一种利用Cre/loxP系统进行标记基因删除与靶基因置换的细胞模型研究

Cre/lox系统可以介导DNA的定点插入和定点删除,可利用其实现转基因动物中"友好位点"的重复利用及标记基因的有效删除.为直观地评估该系统介导的以上两种重组反应的效果,通过标记基因并利用大鼠乳腺癌细胞系SHZ-88进行了模型研究.首先构建了两个载体:a.整合载体pTE-lox2272-DsRed-loxP-GFP-loxP,含有红色荧光标记基因DsRed和绿色荧光标记基因GFP;b.置换载体pT-lox2272-neo-loxP,含有筛选标记基因neo,用以置换DsRed基因.然后,用整合载体转染SHZ-88细胞,并随机挑取了3个同时表达DsRed和GFP的稳定整合细胞克隆.随后用置换载体和Cre表达载体PBS185对以上每个克隆分别进行了3次共转染,通过G418筛选并扩增培养后,总共获得1 070个克隆.通过分析标记基因DsRed和GFP在这些克隆中的表达情况:Cre介导的删除效率为91.1%,定点置换效率为29.3%.最后对部分克隆进行了PCR和DNA印迹鉴定,分子鉴定结果与发光的表型状况一致.这一方法为Cre/lox系统在转基因家畜生产中的进一步应用提供了实验依据.     

四川省南充市郊蛾类初步调查

2007年3～7月,对四川省南充市的蛾类进行了采集调查,获得蛾类标本2000余号,鉴定出蛾类隶属于24科,143种,104属.根据调查结果,在该地区天蛾科和夜蛾科的种类较其他种类多.     

湖北神农架巴山冷杉径向生长对气候的响应

利用湖北神农架巴山冷杉树轮宽度标准年表,研究其径向生长对气候要素(月平均气温和月降水量)和生长期其他参数(活动积温、持续天数、初日和终日)的响应.结果表明:神农架地区巴山冷杉径向生长与当年2、4和9月平均气温呈显著正相关,与上年和当年9月降水量呈显著负相关,与上年12月降水量呈显著负相关.巴山冷杉径向生长与生长期活动积温和持续天数呈正相关,且与以9.0℃为阈值定义的活动积温和持续天数的相关最高.其生长期从5月下旬开始,到9月中旬结束,大约120 d.树轮宽度标准年表与以9.0和9.3℃定义的生长期初日和终日序列相关最高,相关系数分别为-0.25(接近0.05显著性水平)和0.33(P<0.05),所以9.0℃是其进行光合作用的敏感温度.生长期开始得早或结束得晚,即生长期延长,均有利于巴山冷杉的生长.与我国气候突变年(1978年)前相比,1978年以后神农架地区气温开始上升,生长期活动积温和持续天数开始增加,生长期初日提前,终日延迟,使得生长期延长,进而促进了巴山冷杉的径向生长.     

三维联合培养牙髓细胞和血管内皮祖细胞促进成牙本质向/成骨向分化

目的:探讨三维联合培养牙髓细胞(dental pulp cells, DPCs)和血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells, EPCs)对成牙本质向/成骨向分化的影响。方法:取单独培养DPCs及联合培养的DPCs和EPCs进行三维培养后成牙本质向/成骨向诱导,使用茜素红染色及半定量分析、RT-PCR和细胞免疫荧光检测成牙本质向/成骨向分化能力。采用SPSS 23.0统计软件对数据进行统计学分析。结果:茜素红染色显示联合培养组和单独培养组之间未见显著差异。RT-PCR和细胞免疫荧光显示成牙本质向/成骨向相关基因m RNAs和蛋白表达水平联合培养组显著高于单独培养组。结论:三维联合培养的DPCs和EPCs促进成牙本质向/成骨向分化,为牙髓再生提供可能实验依据。     

大鼠中枢神经系统衰老的形态学研究—黑质突触岛的年龄性变化

对２．５、１２和２９个月雄性Ｓｐｒａｑｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ大鼠黑质网状部突触岛的年龄性变化进行形态学和形态计量学研究,结果表明：随增龄,突触岛内终末数目明显减少,与幼年组比较,中年组减少２２％（Ｐ＜０．０５）,老年组减少３９％（Ｐ＜０．０５）,同时,终末及树突内出现一系列形态学改变,胶质鞘直接覆盖树突的面积也明显增加。     

激活淋巴细胞cDNA单链库的构建

介绍一种激活淋巴细胞cDNA单链库构建方法,此库具有良好的模板活性. 用PCR法从此库中克隆了多种中国人源性的细胞因子.     

Clarke-Carbon公式的推导

Clarke-Carbon公式用于估计一个完整的基因文库所需的最少克隆数。本文通过建立基因克隆的统计模型,利用二项分布原理对该公式进行了推导,从而有利于在教学过程中对这一公式的确切理解。 Abstract:Clarke-Carbon equation can give a good estimation for the necessary number of recombinants in a gene library.By establishing a statistical model of process of cloning, a deduction and interpretation of this equation can be obtained according to the principle of binomial distribution.This will help to understand the equation more accurately for the teachers and learners.     

郑州市社区居民人体体质特征的调查*

目的:调查郑州市社区居民人体体质特征,比较其性别、年龄间的差异及左右侧功能的差异。方法:选取19岁以上健康的郑州社区居民600例,其中,男性283例,女性317例,男、女性别在19~34岁、35~44岁、45~59岁、60~70岁4个年龄组的人数分布分别为80、79、73、51和83、85、87、62。采用体质测量法、直观判定法收集其11项人体功能类表型基础数据,比较其体质特征的性别、年龄间的差异与左右侧差异。结果:从性别上来看,女性的肩关节、腕关节、髋关节屈伸度和膝关节屈曲度均大于男性(P＜0.05);从不同年龄组来看,同性别不同年龄组其关节活动度的差异具有统计学意义(P＜0.05),而同年龄组不同性别间的差异则无统计学意义(P＞0.05);从左右侧来看,各年龄段的视力均为左侧好于右侧、握力右侧大于左侧(P＜0.05),肩关节活动度和髋关节的活动度均为右侧大于左侧(P＜0.05)。结论:郑州市社区居民的人体功能,不同性别、不同年龄组间有着不同的体质特征,且一些指标存在左右侧的差异,可为国人体质特征的研究提供基线资料。     

不同碳氮源对胶质芽孢杆菌GSY -1生物脱硅的影响

目的:探讨不同碳氮源对胶质芽孢杆菌GSY -1的生物脱硅效果的影响.方法:采用单因素试验并结合方差分析确定影响GSY -1生物脱硅的碳氮源种类及浓度,通过回归实验及响应面分析进一步优化培养条件,然后利用10L发酵罐进行放大实验验证.结果:研究发现,乳糖和尿素对GSY -1生物脱硅的影响均显著,其中尿素10g/L及乳糖13g/L时,培养液中铝硅比(A/S)分别可由2.84提高到5.45和5.42,通过响应面优化实验,确定尿素10.35g/L、乳糖12.60g/L时,菌株GSY -1的脱硅效果最佳,铝硅比由2.84提高到5.67,增幅达99.65%.经10 L发酵罐放大实验,测得浸矿后的铝硅比为5.07,较浸矿前提高78.52%.结论:乳糖和尿素对胶质芽孢杆菌GSY -1脱硅效果影响显著,响应面法可有效用于GSY -1菌株脱硅条件的优化.     

不同磁处理对芍药种子萌发的影响

目的:研究磁场对芍药种子萌发的影响.方法:采用均匀电磁场分不同的处理强度和处理时间分别磁处理野生芍药种子和栽培芍药种子,种子磁处理后在培养皿中催芽,2个月后统计种子胚根萌发率和胚芽萌发率.结果:3000Gs的磁场处理1.5h能提高野生芍药种子胚芽萌发率和栽培芍药种子胚根萌发率,对于栽培芍药种子4000 Gs的磁场处理2h能够促进胚根和胚芽萌发.结论:一定强度的磁场能打破芍药种子休眠,促进种子的萌发.