息化教学模式在当代大学的课堂教学中的应用越来越走向普及.然而,在如何正确对待和使用多媒体教学的方式与方法上仍存在各种各样的争议及误区,并且这些争议和误区已经不再是某些个案的简单累积.本文拟通过对多媒体在现代基础医学课程<人体寄生虫学>的本科教学中的实际应用进行综合的评价,并结合自身在多媒体教学过程中积累下来的一些认识,既对多媒体教学的优势加以肯定,同时也对于其应用中的困境进行客观的阐述和说明,并提出几点较为可行的解决办法,借此来探讨多媒体教学的教学方略.     

心肌干细胞培养和纯化的实验方法研究

目的:探讨心肌干细胞(CSC)体外分离、培养和纯化方法,以建立重复性好、稳定性高的CSC培养的方法.方法:用不同的消化方法来分C57BL小鼠心脏组织中的细胞,将获得的细胞置于自行拟定的心肌干细胞培养液中培养.以c-kit、Sca-l和Sca-l/c-kit作为干细胞标记,用免疫磁珠法纯化细胞.用流式细胞仪、免疫荧光显微镜、激光共聚焦显微镜检测分选后所得细胞表面标记表达,并对比观察分选前后细胞生长情况,进一步了解CSC的生物学特性.结果:①从小鼠心肌组织中分离培养所得的细胞中,含有一种类似于文献报道中所提及CSC形态的细胞.②用免疫磁珠法可以分选出高纯度的CSC,实验中分选出CSC分别具有c-kit+-CD34-lin-、Sea-I+-CD34low-Lin-、Sea-1+c--kit+-CD34low-Lin-的表型.③分选后的干细胞经过1~2d的滞留期后,贴壁生长的细胞形态相对均一;而传代后细胞贴壁迅速,细胞形态多样.结论:从C57BL小鼠心脏中可以分离、培养获得CSC,并可用免疫磁珠法得以纯化.     

家族性高胆固醇血症患者低密度脂蛋白受体基因复合杂合突变分析

目的:对1例临床确诊为纯合型家族性高胆固醇血症(FH)先证者及其核心家系成员进行基因检测分析,探讨患儿发病的分子病理基础.方法:收集先证者及父母血标本及临床资料,酚氯仿法提取基因组DNA,DNA直接测序方法检测低密度脂蛋白受体(LDL-R)基因18个外显子和启动子及载脂蛋白B(ApoB100)R3500Q位点,核苷酸序列分析结果与Gen Bank比对寻找突变.结果:(1)先证者三尖瓣轻度关闭不全,先证者父母双侧颈总动脉内-中膜增厚,先证者母亲左侧颈内动脉起始处后壁多发混合回声斑块(2)该家系排除ApoB100基因R3500Q突变;(3)先证者LDL-R基因第13外显子发生A606T和D601Y复合杂合突变,前者第1879位G→A碱基置换,导致丙氨酸改变为苏氨酸,后者为1864位G>T碱基置换,导致天冬氨酸改变为酪氨酸,其父为携带A606T突变的杂合子,其母为携带D601Y突变的杂合子.结论:先证者LDL-R基因存在A606T和D601Y复合杂合突变,它们分别来源于父系及母系遗传.     

IgE介导的肥大细胞脱颗粒信号转导途径的研究进展

肥大细胞(mast cell,MC)是过敏性疾病的关键细胞之一.机体的过敏反应很大程度依赖于肥大细胞膜上的特异性受体FcεRI.肥大细胞膜上交联的FcεRI引发了下游的一系列信号事件并导致脱颗粒,包括细胞因子及趋化因子产生以及白三烯的释放.由于IgE在过敏反应中的重要作用,现在的研究主要集中在FcεRI下游的信号事件.其脱颗粒的分子机制是一个由多种蛋白质分子介导的,各个环节受到精确调控的复杂过程.对肥大细胞脱颗粒分子机制的深入研究将给过敏性疾病提供一个新的治疗方案.     

多功能前列腺治疗仪联合三腔双囊导管药物灌注治疗慢性细菌性前列腺炎疗效研究

目的:探讨应用多功能前列腺治疗仪联合三腔双囊导管药物灌注治疗慢性细菌性前列腺炎的临床疗效.方法:多功能前列腺治疗仪联合三腔双囊导管药物灌注治疗慢性前列腺炎70例,采用单纯双囊导管药物灌注治疗慢性前列腺炎70例,单纯静脉药物治疗慢性细菌性前列腺炎70作为对照.治疗结束后分别对病人前列腺按摩液中卵磷脂小体密度,白细胞数量以及分段尿培养的菌落数进行比较.治疗后随访6～12个月.结果:综合治疗组总有效率94.29%,单纯灌注组总有效率78.57%,单纯静脉组总有效率47.14%.结论:多功能前列腺治疗仪联合三腔双囊导管药物灌注治疗慢性前列腺炎创伤小,安全、有效."     

亲淋巴磁共振造影剂的合成、表征和性能研究

目的:探讨合成亲淋巴造影剂的方法并对其体内外性能进行研究.方法:采用二氨基乙基乙二醇醚(EOEA)-二乙三胺五乙酸(DTPA)线性共聚合物(poly-DTPA-EOEA)为配体,与钆(Gd)的三价盐配位构建T1类线性大分子造影剂,检测二氨基乙基乙二醇-DTPA酰胺共聚物钆配合物(Gd-poly-DTPA-EOEA)的表征和性能.结果:Gd-poly-DTPA-EOEA分子量为20kDa,其中钆的含量为14%(w/w).T1值为6.45L mM-1s-1.Gd-poly-DTPA-EOEA在血液中的存留时间明显长于小分子造影剂Gd-DTPA,并可进入淋巴结巨噬细胞内.结论:Gd-poly-DTPA-EOEA是一种具有高驰豫率、循环时间长和亲淋巴特性的T1类大分子造影剂.