4种钙素调节剂对紫花擎天凤梨花芽分化及内源激素含量的影响

以组培苗移栽2年的紫花擎天凤梨为试材,研究了外源乙烯催花条件下4种钙素调节剂(A23187、W-7、TFP、EGTA)处理对其花芽分化及内源激素含量的影响.结果表明:(1)4种处理均能使花芽分化过程中生长素(IAA)、玉米素(ZR)含量不同程度增加,并以A23187处理的IAA、ZR含量增加幅度最大.(2)赤霉酸(GA3)和脱落酸(ABA)含量在花芽孕育阶段先后下降至低谷,在花芽形态分化期又先后上升并出现高峰;ABA含量在A23187处理中下降早于其他处理,于处理3 d时首先降到最低,而在EGTA处理中下降速度最慢,至处理5 d时才降到最低值;在花芽孕育阶段,处理A23187的GA3含量下降最慢,但整体下降幅度最大;在此后花芽发端期各处理的GA3含量均出现高峰,但A23187和乙烯处理上升幅度均高于其他3个处理.(3)(ZR+ABA)/GA3、(ZR+IAA)/GA3比值在花芽孕育阶段上升并出现高峰,在花芽形态分化期下降到低谷.(4)4种处理花芽分化完成时间不一致,紫花擎天凤梨花芽分化在Ca2+促进剂A23187处理下提前,分化时间缩短;而在钙离子专一性螯合剂EGTA、钙调素(CaM)拮抗剂W-7和TFP处理下均得到延缓或抑制.研究发现,Ca2+-CaM信号系统参与了乙烯诱导的紫花擎天凤梨花芽分化过程且起着重要的调控作用.     

EGFP—pBABE逆转录病毒载体的构建及鉴定

目的构建表达增强绿色荧光蛋白（enhancedgreenfluorescentprotein,EGFP）的EGFP—pBABE逆转录病毒载体并对其表达进行鉴定。方法从pEGFP—N3质粒上切下EGFP片段,连接到pBABE载体,构建EGFP—pBABE重组质粒;将该重组质粒转染到Fr67细胞后,荧光显微镜下观察EGFP的表达;收集逆转录病毒感染宫颈癌SiHa细胞后荧光显微镜下观察EGFP的表达。结果成功构建EGFP—pBABE重组质粒。该质粒转染PT67细胞24h后,荧光显微镜下可观察到EGFP的表达;用该重组质粒包装的逆转录病毒感染宫颈癌SiHa细胞36h后,在荧光显微镜下可观察到明显的EGFP表达。结论成功构建表达EGFP的EGFP—pBABE逆转录病毒载体,为进一步利用该载体制备逆转录病毒并观测逆转录病毒感染细胞的效率奠定了良好的实验基础。     

乙型肝炎病毒核心启动子下游克隆入Teto序列后其在不同细胞系中转录活性的变化

目的:探讨将Teto序列克隆入乙型肝炎病毒核心启动子(Cp)下游后对该启动子在不同细胞系中转录活性的影响。方法:利用PCR从质粒pTL-8中扩增7个Teto序列,并将其克隆入T载体pMD19-T/Simple中,测序正确后将7个Teto序列亚克隆入pGL3-Basic/Cp萤光素酶报告基因质粒中Cp启动子的下游,以构建质粒pGL3-Basic/Cp/x7t。将能表达TetR的质粒pTL-8的萤光素酶编码基因切除后,与pGL3-Basic/Cp/x7t共转染肝癌细胞系HepG2、宫颈癌细胞系HeLa、绿猴肾细胞系COS-7、乳腺癌细胞系MDA-MB-231和结肠癌细胞系HT-29,通过双萤光素酶检测系统检测萤光素酶在这些不同细胞系中的活性,以分析将Teto序列克隆入乙型肝炎病毒核心启动子下游后对Cp在不同细胞系中转录活性的影响。结果:构建了质粒pGL3-Basic/Cp/x7t,将其转染HeLa、COS-7、HepG2、MDA-MB-231和HT-29细胞后其相对萤光素酶活性分别为56.14、171.52、211.03、6.11和34.24。结论:将Teto序列克隆入Cp下游并不能明显提高Cp的转录活性,而且破坏了Cp的组织特异性转录活性。     

阿奇霉素联合痰热清治疗小儿肺炎支原体肺炎疗效观察

目的:探讨阿奇霉素联合痰热清治疗小儿肺炎支原体肺炎(mycoplasma pneumoniae pneumonia,MPP)的临床疗效.方法:124例MPP患儿随机分为对照组(56例)与治疗组(68例),其中对照组给予阿奇霉素序贯治疗,治疗组则在此基础上另外给予痰热清治疗.采用双抗体夹心ELISA法、免疫比浊法分别检测治疗前后所有MPP患儿血清CRP、IL-6与TNF-α含量.同时观察比较两组临床疗效、症状体征及不良反应情况.结果:①经治疗所有患儿血清CRP、IL-6与TNF-α浓度均明显下降(P<0.01),治疗组与对照组间差异无统计学意义(P0.05).②治疗组总有效率为97.06%,显著高于对照组83.93%的总有效率(P<0.05).③治疗组退热时间,咳嗽和肺啰音消失时间均显著短于对照组(P<0.05).④治疗组不良反应发生率明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:痰热清联合阿奇霉素序贯疗法治疗小儿MPP安全有效,值得进一步推广.     

拟南芥雄性不育突变体ms1502的遗传及定位分析

通过EMS诱变、背景纯化与遗传分析,从拟南芥（Arabidopsis thaliana）中筛选到了一棵隐性单基因控制的雄性不育突变体ms1502。细胞学观察发现,突变体在小孢子从四分体释放出后花药绒毡层过早衰亡,小孢子的内容物不正常地凝聚,最终无法形成正常的花粉粒。利用图位克隆的方法对该基因MSl502进行了定位,结果表明MS1502位于第4条染色体上分子标记F25124和T12H20之间105kb区间内。目前该区间内尚未见到花药发育必需基因（不育基因）的报道,因此MS1502是一个控制花粉发育的新基因。     

旱生香茶菜二萜化合物细胞毒活性的三维构效研究

应用比较分子力场法（COMFA）研究了一系列旱生香茶菜二萜化合物对人红细胞白血病（K562）、人旱幼粒白血病（HL-60）、人胃腺癌（MKN-28）和人结肠癌（HCT）细胞体外抗肿瘤活性进行了三维定量构效关系的初步研究,其结果将为香条菜二萜的结构修饰和简化,先导化合物的发现提供理论依据。     

芒果DNA提取方法比较及ISSR反应体系的优化

为从芒果幼叶中提取高质量的核总DNA,比较了5种DNA提取方法提取芒果叶片核DNA的效果,结果表明:改良CTAB法1提取的DNA A260/A280值最好,ISSR-PCR扩增效果最佳,是有效提取芒果基因组DNA的方法。为得到最佳的芒果ISSR-PCR反应体系,以(ATG)6为引物,采用单因素实验法,优化了ISSR-PCR反应体系:在总体积25μl的反应体系中,含1×反应缓冲液,0.20mmol.L-1dNTPs,0.20μmol.L-1引物,0.60 UTaqDNA聚合酶,30-50 ng DNA模板,不足体积用无菌超纯水补足。     

柑橘体细胞杂种有性后代的创造及杂种鉴定

以异源四倍体柑橘体细胞杂种[哈姆林甜橙(Citrus sinensis Osbeck) 粗柠檬(C.jambhiri Luss)]为父本与二倍体单胚类型宜本杂4号[华农本地早橘(C.reticulata Blanco)×宜昌橙(C.ichangen- sis Swingle)]杂交,采用胚抢救技术获得了110株有性后代植株,通过染色体计数及倍性分析仪鉴定,其中93株植株为3倍体,余下的17林植株为2倍体。RAPD分析表明:获得的有性后代植株均为杂种。     

日本血吸虫新抗原基因的筛选、克隆、 表达和免疫效果研究

为了寻找日本血吸虫 (Schistosoma japonicum, Sj) 新的疫苗候选基因并进行免疫效果研究,用 Sj 雌虫抗原免疫家兔制备血清,对Sj成虫 cDNA 文库进行免疫筛选,将获得的新基因 ( 命名为Sj-F1, GenBank 登录号为 AY261995) 克隆入原核表达载体 pTWIN1 和真核表达载体 pcDNA3 ,经 PCR 、限制性酶切筛选和鉴定阳性重组子. 将 pTWIN1/Sj-F1 质粒转化大肠杆菌 ER2566,在低温和低 IPTG 浓度下诱导表达可溶性重组融合蛋白 (rSj-F1/intein2),并经 SDS- 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE) 和蛋白质印迹 (Western blot) 分析鉴定. 将 pcDNA3/Sj-F1 质粒转化大肠杆菌 ER2502 ,大量制备 DNA 疫苗. 用重组融合蛋白和 DNA 疫苗免疫小鼠,末次免疫后 2 周用Sj尾蚴进行攻击感染. 感染后 42 天剖杀冲虫,计算减虫率和减卵率. 感染前采血用 ELISA 法检测抗体. 免疫保护效果测定显示：重组蛋白疫苗以 FCA 作佐剂经皮下免疫和以壳聚糖作佐剂经粘膜免疫分别获得了 28.07%、 24.69% 的减虫率和 48.30% 、 46.38% 的减卵率; DNA 疫苗 (pcDNA3/Sj-F1) 单独免疫获得了 18.47% 的减虫率和 35.06% 的减卵率;用 DNA 疫苗启动免疫后用重组蛋白疫苗经皮下加强免疫,减虫率和减卵率分别提高到了 40.42% 和 56.17%;用 DNA 疫苗启动免疫后用重组蛋白疫苗经黏膜加强免疫,减虫率和减卵率增高更明显,分别提高到了 42.38% 和 62.87%. 结果表明,Sj-F1 重组蛋白疫苗及 DNA 疫苗均可诱导小鼠产生部分抗血吸虫感染的保护力,两者联合免疫保护效果优于单一疫苗.     

美容整形受术者心理研究进展

本文综述了美容整形受术者心理分析及异常心理类型。以及产生异常心理的影响因素。同时也阐述了美容整形受术者心理状态的量化评估和心理防治等方面的研究进展。