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61.
Deletion mapping of the rotavirus metalloprotein NS53 (NSP1): the conserved cysteine-rich region is essential for virus-specific RNA binding. 总被引:9,自引:7,他引:2
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NS53 (NSP1), the gene 5 product of the group A rotaviruses, is a minor nonstructural protein of 486 to 495 amino acids which binds zinc and contains an amino-terminal highly conserved cysteine-rich region that may form one or two zinc fingers. To study the structure-function of the gene 5 product, wild-type and mutant forms of NS53 were produced by using a recombinant baculovirus expression system and a recombinant vaccinia virus/T7 (vTF7-3) expression system. Analysis of the RNA-binding activity of the wild-type NS53 immobilized onto protein A-Sepharose beads with NS53-specific antiserum showed that the protein exhibited specific affinity for all 11 rotavirus mRNAs. The use of short virus-specific RNA probes indicated that NS53 specifically recognizes an element located near the 5' ends of viral mRNAs. Analysis of the RNA-binding activity of deletion mutants of NS53 showed that the RNA-binding domain resides within the first 81 amino acids of the protein and that the highly conserved cysteine-rich region within this region of the protein is essential for the activity. Gel electrophoresis and Western immunoblot analyses of intracellular fractions derived from infected cells revealed that large amounts of NS53 were present in the cytosol and in association with the cytoskeletal matrix. Indirect immunofluorescence analysis of cells programmed to transiently express mutant forms of NS53 using vTF7-3 indicated that the intracellular localization domain resides between amino acids 84 and 176 of NS53. Together, these data show that the RNA-binding domain and the intracellular localization domain lie upstream from the region of NS53 previously determined not to be essential for replication of rotaviruses in cell culture (J. Hua and J. T. Patton, Virology 198:567-576, 1994). 相似文献
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马蹄香大小孢子发生及雌雄配子体形成 总被引:1,自引:0,他引:1
马蹄香(Sarumahenryi,Oliv.)花药壁的发育属双子叶型。花粉母细胞减数分裂为同时型,四分体主要为四面体形,少数为左右对称式排列。腺质绒毡层,其细胞可排列为不规则的两层,双核或多核。到单细胞花粉阶段,绒毡层细胞内切向壁上出现许多乌氏体。成熟花粉为2细胞型,圆球状,具单萌发沟。雌蕊6心皮,上部彼此分离、下部联合。倒生胚珠,双珠被,厚球心。胚囊发育蓼型。成熟胚囊为七细胞结构,但两个助细胞退化较早。 相似文献
65.
66.
细胞间粘附分子1的研究进展 总被引:11,自引:0,他引:11
细胞间粘附分子1(ICAM-1),又名CD54,是一种重要的细胞表面粘附分子,属免疫球蛋白超家族.它可与鼻病毒以及整合素家族成员结合,参与炎症,普通感冒,变态反应及移植排斥反应.文章就其细胞分布、表达调节、结构功能、基因工程以及临床应用进行了综述. 相似文献
67.
研究了优雅粘囊藻藻胆体(PBS)的特性。从聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)、吸收光谱和二阶导数图谱可证明,它的PBS含有一种红色藻胆蛋白,两种C-藻蓝蛋白和三种别藻蓝蛋白。但是,用PAGE和羟基磷灰石柱层析分离和纯化所得藻胆蛋白,一般仅得到一种C-PC和一种亚基组成特殊的别藻蓝蛋白APC。这种APC吸收光谱和荧光发射相同于已报告的AFC660nm。但是它的亚基组成是(αα′ββ′)2而不是(α′α2β2β′)Lc10或(αβ)3。 相似文献
68.
69.
HUIQUAN ZHAO YANG ZHAO JAMES J. NORDLUND RAYMOND E. BOISSY 《Pigment cell & melanoma research》1994,7(3):131-140
Human TRP-1 has been immunopurified from normal human melanocytes cultured from black neonatal subjects and used to investigate the catalytic function of TRP-1 for the two substrates, L-tyrosine and L-DOPA. Immunopurified TRP-1 did not demonstrate DOPA staining on SDS/PAGE nor DOPA oxidase (DO) activity with either routine or modified assays. The purified TRP-1 also demonstrated no tyrosine hydroxylase (TH) activity using the routine Pomerantz assay. However, there was apparent TH activity exhibited by immunopurified TRP-1 under conditions with low tyrosine concentration (≤0.8 μCi/ml of 3H-tyrosine), prolonged incubation time (i.e., overnight) and in the absence of the cofactor L-DOPA. Using these latter specific conditions, TH activity was also detected in cell lysates from a tyrosinase-negative albino melanocyte line which exhibited no TH activity with the routine Pomerantz assay. In addition, TH activity under low substrate assay conditions was not exhibited in a melanocyte line derived from a TRP-1 deficient, Brown albino individual. However, the absence of TH in this Brown albino cell line could be compensated for by the addition of L-DOPA to the assay. These results suggested that TRP-1 has some tyrosine hydroxylase but no DOPA oxidase activity. We propose that one function of TRP-1 is to modulate tyrosinase activity by making DOPA available as a cofactor to perpetuate the initial steps in melanogenesis. 相似文献
70.
用吸收光谱和圆二色谱的方法研究了蜂毒素与嗜血菌紫膜的相互作用机理.通过与三种在结构和电荷上不同的表面活性剂与紫膜的作用相比较,可以年出蜂毒作为带正电荷的分子与同样带正电的表面活性剂DTAB在引起紫膜凝聚方面表现相同;但在对紫膜可见光区的吸收光谱和圆二色谱的影响上却与具有刚性结构的CHAPS相似,表明蜂毒可在紫膜表面以一种刚性较大的构象(如α螺旋)存在,不能进入膜蛋白流水区的深层.另外,从紫膜-Triton-蜂毒混合作用体系的研究中得到如下推测:蜂毒与Triton竞争菌紫质分子周围的结合位点,可排斥位于菌紫质周围的Triton分子.表明蜂毒具有比Triton更强的与菌紫质的亲和力,从而提供了支持蜂毒分子存在与膜蛋白-菌紫质的直接相互作用的有力证据. 相似文献