全文获取类型
收费全文 | 24527篇 |
免费 | 2262篇 |
国内免费 | 2778篇 |
出版年
2024年 | 28篇 |
2023年 | 335篇 |
2022年 | 549篇 |
2021年 | 1123篇 |
2020年 | 825篇 |
2019年 | 1098篇 |
2018年 | 1064篇 |
2017年 | 863篇 |
2016年 | 1130篇 |
2015年 | 1612篇 |
2014年 | 1838篇 |
2013年 | 2021篇 |
2012年 | 2411篇 |
2011年 | 2156篇 |
2010年 | 1352篇 |
2009年 | 1229篇 |
2008年 | 1426篇 |
2007年 | 1256篇 |
2006年 | 1098篇 |
2005年 | 948篇 |
2004年 | 835篇 |
2003年 | 701篇 |
2002年 | 614篇 |
2001年 | 431篇 |
2000年 | 373篇 |
1999年 | 330篇 |
1998年 | 204篇 |
1997年 | 192篇 |
1996年 | 166篇 |
1995年 | 121篇 |
1994年 | 124篇 |
1993年 | 104篇 |
1992年 | 137篇 |
1991年 | 130篇 |
1990年 | 118篇 |
1989年 | 86篇 |
1988年 | 66篇 |
1987年 | 66篇 |
1986年 | 66篇 |
1985年 | 55篇 |
1984年 | 39篇 |
1983年 | 40篇 |
1982年 | 24篇 |
1981年 | 25篇 |
1980年 | 13篇 |
1979年 | 28篇 |
1978年 | 21篇 |
1976年 | 13篇 |
1975年 | 14篇 |
1972年 | 13篇 |
排序方式: 共有10000条查询结果,搜索用时 46 毫秒
101.
102.
103.
应用MUCAP试剂快速检测沙门氏菌 总被引:5,自引:0,他引:5
报告了用4-甲基伞形酮辛酯(4-Methylumbelliferyl-caprylate, MUCAP)快速检测沙门氏菌的特异性、敏感性和实用性。经HE,DHL,SS和麦康凯琼脂平板分离的65株沙门氏菌标准菌株和48株从食品中分离的沙门氏菌,用MUCAP测试均呈阳性反应;394株非沙门氏菌中呈阳性反应的假单胞菌、气单胞菌、邻单胞菌可通过氧化酶试验与沙门氏菌区分开;与粘质沙雷氏菌的交叉反应改用加1%蔗糖的分离平板也可排除。此方法的敏感性和特异性均达到97%以上,而且操作简便、快速,数分钟内即可完成。 相似文献
104.
Isolation and expression in Escherichia coli of hepB and hepC, genes coding for the glycosaminoglycan-degrading enzymes heparinase II and heparinase III, respectively, from Flavobacterium heparinum.
下载免费PDF全文
![点击此处可从《Applied microbiology》网站下载免费的PDF全文](/ch/ext_images/free.gif)
Upon induction with heparin, Flavobacterium heparinum synthesizes and secretes into its periplasmic space heparinase I (EC 4.2.2.7), heparinase II, and heparinase III (heparitinase; EC 4.2.2.8). Heparinase I degrades heparin, and heparinase II degrades both heparin and heparan sulfate, while heparinase III degrades heparan sulfate predominantly. We isolated the genes encoding heparinases II and III (designated hepB and hepC, respectively). These genes are not contiguous with each other or with the heparinase I gene (designated hepA). hepB and hepC were found to contain open reading frames of 2,316 and 1,980 bp, respectively. Enzymatic removal of pyroglutamate groups permitted sequence analysis of the amino termini of both mature proteins. It was determined that the mature forms of heparinases II and III contain 746 and 635 amino acids, respectively, and have calculated molecular weights of 84,545 and 73,135, respectively. The preproteins have signal sequences consisting of 26 and 25 amino acids. Truncated hepB and hepC genes were used to produce active, mature heparinases II and III in the cytoplasm of Escherichia coli. When these enzymes were expressed at 37 degrees C, most of each recombinant enzyme was insoluble, and most of the heparinase III protein was degraded. When the two enzymes were expressed at 25 degrees C, they were both present predominantly in a soluble, active form. 相似文献
105.
Yeehn Yeeh Soon Suk Kang Hye Gi Chung Mun Su Chung Myong Gi Chung 《Journal of plant research》1996,109(2):161-168
Vitex rotundifolia L.f. is a woody perennial and has sexual and asexual modes of reproduction. Allozyme study was conducted on 550 plants in
13 Korean populations. The levels of genetic variability and divergence within and among populations, respectively, are considerably
lower and higher than the mean values for woody plants with similar life history tralts. Mean percentage of polymorphic loci
(P
P), mean number of alleles per locus (A
P), and mean genetic diversity (He
P) within populations ofV. rotundifolia were: 16.7%, 1.21, and 0.047. On average, about 79% of the total variation inV. rotundifolia was common to all populations (meanG
ST=0.208). In addition, significant differences in allele frequencies among populations were found in all polymorphic loci examined
(P<0.001). On the other hand, levels of genotypic diversity within and among populations were moderate. About 44% (18/41) of
multilocus genotypes were “local genotypes” (genotypes occurring in only one population), whereas only one “widespread genotype”
(genotypes occurring in more than 75% of the populations) were detected. The mean number of multilocus genotypes per population
(G) and mean genotypic diversity index (D
G) were 8.4 and 0.74, respectively. Most common multilocus genotypes found in populations were homozygous for five polymorphic
loci. The abundance of ramets of these genets is responsible for the low levels of expected heterozygosity within populations.
The results indicate that clonal reproduction may act as an enhancer of genetic drift by reducing effective size of local
populations ofV. rotundifolia. 相似文献
106.
二核苷酸重复多态性的非同位素检测及其在基因诊断中的应用 总被引:9,自引:1,他引:8
本文报道了一种检测二核苷酸重复多态性的简便的非同位素法,利用重复序列两侧的特异引物进行PCR扩增,产生的等位片段在薄层变性聚丙烯酰胺凝胶电泳上分离,再用灵敏的银染法显色。该方法不需要标记PCR产物,简便、快速,分辨率可达1bp,并可用多对引物同时进行多重PCR分析。用此方法对DMD家系成员dystrophin基因的5'-脑型外显子止游区和3'-非翻译区的两个(CA)。位点进行了扩增片段长度多态性分 相似文献
107.
利用PCR方法对单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白D(HSV-2gD)基因进行了修饰,在其5'端删去约500bp的非编码区,仅保留ATG上游7个bp。将修饰后的HSV-2gD基因插入到带有痘苗病毒天坛株TK基因区段的痘苗表达质粒pJSA1175,置于痘苗病毒P7.5k早/晚期启动子控制下。将此重组质粒用脂质体Lipofectin方法转染已受野型TK ̄+痘苗病毒天坛株感染的TK ̄-143细胞,通过同源重组机制和标志基因LacZ产物的蓝斑显色作用,以及BudR试剂对TK表型的选择压力,筛选出整合有HSV-2gD基因的重组痘苗病毒。Southem杂交表明,HSV-2gD基因已正确地插入痘苗病毒TK基因区内;间接免疫荧光检测显示,HSV-2gD蛋白已得到有效表达,且主要分布于细胞膜。重组病毒免疫家兔可产生明显的抗HSV-2gD中和抗体。用重组病毒免疫小鼠,3周后可使94%(17/18)的小鼠对抗HSV-2的致死量攻击,表明重组病毒具有明显的免疫保护作用。 相似文献
108.
酪氨酸羟化酶基因载体-pCMVTH 质粒的构建及在大鼠骨骼肌内的表达 总被引:4,自引:0,他引:4
为用转基因方法治疗巴金森氏病大鼠模型,本研究采用分子克隆技术,将合成多巴胺的关键酶-酪氨酸羟化酶(TH)的基因,克隆进入以巨细胞病毒CMV为启动子的载体质粒内,经限制性内切酶定位分析证实该重组的DNA质粒的可靠性。携带TH基因的PCMVTH质粒以LIPO-FECTIN介导,在培养的原代骨骼肌细胞中高效表达。本研究为进一步用转基因的细胞植入脑内以治疗巴金森氏病打下一定基础。 相似文献
109.
110.
Bi(Ⅲ)与金属硫蛋白作用性质研究张保林,黄辉,朱凌燕,岳晟,唐雯霞(南京大学配位化学研究所,配位化学国家重点实验室,南京210093)如何降低顺铂或其它抗癌铂的毒性,一直是癌症化疗中的重要课题之一,最近研究发现预先给大鼠或肺癌病人服用铋盐,可以极大... 相似文献