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991.
短芽孢杆菌(Bacillus brevis No.G1)几丁质酶的提纯和分离鉴定 总被引:6,自引:0,他引:6
从芽孢杆菌属短芽孢杆菌种分泌的胞外几丁质酶经过硫酸铵盐析、苯基琼脂糖疏水相互作用层析和DEAE阴离子交换层析第一次被提纯。和其他来源的几丁质酶相比 ,该纯酶的独特之处在于它是一个由两个完全相同的亚基以疏水相互作用聚合而成的二聚体。常温下经过巯基乙醇处理后 ,该酶在 1 0 %SDS聚丙烯酰胺电泳显示的分子量为 85kD。沸水处理 3min或用 50℃的 8mol/L尿素溶液处理 1 0min后 ,该酶在 1 0 %SDS聚丙烯酰胺电泳显示的分子量为 4 8kD。该酶的亚基解聚后 ,活性丧失。该酶的等电点为 5.5,水解几丁质的最适 pH为 8.0 ,最适温度为 6 0℃。该酶的酸碱稳定范围是 pH 6 .0到1 0 .0。Ag 和巯基乙醇能抑制酶活性。该纯酶的N端 1 0个氨基酸残基依次是AVSNSKIIGY ,表明该酶是一个尚未发现的新几丁质酶。该纯酶水解几丁质的特征研究表明该酶属一种内切几丁质酶 ,不具备外切几丁质酶的活力。和其他几丁质酶相比 ,该酶具有高度的热稳定性和蛋白水解酶抗性 ,因此可用于生物控制领域。 相似文献
992.
Application and functional study of dwarf and semi-dwarf genes are of great importance to both crop breeding and molecular biology. A new semi-dwarf gene, sd-t(t), non-allelic to sd-1, had been identified in an indica rice variety, Aitaiyin 2. In this study the gene was genetically mapped by using an F2 population, which consisted of 474 individuals developed from a cross between Aitaiyin 2 and B30. The sd-t(t) gene was located between the RFLP markers R514 and R1408B with a distance of 1.1 cM to R514, and 4.5 cM to R1408B on chromosome 4. A physical contig covering the sd-t(t) mapping region was further constructed by screening a BAG library with R514 and R1408B as probes, and the physical distance between R514 and R1408B was estimated at approximately 147 kb. This result will facilitate map-based cloning of the sd-t(t) gene. 相似文献
993.
994.
在已有的demecolcine(以下简称Deme)诱导去核技术路线的基础上,以昆明白小鼠卵母细胞为实验材料,对影响去核率的几个因素(包括Deme浓度、Deme处理起始时间和作用时间、卵母细胞的卵龄)逐次进行实验。结果表明:(1)激活卵母细胞在浓度为0.4μg/mL和0.5μg/mL Deme-KSOM液中处理60 min均能有效去核,但0.5μg/mL组获得更高的去核率(33.3%)。(2)卵母细胞在激活后0~5 min之内迅速放入0.5μg/mL Deme-KSOM液中,处理60~180 min得到了相对较高的去核率(31.9%~24.5%)。(3)昆明白小鼠hCG注射后17~18 h收集的卵母细胞更有利于Deme诱导去核,去核率为27.1%。经比较分析,建立了优化的Deme诱导去核程序。
Abstract: On the basis of exiting technique pathway of demecolcine-induced enucleation(IE),several factors(Demecolcine concentration、time of demecolcine inition and treatment、oocytes age) affecting the IE rate were tested using Kunming mouse oocytes.The experiments’ results demonstrated that: In experiment 1,activated oocytes could be enucleated efficiently by treating with KSOM medium containing 0.4μg/mL or 0.5μg/mL demecolcine for 60 min,but 0.5μg/mL group gained the higher IE rate(33.3%).In experiment 2,maximum IE rate (31.9%~24.5%) were obtained when oocytes were exposed to 0.5μg/mL demecolcine between 0 and 5 min postactivition and treated for 60~180 min.In experiment 3,oocytes collected from Kunming mouse at 17~18h after hCG administration were favoriate to demecolcine-IE(27.1%). By comparision and analysis of the data,we established the optimized IE procedure. 相似文献
995.
细小病毒B19壳抗原VP2在大肠杆菌中的表达及血清学检测 总被引:2,自引:2,他引:0
为了进行B19感染临床的血清学诊断,利用原核表达载体PQE31克隆和表达B19壳蛋白VP2,酶切鉴定PCR产物及PQE31-VP2克隆的正确性,Western-blot证明表达蛋白的特异性,并对其表达条件和纯化条件进行了优选。在D600为0.7,诱导时间为5h时表达量最高。Ni2+亲和色谱,用0.5mol/L咪唑洗脱液洗脱,获得纯化蛋白。利用纯化蛋白检测100份人群血清,免疫斑点法结果为阳性94例,阴性6例;ELISA结果为阳性84例,阴性16例,两种方法结果一致(0.25>P>0.1)。 相似文献
996.
997.
高榕隐头果内寄生蜂种类及生态学特征初步观察 总被引:8,自引:3,他引:5
本研究采用定期、定点、定树采样调查和观察研究的方法,获得寄生于高榕隐头果内小蜂(Chalcidoidea)为6个科,14个属,25种。根据小蜂行为把高榕小蜂划分为2类,一类为传粉小蜂,另一类为非传粉小蜂,其中传粉小蜂有2种,主要的传粉小蜂只有Eupristina altissima 一种,另一种仅在部分季节少量出现。高榕隐头果果态变化大,直径2.5cm以上的大号果中仅寄生非传粉小蜂,这些小蜂对榕树—传粉者共生体系有着负面影响。本文初步研究了高榕隐头果中寄生的小蜂种类和生态特性,分析了部分寄生蜂对榕树—传粉者共生体系的影响。 相似文献
998.
999.
高榕小蜂群落结构及物种多样性的初步研究 总被引:6,自引:2,他引:4
在西双版纳地区采集干、湿两季5个样株的高榕(Ficus altissima)隐头果,单果收蜂,鉴定蜂种,共获高榕隐头果内小蜂标本18 000多号,隶属膜翅目5科9属14种。然后对样株小蜂群落结构、组成、性比及物种多样性进行对比研究。小蜂群落的结构和组成在干、湿两季有着明显的差异:湿季隐头果内的小蜂种类比干季丰富。另外,受人为干扰较少的样株隐头果内小蜂种类比受严重干扰的样株丰富。高榕的非传粉小蜂主要由造瘿者组成,寄生小蜂和寄居性小蜂仅占很少一部分;干、湿两季的小蜂群落多样性指数均很低,虽然在湿季群落内小蜂的丰富度指数较高,但不如干季小蜂分布得均匀;相同季节的小蜂群落均为中等相似,不同季节的2个榕树小蜂群落为中等不相似,有的树对达到极不相似水平;高榕隐头果内传粉小蜂的雄雌性比(♂:♀)较低,为0.14:1,而非传粉小蜂的雄雌性比相对较高,多在1:1左右。以上研究结果表明,西双版纳地区高榕隐头果内的小蜂受不同季节温湿度、人为干扰程度等因素的影响,保护并改善西双版纳地区的生态环境对丰富高榕隐头果小蜂物种多样性有重要意义。 相似文献
1000.
COP9信号传导体和26S蛋白酶体的调节盖子复合体皆为含有8个亚基的蛋白复合体,在真核生物体中普遍存在,它们的相应亚基在大小和氨基酸序列上具有一一对应关系。从NCBI站点的所有数据库中获得了裂殖酵母、酿酒酵母、线虫、果蝇、哺乳动物和拟南芥等多种生物的复合体的亚基序列共8组。COP9信号传导体与调节盖子复合体相应亚基之间的氨基酸序列一致性大于12%,它们均具有一些保守的区域,而且保守位点分布均匀,表明它们来自于同一祖先。在基于氨基酸序列构建的系统发育树中,各组序列分别形成两个分支:一个分支由COP9信号传导体亚基和相似蛋白组成,另一分支由相应的调节盖子复合体亚基和相似蛋白构成。各个分支中单细胞生物的序列位于动、植物序列的根部,表明COP9信号传导体与调节盖子复合体的基因重复发生在真核单细胞生物和多细胞生物分化以前,并且二者的亚基基因沿各自的方向独立进化。几乎所有编码两个蛋白复合体的基因在基因组中均为单拷贝,第Ⅴ、Ⅵ组的亚基保守程度最高,暗示着它们在复合体中起着关键的作用。对COP9信号传导体和调节盖子复合体的相应亚基基因两两之间进行dN/dS的相关性分析,分别鉴定出21和15对亚基编码序列间具有显著的Pearson相关关系,推测其相应亚基间可能通过承担相互关联的重要的生物学功能而协同进化。 相似文献