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Tianli Zou Junhua Deng Xiangdong Li Shiyin Zhang Lingyan Chen Liying Hao Jinshan Zhuang Heng Wang Guihong Zhang Shengxiang Ge Kegong Tian 《中国病毒学》2022,37(3):462-464
Highlights
1. A probe-based insulated isothermal PCR (iiPCR) assay was developed for rapid and onsite detection of ASFV.
2. The developed iiPCR showed similar sensitivity and specificity with OIE recommended real-time PCR.
3. Blood samples could be directly applied as PCR template in iiPCR without DNA extraction. 相似文献
1. A probe-based insulated isothermal PCR (iiPCR) assay was developed for rapid and onsite detection of ASFV.
2. The developed iiPCR showed similar sensitivity and specificity with OIE recommended real-time PCR.
3. Blood samples could be directly applied as PCR template in iiPCR without DNA extraction. 相似文献
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干酪乳杆菌L-乳酸脱氢酶在大肠杆菌中的表达、纯化及酶学性质 总被引:1,自引:0,他引:1
L-乳酸脱氢酶(L-lactate dehydrogenase,L-LDH)是发酵生产L-乳酸中催化丙酮酸转化成L-乳酸的关键酶。以干酪乳杆菌G-02(Lactobacillus casei G-02)基因组DNA为模板,克隆得到L-LDH基因(ldhL),经序列分析后将其连接到表达载体pET-28a(+)上,构建成重组质粒pET-ldhL转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,实现ldhL基因的表达。30°C加入IPTG诱导表达后,经镍柱亲和层析纯化的重组蛋白样品通过SDS-PAGE分析,约在40 kD处出现显著的特异性条带。对表达的L-LDH生物学特异性研究显示:重组L-LDH的比酶活为1 722 U/mg,最适反应温度为40°C-45°C;果糖-1,6-二磷酸(FBP)为别构激活剂,使最适pH向中性方向偏移(pH为6.6-6.8),Mn2+可拓宽最适酶活pH范围;Mn2+、Ca2+和Mg2+对L-LDH有激活作用,而Zn2+对L-LDH有抑制作用。 相似文献
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Characterization and expression of the plasmid-borne bedD gene from Pseudomonas putida ML2, which codes for a NAD+-dependent cis-benzene dihydrodiol dehydrogenase.
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The catabolic plasmid pHMT112 in Pseudomonas putida ML2 contains the bed gene cluster encoding benzene dioxygenase (bedC1C2BA) and a NAD+-dependent dehydrogenase (bedD) required to convert benzene into catechol. Analysis of the nucleotide sequence upstream of the benzene dioxygenase gene cluster (bedC1C2BA) revealed a 1,098-bp open reading frame (bedD) flanked by two 42-bp direct repeats, each containing a 14-bp sequence identical to the inverted repeat of IS26. In vitro translation analysis showed bedD to code for a polypeptide of ca. 39 kDa. Both the nucleotide and the deduced amino acid sequences show significant identity to sequences of glycerol dehydrogenases from Escherichia coli, Citrobacter freundii, and Bacillus stearothermophilus. A bedD mutant of P. putida ML2 in which the gene was disrupted by a kanamycin resistance cassette was unable to utilize benzene for growth. The bedD gene product was found to complement the todD mutation in P. putida 39/D, the latter defective in the analogous cis-toluene dihydrodiol dehydrogenase. The dehydrogenase encoded by bedD) was overexpressed in Escherichia coli and purified. It was found to utilize NAD+ as an electron acceptor and exhibited higher substrate specificity for cis-benzene dihydrodiol and 1,2-propanediol compared with glycerol. Such a medium-chain dehydrogenase is the first to be reported for a Pseudomonas species, and its association with an aromatic ring-hydroxylating dioxygenase is unique among bacterial species capable of metabolizing aromatic hydrocarbons. 相似文献
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铝对水稻幼苗的生理影响 总被引:15,自引:0,他引:15
以水稻幼苗为材料研究了铝的植物毒性。将不同浓度的 AlCl 加入培养液,对幼苗处理30天。10ppm 以上的铝明显抑制水稻幼苗根和地上部分的生长。5.0ppm 以上铝可引起毒害症状。铝对根的毒害作用大于对地上部分的作用。铝主要积累在根部,少部分转移到地上部分。5.0ppm 以上的铝对叶绿体 Hill 反应和光合磷酸化作用以及根线粒体呼吸和氧化磷酸化作用均有较明显抑制作用。钙对铝的此种抑制作用有一定拮抗作用。 相似文献
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甲壳素脱乙酰酶(chitin deacetylase,CDA,E.C.3.5.1.41)是一种能催化脱去甲壳素分子中N-乙酰葡糖胺链上的乙酰基,使之变成壳聚糖的酶。而壳聚糖因其独特的性质被广泛应用于医药、食品、化工、化妆品等行业。对CDA的来源、分离纯化和酶学性质、结构和催化机制、基因的克隆表达及应用前景等方面的研究进行了综述,并分析出今后的主要研究方向应在CDA基因的克隆表达、CDA底物的改造及CDA的结构和催化机制等方面。 相似文献
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