质料拷贝数对宋内氏菌I相O—抗原表达的影响

试图通过提高质粒拷贝数来提高宋内Ｉ相Ｏ－抗原的表达水平,先将宋内Ｉ相Ｏ－抗原基因亚克隆至高拷贝的ｐＵＣ１８和ｐＧＥＭ３Ｚ,但没能找到相应的阳性转化子,可能Ｏ－抗原基因在高拷贝质粒上表达水平太高对宿主产生毒性效应。再将其亚克隆至中等拷贝的ｐＡＴ１５３,虽能找到阳性转化子,但表达水平仍不能满足以后实验的需要,表明质粒拷贝数与Ｉ相Ｏ－抗原的表达水平密切相关,要有效地表达宋内Ｉ相Ｏ－抗原,还需要寻找拷贝数     

典型喀斯特峰丛洼地植被群落凋落物C∶N∶P生态化学计量特征

为了解典型喀斯特峰丛洼地植被群落凋落物养分空间分异以及其生态化学计量特征,分析了4个不同演替阶段植被凋落物现存量、C、N、P含量及C、N、P元素比值关系在不同坡位间的差异。结果表明:(1)不同演替阶段群落凋落物现存量和C、N、P含量、N ∶ P值随植被正向演替而升高;C ∶ N值和C ∶ P值随植被正向演替而下降。(2)凋落物C含量、C ∶ N值、C ∶ P值和N ∶ P值在不同坡位表现为上坡位较高、下坡位较低;P含量的变化规律与之相反,N含量则没呈现很明显的规律性(P<0.05)。典范对应分析(CCA)结果表明演替阶段和坡位对凋落物积累、养分分布和存储影响最大,坡度、坡向和裸岩率也有较大影响。(3)N ∶ P值是制约凋落物分解和养分循环的重要因素。凋落物在P素较低的情况下具有较高的N及木质素含量(即较高的N ∶ P值),分解速率较低,较低的N ∶ P值使凋落物更易分解。N素在3个坡位的不显著差异以及P素的显著差异反映了P含量波动对喀斯特峰丛洼地植被凋落物N ∶ P值和分解速率变化的影响。推测下坡位及幼龄林群落由于具有较低的N ∶ P值,其凋落物分解速率相对较快,养分的存储量较少。因此,上坡位、成熟林群落的凋落物有利于积累养分。     

Screening and identification of receptor antagonist for shiga toxin from random peptides displayed on filamentous bacteriophages

The bacteriophage clones which can bind with shiga toxin B subunit (StxB) and inhibit cytotoxicity of shiga toxin were obtained by using antibody capturing method from a 15-mer random peptide library displayed on the surface of bacteriophage fd. Among them, one peptide encoded by the random DNA region of a selected bacteriophage (A12) was synthesized and tested in vitro and in vivo, where the peptide competed with the receptor of shiga toxin to bind StxB, and inhibited the cytotoxicity and enterotoxicity of shiga toxin. The peptide can also block other apparently unrelated StxB binding bacteriophage (A3), which suggests that there are overlapping StxB interaction sites for those ligands with different sequences. The results provide a demonstration of bacteriophage display to screen peptide ligands for a small and/or unable biotinylated molecule by antibodies-capturing strategy, and take the lead for the development of receptor antagonists for shiga toxin.     

高原鼠兔和高原鼢鼠乳酸脱氢酶同工酶的初步研究

比较异种生物同工酶(Isoenzyme)能从分子水平阐明物种的多样性。近年来,不少学者对许多动物的同工酶进行广泛而深入的研究(Masters 1975,Markert,1975)。其中对乳酸脱氢酶(以下简称LDH)的研究最为详尽(Everse等,1973,Moss,1982)。乳酸脱氢酶同工酶是由H(或B),M(或A)2种亚基组成的一组四聚体分子。H,M亚基分别受不同基因位点控制,并按不同比例组成5种不同的同工酶。     

黑河中游荒漠绿洲过渡带多枝柽柳对地下水位变化的生理生态响应与适应

以黑河中游荒漠绿洲过渡带主要建群种多枝柽柳成年体为研究对象,对野外不同地下水埋深处柽柳叶片生理生态特性进行观测和分析,评价分析多枝柽柳对地下水埋深差异和地下水位季节变化的响应过程和适应机制.结果显示:在相似大气环境条件下,不同地下水埋深之间,多枝柽柳叶片的生理生态指标没有明显差异,但对于地下水位的季节波动,则表现出较为明显的变化和响应;柽柳通过气孔的调节,在更深地下水埋深下,水分条件更差时,保持了稳定的气孔导度和较高的叶片胞间二氧化碳浓度,从而维持相对稳定的碳同化能力及较高水分利用效率,表现出较好的适应能力;在不同地下水埋深下,叶片生理生态指标随地下水位下降的响应特征呈现出明显差异,这种差异暗示了黑河中游荒漠绿洲过渡带多枝柽柳的适宜地下水位在3 m左右.     

黄淮海平原农业景观非农生境植物功能群特征分析

植物功能群的划分有助于对生态系统结构、功能和服务的理解与认知,为更好的了解农业景观中残存的各非农生境在区域生物多样性保护和生态系统服务中的地位和作用。在黄淮海平原典型区域布点,对区内主要非农生境(林地、树篱、田间道路、沟渠)中的植物群落进行调查,并基于植物功能群分类结果探讨了其特征和在生态系统服务上的贡献。结果显示:(1)从物种数量来看,双子叶植物占绝对优势,单子叶植物在各生境中均较少,但却具有较高的群落地位,一年生和多年生植物物种丰富度及重要值基本一致;(2)从生境类别来看,田间道路和树篱等生境中一年生和单子叶植物更具有优势,随着人类扰动强度的减弱,在林地和沟渠生境中,开始有大量的多年生物种出现,尽管这些物种多为偶见种。(3)常见种多为一年生双子叶植物,种类不多,但群落地位极高,而偶见种中存在大量的多年生双子叶物种。深入分析认为,在黄淮海平原农业景观中,总体上各非农生境均处于群落演替早期,以一年生和单子叶植物功能群构成了群落主体,群落结构简单,优势种群明显,随着干扰强度的相对降低,林地与沟渠生境中的多年生和双子叶物种大量出现,偶见种增加,优势种地位下降。从物种多样性保护与生态系统服务提供综合考虑的角度看,尽管这些非农生境发挥了重要作用,但所能发挥的作用还很有限,未来仍需进一步减弱人类活动对非农生境的干扰,从而进一步提高区域生态系统服务的总体水平。     

黄河下游平原农业景观中非农生境植物多样性

农业景观中的自然、半自然生境及其上的植物群落对维持农业生态系统功能意义重大。为了解黄河下游典型平原农业景观中非农生境植物多样性特征,在对研究区景观格局分析的基础上,使用典型样地法对区域内农业景观中主要自然、半自然生境(包括林地、树篱、田间道路、沟渠等)进行调查。结果显示:研究区总体上为农业景观,居民点和林地斑块散布其间;区内植物科的地理分布以世界分布和泛热带分布为主,属的地理成分复杂,具有中国15个种子植物属分布区类型中的13个,以温带分布、世界分布和泛热带分布为主,总体上以广布种为主,优势科属明显,缺少特有种;林地和树篱具有较高的物种丰富度和多样性,沟渠和林地的物种均匀度和群落盖度最高,田间道路上群落组成的变化幅度和分化程度最大(β多样性指数最高);林地、树篱和田间道路等生境间的群落相似性极高,但其群落盖度和优势种组成具有显著差异,沟渠作为一种特殊生境与其他生境间相似性较低。研究表明,在黄河下游平原农业景观中,林地和树篱在物种多样性维持中作用较大,沟渠为水生和湿生植物提供了庇护所,不同生境间极高的群落相似性仅是物种组成名录的反映,而其生态功能存在显著差异。未来区内的生物多样性保护应重在生态系统功能和服务的维持及提高,而如何进行景观要素配置,才能兼顾农业生产力的可持续性和生态系统功能维持,尚需进一步探讨。     

宋内Ⅰ相O抗原及霍乱毒素B亚基在福氏2a痢疾菌中的表达及其免疫保护效果的观察

本文利用基因重组的方法,将宋内Ｉ相Ｏ抗原基因以及霍乱毒素Ｂ亚单位基因（ｃｔｘ－Ｂ）克隆至带链球菌的ａｓｄ基因的表达载体,然后转化至ａｓｄ－痢疾菌苗株福氏２ａＴ３２。脂多糖银染以及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ实验证实以上两基因都能在宿主菌中稳定表达。动物（小白鼠）保护实验表明,该重组菌对福氏２ａ、宋内氏痢疾菌的保护效率达１００％,对霍乱弧菌的保护效率也达７０％。该菌具有稳定、无抗生素标记、多价的特点。     

Construction of a trivalent candidate vaccine against Shigella species with DNA recombination

In this work asd gene of Shigella flexneri 2a strain T32 was replaced by Vibrio cholerae toxin B subunit (ctxB) gene with DNA recombination in vivo and in vitro. The resulting derivative of T32, designed as FWL01, could stably express CtxB, but its growth in LB medium depended on the presence of diaminopimelic acid (DAP). Then form I plasmid of Shigella sonnei strain S7 was labeled with strain T32 asd gene and mobilized into FWL01. Thus a trivalent candidate oral vaccine strain, designed as FSW01, was constructed. In this candidate strain, a balanced-lethal system was constituted between the host strain and the form I plasmid expressing S. sonnei O antigen. Therefore the candidate strain can express stably not only its own O antigen but also CtxB and O antigen of S. sonnei in the absence of any antibiotic. Experiments showed that FSW01 did not invade HeLa cells or cause keratoconjunctivitis in guinea pigs. However, rabbits immunized FSW01 can elicit significant immune responses. In mice and rhesus monkey models, vaccinated animals were protected against the challenges of wild S. flexneri 2a strain 2457T and S. sonnei strain S9.     

逆转录病毒载体介导入GM-CSF基因转染肿瘤细胞

本文应用逆转录病毒载体pZIP Neo SV(X)介导人GM-CSF基因转染肿瘤细胞获得表达。经Lipofectin将含有人GM-GSF基因的重组逆转录病毒载体pZIP-GM转染兼性病毒包装细胞系PA317,继之用病毒收获液感染人肝癌细胞SMMC7721和人胃癌细胞BGC-823,经GM-CSF依赖细胞株TF1测活和双抗夹心法ELISA测定表明:人GM-CSF基因在人肿瘤细胞中获得稳定高效表达。为进一步建立GM-CSF的转基因治疗模型提供了基础。