Synthesis and biological evaluation of irreversible EGFR tyrosine kinase inhibitors containing pyrido[3,4-d]pyrimidine scaffold

In the present study, a new class of compounds containing pyrido[3,4-d]pyrimidine scaffold with an acrylamide moiety was designed as irreversible EGFR-TKIs to overcome acquired EGFR-T790M resistance. The most promising compound 25h inhibited HCC827 and H1975 cells growth with the IC₅₀ values of 0.025?μM and 0.49?μM, respectively. Meanwhile, 25h displayed potent inhibitory activity against the EGFR^L858R (IC₅₀?=?1.7?nM) and EGFR^L858R/T790M (IC₅₀?=?23.3?nM). 25h could suppress EGFR phosphorylation in HCC827 and H1975 cell lines and significantly induce the apoptosis of HCC827 cells. Additionally, compound 25h could remarkably inhibit cancer growth in established HCC827 xenograft mouse model at 50?mg/kg in vivo. These results indicated that the 2,4-disubstituted 6-(5-substituted pyridin-2-amino)pyrido[3,4-d]pyrimidine derivatives can serve as effective EGFR inhibitors and potent anticancer agents.     

灵昆岛东滩潮间带大型底栖动物功能群及营养等级构成

2003年11月至2004年8月,在温州湾的灵昆岛东滩针对大型底栖动物群落进行了取样调查,利用调查数据进行功能群和营养等级构成研究。共得到大型底栖动物33种,隶属7门8纲21科,主要为软体动物、节肢动物甲壳类和环节动物多毛类。其中,高潮带25种,中潮带30种,低潮带14种。Margalef物种丰富度指数和Shannon—Weiner多样性指数均表现为：高潮带〉中潮带〉低潮带;Pielou均匀度指数和Simpson优势度指数表现为：高潮带〈中潮带〈低潮带。定性取样得到的浮游生物食者4种,植食者12种,肉食者8种,杂食者7种,碎屑食者2种,定量取样得到的分别为：3,8,5,3种和2种。定量取样获得数据中各个功能群种类数和密度季节间差异均不显著,不考虑季节变化因素肉食者和植食者密度在潮带间存在差异,杂食者和植食者种类数在潮带间存在差异,其他功能群密度和种类数数据在潮带间的差异不显著。研究显示了功能群的生境梯度变化,高潮带主导的功能群为肉食者,植食者和浮游生物食者;中潮带主导的功能群为肉食者和浮游生物食者;低潮带主导的功能群为肉食者,这些变化反映了不同潮带营养等级构成和食物来源的差异,由于生境中能提供的植物沿着高潮带,中潮带和低潮带方向递减,至低潮带未发现植食者;且由于中潮带的生境最为复杂,其功能群的构成也最为复杂;3个潮带的碎屑食者数量比较稳定。大型底栖动物群落与其食物来源一起共有4个营养等级,其中大型底栖动物占据了第2、3、4级,第1级主要碎屑、浮游生物和植物,第2级包括了碎屑食者、浮游生物食者和植食者,第3级主要是杂食者,第4级是肉食者,各个营养级、食物来源之间构成一张复杂的食物网。     

黑麂（Muntiacus crinifrons）3个种群的遗传多样性

黑麂,为我国特有动物,被公认为目前世界上最珍稀的鹿科动物之一.为了更好地保护黑麂这一珍稀的濒危野生动物,基于黑麂线粒体控制区序列对遂昌分布中心的3个黑麂种群的遗传多样性和基因流进行了研究.结果显示,3个种群的36个个体中有13个变异位点,占分析序列长度的2.71%,且这13个变异位点皆为碱基置换,并未出现碱基插入或缺失的现象,并由此定义了12个单倍型.遗传多样性检测结果显示遂昌种群具有最高的遗传多样性,应予以优先保护.从Tajima′s D和Fu and Li′s D值的估算结果来看,这3个黑麂种群相对于中性进化的歧异度并没有明显的偏离(P＞0.1),没有明显的证据显示这3个黑麂种群间存在很强的平衡选择.3个种群间基因流 Nm均大于1,这3个黑麂种群间存在着较为丰富的基因流.3个黑麂种群单倍型间的序列差异为0.009,这表明这3个黑麂种群的单倍型未出现分化.     

亚洲玉米螟神经肽羽化激素基因cDNA的克隆及组织表达

羽化激素对调节昆虫的蜕皮和发育起关键作用。亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis是亚洲农业重要害虫之一,本实验研究了亚洲玉米螟羽化激素基因cDNA的分子结构和表达模式。利用兼并性引物RT-PCR技术,克隆了亚洲玉米螟羽化激素基因cDNA的中间片段,然后再用RACE方法,获得羽化激素基因的 cDNA全长序列。结果表明： 亚洲玉米螟羽化激素基因cDNA全长986 bp（GenBank登录号： DQ668369）,开放阅读框为267 bp,编码88个氨基酸的前体蛋白,其中包括前26个氨基酸组成的信号肽和62个氨基酸的成熟肽。亚洲玉米螟羽化激素基因与烟草天蛾、棉铃虫和家蚕已报道同源基因的同源性较高,分别为79.5%、77.3%和67.0%,与黑腹果蝇同源基因的同源性最低,仅45.5%。亚洲玉米螟羽化激素基因mRNA只在脑中表达,在咽下神经节、胸神经节、腹神经节等神经组织中检测不到,在非神经组织如中肠、脂肪体和表皮中也不表达。     

黑麂皖-浙分布中心种群的遗传多样性

本文基于黑麂线粒体控制区序列对皖浙分布中心的4个黑麂种群的遗传多样性和基因流进行了研究。结果显示:4个种群的33个个体中有14个变异位点,占分析序列长度的2·91 %,并由此定义了12个单倍型;遗传多样性检测结果显示4个种群中开化种群具有最高的遗传多样性,应予以优先保护;4个种群间尚存在着一定的基因流,但存在可能由于遗传漂变而产生分化的危险。从Tajima’s D和Fu and Li’s D值的估算结果来看,这4个黑麂种群相对于中性进化的歧异度并没有明显的偏离,具有较为稳定的种群结构(P>0·1),没有明显的证据显示这4个黑麂种群间存在很强的平衡选择。     

4种金龟甲的寄主偏好性及对不同植物挥发物的EAG反应

为了揭示华北大黑鳃金龟、暗黑鳃金龟、小黄鳃金龟和福婆鳃金龟对不同植物的寄主偏好性,本研究调查了四种金龟甲在6种寄主植物桃树、梨树、榆树、山楂、丁香和金银木上的发生情况。同时采用动态顶空吸附法收集7种植物挥发物,利用触角电位EAG技术,测定四种金龟甲雌、雄虫对不同寄主植物玉兰、柿树、金银木、榆树、芙蓉葵、丁香及非寄主植物银杏的挥发物的EAG反应。结果显示,金龟甲对不同寄主植物的偏好性有显著差异,华北大黑鳃金龟的偏好寄主为梨树,暗黑鳃金龟的偏好寄主为榆树、山楂和梨树,而小黄鳃金龟和福婆鳃金龟的偏好寄主均为丁香。四种金龟甲均对其共同寄主植物榆树挥发物的EAG反应最大,另外,小黄鳃金龟和福婆鳃金龟对丁香挥发物也有较大的EAG反应。对同一植物挥发物,华北大黑鳃金龟雌虫对部分植物挥发物的EAG反应比雄虫大;而其它3种鳃金龟雌、雄虫对所测试的植物挥发物的EAG反应均无显著性差异。上述结果说明金龟甲EAG反应的大小与其寄主偏好性一致。     

Association of TRIMCyp and TRIM5α from assam macaques leads to a functional trade-off between HIV-1 and N-MLV inhibition

TRIM5α restricts retroviruses in a species-specific manner. Cyclophilin A was independently retrotransposed into the TRIM5 loci in different species, leading to the generation of antiviral TRIM5-cyclophilin A(TRIMCyp) proteins. Previously, we found that assam macaques express a TRIMCyp chimera(am TRIMCyp), along with a TRIM5α allelic protein(am TRIM5α). Herein,we investigated the antiviral activity of am TRIMCyp and am TRIM5α individually, as well as their interaction and joint effects.am TRIMCyp showed a divergent restriction pattern from am TRIM5α. Although both proteins potently restricted the replication of HIV-1, only am TRIM5α inhibited N-MLV. Remarkably, cellular anti-HIV-1 activity increased when am TRIMCyp and am TRIM5α were coexpressed, indicating a synergistic block of HIV-1 replication. Consistently, PMBCs from heterozygous am TRIM5α/TRIMCyp showed stronger resistance to HIV-1 infection than those from am TRIM5α/TRIM5α homozygotes. The anti-HIV-1 synergistic effect was dependent on the am TRIMCyp-am TRIM5α interaction. In contrast, am TRIMCyp completely abrogated the anti-N-MLVactivity mediated by am TRIM5α, showing a dominant-negative effect, indicating that the generation of am TRIMCyp was involved in the trade-off between divergent restriction activities. Our results provide a new paradigm to study functional trade-offs mediated by allelic proteins, a theoretical basis for utilizing animal models with various TRIM5 alleles, as well as novel HIV-1 gene therapy strategies.     

柱型苹果突变体叶片解剖结构及光合特性观察

柱型苹果因其显著特征是果树省力化栽培树型品种选育的珍贵资源。本文以4组柱型苹果突变体为试材,对其叶片解剖结构及光合特性的相关参数进行了观察和测定,结果表明,柱型苹果叶片颜色浓绿,叶片较大,其重量、厚度、叶绿素含量(SPAD)、栅栏组织厚度和栅海比均显著大于普通型苹果。普通型苹果叶片中每层栅栏组织细胞大小一致,且排列整齐紧密,而柱型苹果栅栏组织细胞排列相对杂乱。在一天的光合日变化中,柱型和普通型苹果的净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)均高于普通型苹果,二者均呈明显的双峰曲线,12:00出现明显的光合午休现象。在固定LED光源下,柱型苹果净光合速率(Pn)高于普通型,分别是普通型的1.1~1.3倍。柱型苹果荧光参数值(Fv/Fm)均低于普通型苹果,表明柱型苹果在转化光合产物过程中以荧光形式散失的能量少,有助于光合产物的积累,利于早果和丰产。