扩增和纯化携带肌浆网钙ATP酶重组腺病毒的实验方法

目的:通过扩增和纯化rAd.SERCA2a,为转SERCA2a基因研究提供实验基础,并为建立基因库提供稳定可靠的实验方法.方法:用100μL 1.9×10<'12>pfu/ml rAd.SERCA2a感染HEK293细胞,出现细胞病变效应时收获细胞,经物理反复冻融方法及两步氯化铯超速离心方法获得纯化的rAd.SERCA2a,紫外分光光度计比色法测定病毒DNA质粒数.结果:rAd.SERCA2a成功在HEK293细胞表达呈现绿色荧光,纯化的rAd-SERCA2a-GFP DNA质粒数为1.3±0.58×10<'12>pfu/mL,OD<,260>/OD<,280>比值为1.57±0.49(n=50).结论:建立了稳定可靠的借助HEK293细胞培养扩增rAd.SERCA2a的实验方法,纯化后的高效价的SERCA2a基因的重组腺病毒可直接用于心力衰竭的实验研究,对重组腺病毒携带其他基因的扩增与提纯方法也具有一定的参考价值.     

Time-course changes in potential biomarkers detected using a metabonomic approach in Walker 256 tumor-bearing rats

A metabonomic approach based on complementary hydrophilic interaction chromatography and reversed-phase liquid chromatography combined with tandem mass spectrometry and time-course analysis of metabolites was implemented to find more reliable potential biomarkers in urine of Walker 256 tumor-bearing rats. A major challenge in metabonomics is distinguishing reliable biomarkers that are closely associated with the genesis and progression of diseases from those that are unrelated but altered significantly. In this study, these biomarkers were selected according to the change trends of discriminating metabolites during the genesis and progression of cancer. Seven consecutive batches of urine samples from preinoculation to 16 days after were collected and analyzed. Multivariate analysis revealed 87 discriminating metabolites. Time-course analysis of discriminating metabolites was used to select more reliable biomarkers with regular and reasonable change trends. Finally, 47 were found and 15 were identified including 12 carnitine derivatives, 2 amino acid derivatives, 1 nucleoside. On the basis of time-course behaviors of these potential biomarkers, we hypothesize such disruption might result from elevated cell proliferation, reduced β-oxidation of fatty acids, and poor renal tubular reabsorption. These studies demonstrate that this method can help to find more reliable potential biomarkers and provide valuable biochemical insights into metabolic alterations in tumor-bearing biosystems.     

p53基因多态性和脑外伤预后及临床意义

目的：研究颅脑外伤患者中P53等位基因与基因型的频率分布,探讨其与脑损伤预后的关联性,为脑损伤患者预后提供部分参数依据。方法：选择各型颅脑损伤患者141例,正常对照者144人,患者按GCS格拉斯哥评分法进行分类;采用PCR基因型检测法检测P53等位基因,基因计数法计算等位基因频率;统计学分析等位基因和基因型在脑外伤组与正常对照组、预后良好组与预后不良组的频率分布的差异,并综合分析患者年龄、性别、GCS以及P53各等位基因等因素对脑外伤患者预后的影响。结果：在颅脑外伤患者和正常对照者中P53等位基因和基因型的频率分布,差异均无统计学意义（P〉0.05）;等位基因Arg相对于Pro的OR为1.140,基因型Arg/Pro、Arg/Arg相对于Pro/Pro的OR分别为0.890和1.170。在重型脑外伤患者（3≤GCS≤8分）86例中,预后良好31例,预后不良55例,基因型对预后不良的影响：非Pro/Pro相对于Pro/Pro的OR为0.417,非Arg/Pro相对于Arg/Pro的OR为0.419,非Arg/Arg相对于Arg/Arg的OR为3.667。在所有脑外伤患者中,预后良好组和预后不良组的患者年龄、性别差异均无统计学意义（P〉0.05）;GCS、P53等位基因差异具有显著统计学意义（P〈0.01）。结论：在重型颅脑患者中,基因型Arg/Arg有增加预后不良的风险;脑外伤预后与患者的年龄、性别无关联,与GCS、P53基因密切相关。     

NaCl胁迫对甘草生长及抗氧化酶活性的影响

目的：通过分析不同浓度NaCl胁迫下甘草生长和抗氧化酶活性的变化探讨甘草对盐分胁迫的适应性机理;方法：采用不同浓度的NaCl溶液（配成Hoagland液）处理盆栽一年生甘草,分别于35d、70d和105d取样,测定甘草株高、地上部分鲜、干重、根鲜、干重及甘草叶片SOD、POD、CAT活性,分析各生长指标与抗氧化酶活性的相关性;结果：NaCl胁迫70d和105d,0．6％和0．9％处理组的株高、地上部分鲜、干重及根鲜、干重均显著低于CK,SOD、POD及CAT活性均显著高于CK,经相关性分析得知,SOD、POD及CAT活性与各生长指标均负相关,其中POD活性与各生长指标极显著负相关;结论：甘草对NaCl胁迫的响应有胁迫时间和浓度的依赖性,在遭遇胁迫时,通过改变自身的生长和提高抗氧化酶活性,来提高机体的抗盐能力。     

IABP在危重症冠状动脉旁路移植术围手术期的应用

目的:探讨危重症冠状动脉旁路移植术(CABG)患者围手术期应用主动脉球囊反搏(IABP)疗效。方法:回顾性分析2008年1月至2010年9月40例应用IABP治疗的危重症CABG患者围手术期资料。结果:术前安置IABP 19例,术中安置IABP 10例,术后安置IABP11例。平均IABP辅助时间98.6±48.2小时。32例患者治愈出院,死亡8例,死亡率20.0%。术前安置者死亡率为21.1%,若除外机械并发症原因则死亡率为10.5%;术中安置者死亡率为20.0%;术后安置者死亡率为18.2%。5例出现血小板减少症;1例出现肠系膜动脉栓塞。结论:IABP是一种安全有效的循环辅助方法,积极应用可以明显提高危重症CABG的治疗效果。     

马凡综合征合并急性Standford A 型夹层的外科治疗

目的:评价外科治疗马凡综合征合并急性Standford A型夹层的效果。方法:回顾性分析2007年7月至2010年7月外科治疗12例马凡综合征合并急性Standford A型夹层病例的临床资料。采用改良Mini-root手术方式代替Bentall手术。结果:主动脉阻断时间69～103 min,平均(78.7±28.6)min,体外循环时间79～122 min,平均(98.3±23.8)min。术后早期存活11例,死亡1例,死亡率8.3%。术后随访时间2～37个月,平均(18.2±8.6)个月,其中1例术后24月发生急性腹主动脉夹层,予以实施腔内支架隔绝术成功以治愈出院。术后与术前左心室舒张末径分别为45～58 mm,平均(50.2±5.6)mm和53～69 mm,平均(61.3±4.6)mm(P<0.01)。结论:马凡综合征合并急性Standford A型夹层一经确诊则需急诊手术,及时的外科手术是治疗该病的有效方法,而且应用改良Mini-root手术方式疗效满意。     

伴海马硬化的颞叶癫痫患者海马组织内BDNF 表达变化

目的:研究伴海马硬化的难治性颞叶癫痫(TLE)患者海马组织内脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)的表达变化,探讨其在难治性颞叶癫痫发病机制中的作用。方法:采集5例伴海马硬化的难治性TLE患者手术中切除的海马组织,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测BDNF mRNA表达,并与3例非海马硬化TLE患者对照。结果:与非海马硬化组比较,伴海马硬化的难治性TLE患者海马组织中的BDNF mRNA表达明显增加(P<0.01)。结论:伴海马硬化的难治性TLE患者海马组织中BDNF mRNA表达表达增高,可能在海马硬化和难治性颞叶癫痫发生、发展中具有重要作用。     

高通量血液透析与血液透析滤过在慢性肾功能衰竭患者中的疗效对比

目的:探讨高通量血液透析与血液透析滤过在慢性肾功能患者中的疗效。方法:选取2007年3月～2010年6月在我院进行维持性血液透析患者52例并随机分为2组:高通量透析(HPD()n=26)和血液透析滤过(HDF)组(n=26)。两组患者均每周透析2次,每次4h,对两组患者进行1年临床观察。比较两组治疗前、后尿毒症患者血肌酐、β2-微球蛋白(β2-MG)、血磷、PTH的清除作用及对血脂的影响。结果:两组患者KT/V及透析前后血BUN、Cr的下降率无显著性差异。HDF组透析1年后β2-MG较透析前增高(5.17±15.09)%,HPD组透析1年后β2-MG较透析前下降(12.32±3.2 7)%,P<0.0 1。HDF组透析1年后甲状旁腺激素较透析前增高(6.59±14.13)%,HPD组透析1年后甲状旁腺激素较透析前下降(19.07±5.27)%,P<0.01。HPD、HDF两组血磷下降率分别为(56.4 4±14.83)%、(43.94±17.96)%,P<0.05,HDF组患者透析1年后其血清甘油三酯(TG)水平相比于透析前血清TG水平上升了(22.4 2±9.52)%,HPD组1年后TG较透析前下降(2 3.81±9.93)%,P<0.05。结论:高通量血液透析能有效清除β2-MG、甲状旁腺激素、对血磷的清除效果也优于血液透析滤过,对血脂代谢也有显著改善作用。     

儿童慢性鼻窦炎的综合治疗

目的探讨儿童慢性鼻窦炎的有效治疗方法。方法回顾分析2001年1月～2004年10月在大连大学附属中山医院治疗的113例儿童慢性鼻窦炎的临床资料,分析5种治疗方法的疗效。结果根据患儿的病情,分别采取5种治疗方法,按1997年海口会议标准评定疗效,总有效率为88．5％。结论儿童慢性鼻窦炎的治疗要根据病情及伴随的相关疾病采取相应的治疗方法,才能提高疗效。