痘苗病毒毒力测定及其免疫血清的制备

目的测试痘苗病毒毒力,制备痘苗病毒免疫血清,为药物评价和病毒检测奠定基础。方法鸡胚绒毛尿囊膜培养痘苗病毒,测定病毒的TCID50和小鼠毒力。将痘苗病毒悬液稀释成100TCID550,0．2％福尔马林灭活,分别在0、7、14d以腹腔注射的方式免疫BALB／c小鼠,用IFA、IEA、ELISA方法评价血清的敏感性和特异性。结果痘苗病毒TCID50／0．05mL=1．8×10^4,小鼠LD50／0．2mL=10^6.8;制备的免疫血清经IFA法测定效价为1：320,IEA法测血清效价为1：160,ELISA测血清效价1：6400。结论确定的细胞和小鼠毒力将为药物测定提供基础比对数据;制备的痘苗病毒免疫血清具有高度的敏感性和特异性,可作为测试对照血清使用。     

SA11株轮状病毒VP7基因的克隆及表达

采用RT PCR方法 ,从提取的SA1 1株轮状病毒总RNA中扩增出VP7基因片段 ,进行鉴定后 ,将该片段克隆于真核表达载体pEF1 HisC dhfr,构建成重组质粒pEF1 HisC dhfr VP7,然后用质脂体法转染COS 7细胞 ,进行真核系统的表达 .获得了长 981bp的PCR片段 ,序列分析结果与已知VP7序列相同 .表达后经细胞超声破碎 ,Westernblot检测表达产物 ,在相对分子质量 38× 1 0 3 处有表达条带 ,表达蛋白主要存在于上清中 .因此 ,获得了VP7基因 ,并在COS 7细胞中获得了表达 ,表达蛋白质免疫Balb c小鼠 ,获得了具有特异性结合活性的抗体     

江苏盐城黑嘴鸥的繁殖栖息地选择

对江苏盐城黑嘴鸥繁殖期觅食地和营巢地及其主要特征进行了调查,黑嘴鸥繁殖觅食地有盐田,碱蓬滩,草滩,水产品养殖塘,农田,泥质滩涂及河口港汊7种类型,生境选择的结果表明黑嘴鸥对碱蓬滩涂和泥质滩涂都有正选择性,对农田和河口港汊具有负选择性,繁殖前期对养殖塘具有正选择性,不同繁殖时期黑嘴鸥对碱蓬滩和养殖塘的利用情况变化最明显,两年中,黑嘴鸥对河口港汊的利用情况稳定,黑嘴鸥营巢地有獐毛滩,碱蓬滩和大米草滩3种类型,其中碱蓬滩是其主要营巢栖息地,对巢址选择因子的分析的结果表明：影响黑嘴鸥巢址选择的因子主要有4类,依次为：植被盖度和群集度,人为活动干扰强度,底栖生物量及距水源距离,其贡献率分别为26．23％,20．55％,14．82％,14．02％。     

果树花芽孕育的研究概况

果树花芽孕育是一个成花因素积累的过程 ,也是芽顶端花原基形成前所必要的活动。随着研究手段的改进和水平的提高 ,近年来人们逐渐弄清了果树花芽孕育的概念、花芽孕育期间的重要生理生化变化以及外界因素调控花芽孕育的可能方式 ,而对果树花芽孕育调控基因的研究处于起步阶段。     

鹦鹉热衣原体B细胞表位的表达及抗原鉴定

利用噬菌体PⅢ蛋白为载体对鹦鹉热衣原体单抗17筛选得到的B细胞抗原表位进行了研究,利用改构后的原核表达载体pQE30,构建含有B细胞表位基因的重组表达质粒,表达的蛋白经ELISA及Western Blot实验证实能够与单抗C17发生特异反应,蛋白免疫动物后得到了抗鹦鹉热衣原体的抗体,验证了所筛选表位的真实性。     

端粒结合蛋白在端粒复制与损伤修复中的作用

端粒位于真核细胞线性染色体末端,正常的端粒长度与结构对于细胞基因组稳定的维持有重要作用.端粒DNA序列的高度重复性使其容易形成一些特殊的二级结构,相比染色体其他位置更难复制.结合在端粒上的Shelterin蛋白复合体由六个端粒结合蛋白组成,该复合体可以通过抑制端粒处异常DNA损伤修复途径的激活维持端粒的稳定.此外,近几...     

古尔班通古特沙漠一年生植物的氮吸收策略

同一生活型的植物可能通过吸收不同形态的氮来利用陆地生态系统中有限的氮, 避免和减少对资源的竞争, 从而完成共生。研究荒漠生态系统同一生活型植物对氮的利用是否存在生态位分离, 有助于深入了解荒漠植物的生存策略, 更好掌握氮利用对荒漠植物生存的影响。该研究利用¹⁵N同位素示踪法, 研究古尔班通古特沙漠中广泛分布的2种一年生植物——角果藜(Ceratocarpus arenarius)和碱蓬(Suaeda glauca)在不同月份和不同土壤深度对不同形态氮的吸收策略。结果显示, 在浅层土壤中, 2种植物7月的氮吸收速率均高于6月; 对比不同形态氮的吸收速率, 植物对无机氮的吸收均高于有机氮, 角果藜更偏好吸收硝态氮, 每克干根系最高氮吸收速率可达3.81 μg·h^-1, 碱蓬更偏好吸收铵态氮, 每克干根系最高氮吸收速率可达4.74 μg·h^-1; 从不同形态氮对总氮的贡献率看, 硝态氮是角果藜吸收氮的有利形态, 占比在35.7%-43.9%之间, 铵态氮是碱蓬吸收氮的有利形态, 占比最高可达48.3%, 最低也有40.0%。2种一年生植物不仅可以利用土壤中的无机氮, 也可以直接吸收利用土壤有机氮。研究结果表明: 在古尔班通古特沙漠生态系统中, 一年生植物对氮的吸收能力有着差异和多元化的特点, 且均可吸收土壤中的可溶性有机态氮源。     

人α型干扰素家族定向进化文库的构建及细胞筛选

Mixtures of twelve human interferon alpha genes were digested randomly with DNase I. DNA fragments of 30～50 bps were reassembled into a full length interferon gene with sexual PCR without primer (DNA Shuffling). This primerless PCR product was further amplified with additional PCR with primers containing restriction enzyme sites. Then these PCR products were cloned into the phagemid expression vector PcantAb5E to form an expression library displaying interferon molecules. Regarding WISH cells as a standard strain rich in IFN receptor complex, we developed a new and feasible panning method with WISH cells and performed a competitive washing selection strategy. Using this method in combination with antiviral activity assay, we got two clones showing higher antiviral activity compared with phage IFN α2b. Sequencing results showed that they are hybrids containing two and four interferon alpha genes. Now we are cloning them into prokaryotic expression vector and want to get purified sample to determine their biological activity and biochemistry characters.     

二十二碳六烯酸对心房颤动大鼠心房肌生理改变及双孔钾通道TASK-1蛋白表达的影响

目的：探讨二十二碳六烯酸（DHA）对大鼠心房颤动（AF）模型心房肌生理特性的影响及相关机制研究。方法：80只乙酰胆碱-氯化钙混合液敏感的SD大鼠分为对照组（CTL组）、DHA处理组（DHA组）、房颤组（AF组）和房颤+DHA处理组（DHA+AF组）,观察房颤持续时间;采用全细胞膜片钳技术记录大鼠心房肌细胞动作电位时程（APD）和双孔钾通道TASK-1电流,Western blot测定大鼠心房组织TASK-1蛋白表达。结果：大鼠尾静脉注射乙酰胆碱-氯化钙混合液后,房颤持续时间随实验天数增加而逐渐延长,DHA干预缩短房颤持续时间。与CTL组相比,AF组大鼠心房肌细胞复极50%时的动作电位时程（APD₅₀）和复极90%时的动作电位时程（APD₉₀）明显缩短,心房肌细胞TASK-1电流密度升高,蛋白表达升高（P<0.05）。与AF组相比,DHA+AF组大鼠心房肌细胞APD₅₀和APD₉₀明显延长,TASK-1电流密度和蛋白表达降低（P<0.05）。结论：DHA具有延长房颤大鼠心房肌细胞APD的作用,可能与其下调心房肌TASK-1蛋白的表达从而降低心房肌细胞TASK-1电流密度有关。     

京郊典型集约化"农田-畜牧"生产系统氮素流动特征

城郊畜牧业的集约化发展在满足人们日益增长的肉蛋奶等动物性产品需求的同时,也带来了巨大的环境压力。本文利用养分流动和模型分析的方法,分析北京市郊区某村三种不同类型"农田-畜牧"生产系统(大型集约化种猪场、种养结合小规模生态养殖园和集约化单一种植区)的氮素流动特征。结果表明:饲料是集约化种猪场和生态养殖园氮素输入的主要来源,饲料投入氮量分别为12469.0和9268.5 kg.hm-.2a-1);集约化种猪场农牧体系间生产脱节,致使农田氮素输入主要依赖于化肥投入,化肥氮输入量(435.0 kg.hm-.2a-1)占农田氮素输入量的82.7%。相反,生态养殖园农牧体系结合紧密,猪粪尿氮还田比例达28.6%,这使得园区化肥氮输入量仅为135.0 kg.hm-.2a-1,因此畜禽粪尿的合理循环利用可作为减少化肥投入的有效途径;集约化种猪场、生态养殖园和单一种植区农牧生产系统氮素利用效率分别为18.8%、20.6%和17.3%,均处于较低水平;集约化种猪场猪粪尿在猪舍和储藏处理过程的氮素损失率为15.8%和25.4%,分别低于小规模生态养殖园相应损失率约8.7和4.8个百分点;生态养殖园粪肥氮还田量高,导致农田氮素盈余量高达1962.8 kg.hm-.2a-1,未能实现生态型养殖的理想效果,优化氮素管理、确定合理的消纳畜禽粪尿的农田面积和调整畜禽养殖密度是解决该问题的关键。