带myc标签的人造血相关PBX相互作用蛋白真核表达载体的构建及其功能研究

目的:构建带myc标签的造血相关PBX相互作用蛋白(HPIP)的真核表达载体,获得myc-HPIP融合蛋白,并对其生物学功能进行初步检测。方法:以本实验室保存的pcDNA3.0-HPIP质粒为模板,采用PCR技术扩增HPIP编码序列,将其插入pXJ-40-myc载体,通过Western印迹检测表达情况;将重组质粒与空载体分别转染人肝癌HepG2细胞,通过Western印迹检测其对AKT、ERK信号通路中AKT、ERK磷酸化水平的影响。结果:双酶切和测序结果表明myc-HPIP真核表达质粒构建成功,转染HepG2细胞后表达了myc-HPIP融合蛋白;Western印迹证明myc-HPIP可升高AKT、ERK的磷酸化水平。结论:构建了带myc标签的人HPIP真核表达载体,为进一步研究HPIP在肿瘤发生发展中的功能奠定了基础。     

秦岭北坡雉类种群密度和群落结构的初步研究

本研究将秦岭北坡周至自然保护区划分为4个生态地理类型带,在以Gates截线法调查雉类种群密度的基础上,对不同生态地理类型雉类群落结构进行了研究。结果表明,秦岭北坡雉类的物种多样性与植被和海拔有一定关系,环境的稳定性对雉类物种多样性有着一定影响。调查中还发现红腹锦鸡已分布到海拔2700 m的山坡上。     

荚果蕨孢子的无菌培养

1　植物名称　荚果蕨 (Ｍａｔｔｅｕｃｃｉａｓｔｒｕｔｈｉｏｐｔｅｒｉｓ)。2　材料类别　成熟的孢子。3　培养条件　 ( 1 )ＭＳ ;( 2 )ＭＳ 0 .3%活性炭 ;( 3) 1 /2ＭＳ ;( 4 )马铃薯培养基。培养基中均加入 3%蔗糖、0 .7%琼脂 ,ｐＨ 6 .0。培养温度为 2 5℃ ;光照 1 2ｈ·     

共轭亚油酸对HepG2细胞脂质沉积的影响

目的:研究共轭亚油酸(conjugated linoleic acid,CLA)对HepG2细胞脂肪沉积的影响,以探讨其对肝脏脂肪沉积的可能机制.方法:体外培养HepG2细胞,不同浓度CLA(0、10、50、100 μmol.1-1)作用24小时后,100 nmol.1-1胰岛素作用1小时.以比色法测定培养液中游离脂肪酸的含量,油红O染色观察细胞脂肪沉积,Western-blot检测Akt和P-Akt蛋白表达.结果:随着CLA浓度增加,培养液中的游离脂肪酸含量显著降低,细胞中红染脂滴增多,Western-blot结果发现,Akt蛋白的磷酸化水平增高.结论:CLA可以增加细胞内脂肪合成和细胞中Akt蛋白的磷酸化水平.     

赤链华游蛇的雌性生殖输出和初生幼体特征

研究浙江舟山产赤链华游蛇窝仔数,幼体大小和雌 大小之间的关系以及初生幼体特征,产仔雌体的最小体长（SVL）为486mm,大于最小SVL的雌体均年产单窝仔,产仔期为8月30日09月30日,窝仔数与雌体SVL呈正相关,平均值为11．7,初生幼仔重与雌体SVL和窝仔数无关,窝仔数与产后雌体的状态无关,赤链华游蛇主要通过增加窝仔仔数来增加繁殖输出,初生幼仔湿重,干重,SVL和尾长平均值分别为4．37g,1.18g,171.0mm和44.mm,幼体躯干,剩余卵黄和脂肪体的干重有显著的窝间差异,偏相关分析显示,幼体躯干干重与剩余卵黄及脂肪体干重呈负相关,剩余卵黄干重与脂肪体干重无关。     

miRNA干扰口蹄疫病毒基因组早期复制的初步研究

根据miRNA的设计要求,以miR-31为模型通过软件设计出潜在的能够使3D基因沉默的特异性miRNA序列3D-1203,并以pcDNA3.1(+)质粒为载体构建能够表达成熟miRNA的重组质粒,将其转染到BHK-21细胞后感染口蹄疫病毒,研究3D-1203的miRNA的干扰作用。蚀斑实验结果显示特异性miRNA可以在早期抑制口蹄疫病毒的复制,与阳性对照相比,病毒复制效率降低53.0%。实时TaqMan荧光定量RT-PCR检测数据表明特异性miRNA干扰病毒基因组增殖的效率达66.7%。本研究证明,利用miR-31设计的特异性miRNA在病毒复制早期能够特异的干扰口蹄疫的复制。     

甘肃省国际盘羊狩猎场的管理与综合评估

甘肃省的肃北、阿克塞、马鬃山同际盘羊狩猎场已开猎运作１０年,共狩猎３３次,猎获盘羊只,其现状令人关注。本文通过对猎场的多次考究分析,确定了１０个反映猎场优劣的因子并赋值,对盘羊猎场进行了综合评估。对３个猎场现状的评估表明,猎场的综合善良好,如果在防范盗猎及管理上加大力度,猎场可望进入优级水平。文中还对猎场的资源和管理进行了研究。     

转OsMAPK4基因烟草的抗旱性研究与遗传分析

以低温处理的水稻辽盐241植株叶片总RNA为模板, 用OsMAPK4基因特异引物通过RT-PCR扩增出OsMAPK4基因, 构建了由E12启动子调控的OsMAPK4基因植物表达载体pBME12。通过农杆菌介导法将OsMAPK4基因导入烟草, 筛选获得25株转基因植株。抗旱性研究结果表明, OsMAPK4基因的超量表达提高了T1代转基因植株的抗旱性。卡那霉素抗性在T1代转基因植株中的分离情况表明, 大多数转基因株系符合单基因遗传规律。     

脊髓灰质炎病毒减毒株Sabin 3经型间嵌合在人胚肺二倍体细胞(KMB17)上的适应性研究

为筛选Sabin 3型人胚肺二倍体细胞新适应株,将原来在体外培养过程中对KMB17细胞适应较差的Sabin 3型病毒与适应较好的Sabin 1型病毒混合培养11代,经噬斑筛选81个克隆后,感染性滴度检测表明,大部分筛选的克隆感染性滴度较低,仅33号克隆滴度最高,达8．125LgCCID50／ml。经全基因序列分析发现,该克隆(Sabin 3．33)为Sabin 1型和Sabin 3型的型间嵌合株,其中5’NCR为Sabin 1型,其余区域与Sabin 3型相同。经型别鉴定为Sabin 3型,与毒力直接相关的位点5’NCR的第480位核苷酸及位于VP2的第2034位核苷酸都未发生变异,表明已初步获得一株人胚肺二倍体细胞：KMB17的新适应株。     

温度对以截形叶螨为猎物的斯氏钝绥螨生长发育的影响

测定了斯氏钝绥螨Amblyseius swirskii（Athias—Henriot）在14、17、20、23、26、29、32、35℃和RH=85％的条件下,以截形叶螨为猎物各螨态的发育历期,分析发育速率与温度的关系。结果表明,14℃不适宜斯氏钝绥螨的生长发育,存活率仅17．5％;在17～35℃之间其生长发育正常,存活率均100％,各螨态的发育历期与温度均呈负相关关系,发育历期随着温度的升高明显缩短,未成熟期总发育历期从21．36d缩至3．97d。采用线性日度模型拟合温度与发育速率的关系表明,该模型能较好地描述其发育速率在适宜温度范围内随温度升高而加快的现象。斯氏钝绥螨不同发育阶段的发育起点温度和有效积温不同,未成熟期的发育起点温度和有效积温分别为11．92℃和94．69日·度。