t-PA昆虫细胞表达及特性分析

应用RT-PCR技术,从人黑色素瘤Bowes细胞株中扩增出人组织型纤溶酶原激活剂(tissue-typeplasminogenactivator,t-PA)cDNA。序列分析证实,与国外的报道完全一致。将含完整阅读框架的人t-PAcDNA克隆至昆虫细胞表达转移载体pBacPAK8中,获得重组质粒pBac-tPA。应用脂质体共转染法,将pBactPA和线性化杆状病毒BacPAK6DNA共转染Tn-5B-1昆虫细胞。经空斑筛选获得11株重组病毒。经PCR鉴定与生物活性测定,获得一株高效表达t-PA的重组病毒BactPA3。在含胎牛血清的培养基中,t-PA表达活性在感染(MOI≈10)后72h左右达到最高,为3.04×103IU／ml,即相当于1.8×104IU／106细胞;在无血清培养基中,t-PA最高表达水平相差不大,但时间为感染后132h左右。经SDS-PAGE纤维蛋白自显影分析,分子量为68kda左右。与从人黑色素瘤细胞培养液中提纯的天然t-PA相比,其受纤维蛋白原激活的特性、和纤维蛋白的亲和力及在血浆中的失活速率基本相同。表达的t-PA在血液循环中的半衰期为7min。     

评价植物悬浮细胞培养物两项测定指标的建立

由于在细胞培养研究中缺乏一些可操作性强的且定量化的细胞状态评价指标,人们对植物细胞状态的有些性状的评价只能停留在定性描述水平,如对悬浮细胞培养物褐化程度的评价仅能作出定性判断。这里我们提出了两项悬浮细胞培养物细胞状态评价指标。     

八字地老虎核型多角体病毒对宿主的弱化作用

八字地老虎核型多角体病毒(Amathes c-nigrum nucleopolyhedrovirus,简称AnNPV)接种八字地老虎3龄初幼虫,感染3d-6d,体重明显小于对照幼虫,发育历期显著延长,幼虫蜕皮和化蛹严重受阻.4龄幼虫感染病毒后1-2天取食量未减少,从第3天开始食量显著减少,从感染至第6天,单头幼虫总取食量为696.1mg,比对照幼虫总取食量的1313.2mg减少47.0%.     

氯氟氰菊酯与阿维菌素增效混配制剂对美洲斑潜蝇的防治效果

低毒化学杀虫剂氯氟氰菊酯与生物源农药阿维菌素混配,通过其对美洲斑潜蝇室内毒力实验,测定共毒系数CTC为161～232,处于明显增效范围内。据此确定最佳配比,配制此增效混剂2%渗透型可湿性粉剂。在北京、山东两地防治美洲斑潜蝇幼虫的田间试验表明药效优良,制剂用量50 g/667m²药后3、7、11天两地区校正防效分别为85.26%～90.76%和86.74%～94.02%,制剂用量25g/667m2两地区相应防效分别为75.28%～85.17%、79.96%～88.68%。该增效混剂防治斑潜蝇速效性和持效性皆佳,成本有所下降,使用可湿粉与乳油相比较,可减少投放入环境的化学品数量,以减少环境污染。     

矮牵牛花药培养及植株再生研究

采用花粉发育双核期的矮牵牛花药,研究不同浓度植物生长调节剂配比及不同浓度蔗糖和麦芽糖对花药诱导率的影响。结果表明,采用6-BA和IBA组合诱导效果较好;NH+6-BA 1.5mg/L+IBA 1.5mg/L花药诱导率较高;麦芽糖诱导效果明显比蔗糖好。     

鳞皮鳞木Lepidodendron lepidophloides Yao叶座的解剖构造

描述了贵州水城矿区汪家寨组(晚二叠世晚期)煤核中一种脱落的具解剖构造的鳞木类叶座.这些叶座在大小和形态上与鳞皮鳞木(Lepidodendron lepidophloides Yao)很相似,很可能属于同一种植物的不同保存类型的叶座.将鳞皮鳞木与已知几个鳞木类植物叶座属,如鳞木属、鳞皮木属、封印木属和华夏木属进行了对比,认为鳞皮鳞木具有这几个属的混合特征,将其归入上述任何一属似乎都不太妥当.该类植物有可能代表了一个新属.由于茎的其他部分构造不明以及这些叶座与生殖构造的联系目前尚不清楚,因此,本文暂时采用鳞皮鳞木这一种名,其确切归属留待对其茎的其他部分的解剖构造以及与生殖器官之间的联系都清楚了以后再行决定.首次较详细地报道华夏植物区鳞木类植物叶座的解剖构造.     

抗性库蚊酯酶基因在大肠杆菌中的克隆和表达

用抗性库蚊酯酶基因,引入原核表达载体pRL439,转化大肠杆菌HB101细胞,获得表达。通过酶切、Southern杂交鉴定重组质粒。研究了重组菌酯酶的活性,重组质粒pRLB1表达的酯酶具有高酶活并能高效降解酯酶的特异性底物α乙酸萘酯(αNA)和β乙酸萘酯(βNA);经对重组菌进行细胞固定化后降解农药三氯杀虫酯(7504),反应时间短,降解效率高     

干旱与条锈病复合胁迫对小麦的生理影响

以抗旱性和抗病性不同的小麦为材料,以正常生长为对照,观察了病原菌和水分复合胁迫对小麦叶片相对含水量、活性氧代谢以及对抗氰呼吸的发生、运行的影响。讨论了在干旱与病原菌侵染复合胁迫下,抗氰呼吸在植物抗逆机制中所扮演的角色。复合胁迫下,抗病小麦显然具备更强的水分调控能力,而感病品种不能有效控制病叶水分散失。水分胁迫能引起抗氰呼吸的下降,但不能抵消因病原菌侵染引起的抗氰呼吸的增强,条锈菌侵染对小麦抗氰呼吸的影响远远大于水分胁迫。病原菌侵染和水分复合胁迫下,活性氧产生的速率表现出累加效应,而抗氰呼吸表现出和基质抗氧化酶的活性互补。植物交替氧化酶在干旱与病原菌侵染复合胁迫中具有重要的抗氧化功能,并可能调节着逆境下物质与能量需求间的矛盾。