全文获取类型
收费全文 | 5748篇 |
免费 | 372篇 |
国内免费 | 358篇 |
专业分类
6478篇 |
出版年
2024年 | 12篇 |
2023年 | 81篇 |
2022年 | 167篇 |
2021年 | 303篇 |
2020年 | 170篇 |
2019年 | 209篇 |
2018年 | 235篇 |
2017年 | 175篇 |
2016年 | 226篇 |
2015年 | 358篇 |
2014年 | 390篇 |
2013年 | 493篇 |
2012年 | 549篇 |
2011年 | 430篇 |
2010年 | 277篇 |
2009年 | 244篇 |
2008年 | 252篇 |
2007年 | 249篇 |
2006年 | 235篇 |
2005年 | 217篇 |
2004年 | 141篇 |
2003年 | 117篇 |
2002年 | 117篇 |
2001年 | 118篇 |
2000年 | 90篇 |
1999年 | 119篇 |
1998年 | 50篇 |
1997年 | 63篇 |
1996年 | 53篇 |
1995年 | 29篇 |
1994年 | 36篇 |
1993年 | 31篇 |
1992年 | 41篇 |
1991年 | 35篇 |
1990年 | 29篇 |
1989年 | 23篇 |
1988年 | 19篇 |
1987年 | 13篇 |
1986年 | 19篇 |
1985年 | 13篇 |
1984年 | 8篇 |
1983年 | 7篇 |
1982年 | 6篇 |
1981年 | 11篇 |
1980年 | 4篇 |
1976年 | 3篇 |
1974年 | 2篇 |
1972年 | 2篇 |
1969年 | 2篇 |
1966年 | 1篇 |
排序方式: 共有6478条查询结果,搜索用时 0 毫秒
71.
72.
三聚氰胺胶体金免疫层析试纸条的研制 总被引:3,自引:0,他引:3
通过胶体金免疫层析技术建立一种特异、便捷、快速的三聚氰胺抗原检测方法,对奶制品及饲料中的三聚氰胺残留水平监测提供参考。用柠檬酸三钠还原法制备的胶体金,标记纯化的三聚氰胺单克隆抗体,喷于试纸的金标垫。将MEL-OVA(三聚氰胺和卵清白蛋白的偶练物)和纯化的羊抗鼠IgG分别喷于试纸的T(检测线)处和C(质控线)处,通过挑选试纸条材料和调试工艺参数,并最终组装成试纸条。结果显示,制备的试纸监测体系方法检出限为50 g/L。试纸条对牛奶、奶粉和饲料中的三聚氰胺残留的检出限分别为100 g/L、100 ng/g和200 ng/g。将该法与LC-MS/MS法对比检测牛奶、奶粉和饲料样品,在试纸条检测范围内,与LC-MS/MS法检测结果一致性好,从而验证了该方法的有效性。制备的三聚氰胺胶体金检测试纸在常温干燥环境下至少可保质6个月,能够检测出三聚氰胺含量大于50 g/L的样品,适用于现场实际样品三聚氰胺残留水平监测,具有良好的应用前景。 相似文献
73.
蛋白的糖基化对蛋白的活性、高级结构及功能都有重要的影响。酵母表达的糖蛋白不同于哺乳动物表达的杂合型或复杂型糖蛋白,而是高甘露糖型或过度甘露糖化糖蛋白。在前期成功敲除毕赤酵母α-1,6-甘露糖转移酶(Och1p)基因、阻断毕赤酵母过度糖基化,获得毕赤酵母过度糖基化缺陷菌株GJK01 (ura3、och1) 的基础上,通过表达不同物种来源的α-1,2-甘露糖苷酶I (MDSI) 的活性区与酵母自身定位信号的融合蛋白,并通过DSA-FACE (基于DNA测序仪的荧光辅助糖电泳) 分析筛选报告蛋白HSA/GM-CSF (人血清白蛋白与粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子融合蛋白) 的糖基结构,发现当编码酿酒酵母α-1,2-甘露糖苷酶 (MnsI) 基因的内质网定位信号与带有完整C-端催化区的拟南芥MDSI基因融合表达时,毕赤酵母工程菌株能够合成Man5GlcNAc2哺乳动物甘露糖型糖蛋白。这为在酵母体内合成类似于哺乳动物杂合型或复杂型糖基化修饰的糖蛋白奠定了基础。 相似文献
74.
γ-氨基丁酸对低氧胁迫下甜瓜幼苗多胺代谢的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
以‘西域一号’甜瓜为试验材料,采用营养液水培法,研究了低氧胁迫下外源添加γ-氨基丁酸(GABA)对甜瓜幼苗多胺代谢的影响.结果表明:与通气对照相比,低氧胁迫处理的甜瓜幼苗谷氨酸脱羧酶(GAD)活性和GABA含量显著提高,同时多胺合成酶活性提高诱导多胺含量显著增加,但二胺氧化酶(DAO)和多胺氧化酶(PAO)活性也显著提高;根系精氨酸脱羧酶(ADC)活性提高幅度较大,导致根系游离态腐胺含量较高,而叶片乌氨酸脱羧酶(ODC)和S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶(SAMDC)活性提高幅度较大,导致叶片游离态亚精胺(Spd)含量较高;根系游离态DAO和PAO活性显著低于叶片,其细胞壁结合态PAO活性显著高于叶片.与低氧胁迫处理相比,低氧胁迫下外源添加GABA处理的甜瓜幼苗叶片和根系中GABA和谷氨酸含量均显著提高,而GAD活性显著降低;精氨酸、鸟氨酸、甲硫氨酸含量的提高促使多胺合成酶活性显著提高,从而诱导多胺含量显著增加,DAO和PAO活性显著降低. 相似文献
75.
In this study, the anammox consortium was found to adapt to the wastewater containing dissolved oxygen (DO), as the DO was gradually increased. Batch tests indicated the maximum aerobic ammonium oxidizing activity of the consortium was 1.38mmolNH(4)(+)-N(gVSS)(-1)day(-1), which played key roles in the oxygen consumption process; the maximum anaerobic ammonium oxidizing activity was slightly decreased after long-term oxygen exposure, but only from 21.23mmolNH(4)(+)-N(gVSS)(-1)day(-1) to 20.23mmolNH(4)(+)-N(gVSS)(-1)day(-1). Microbiological community analysis identified two strains similar to Nitrosomonas eutropha were responsible for oxygen consumption, which were able to exist in the autotrophic anaerobic condition for long periods and protect anammox bacteria Planctomycetales from the influence of oxygen. Microbiological composition analysis showed Nitrosomonas and Planctomycetales approximately accounted for 10% and 70% of the bacteria, respectively. The possibility of cultivation anammox consortium in presence of DO will lead to substantial savings of energy and resource in the industrial application. 相似文献
76.
77.
[目的]本试验旨在筛选引导表达外源木聚糖酶基因高效分泌的信号肽,为枯草芽胞杆菌木聚糖酶高效分泌表达系统提供元件.[方法]构建信号肽筛选载体,载体是以含壮观霉素抗性基因的大肠-枯草穿梭载体为基本骨架,目标蛋白为耐碱性木聚糖酶,可在麦芽糖启动子Pglv诱导下表达.从枯草芽胞杆菌A1747基因组中扩增获得24个Sec途径信号肽,并将其全部链接到至筛选载体上,并在枯草芽胞杆菌WB700中实现表达分泌.重组菌在3%麦芽糖诱导下培养24h后用DNS法测定上清酶活.[结果]成功构建信号肽筛选载体pGPSX及24个表达载体,实现木聚糖酶表达分泌.且不同信号肽对于引导外源木聚糖酶分泌能力不同,其中YnfF信号肽引导分泌目标蛋白效率最高,上清酶活为37.2IU/mL.[结论]试验证明在枯草杆菌中对外源蛋白进行信号肽筛选是提高其分泌的有效途径,并获得了针对木聚糖酶高效分泌信号肽YnfF. 相似文献
78.
79.
80.
[目的]探讨ompH基因在禽多杀性巴氏杆菌致病过程中的作用.[方法]利用同源重组原理构建中间为四环素抗性基因,两侧为ompH基因上下游同源序列同源的敲除载体pWSK29△ompH,将敲除载体电击转入C48-3株感受态细胞中,通过四环素抗性和菌落PCR筛选ompH基因的敲除突变株,并通过组合PCR、逆转录PCR和DNA测序对突变株进行验证.用生物学功能实验比较野生株、互补株和突变株在生长速率、荚膜结构、粘着能力和致病性等方面的差异.[结果]组合PCR、逆转录PCR和DNA测序结果证实ompH基因的敲除突变株C48-3△ompH构建成功,电镜观察结果证实ompH基因的缺陷影响细菌的荚膜合成能力,粘附实验结果显示与野生株C48-3和互补株C48-3C相比突变株C48-3△ompH对CEF细胞的粘附能力显著降低(P<0.01),而小鼠毒力实验结果表明突变株C48-3△ompH的致病性相对减弱.[结论]本实验构建的突变株C48-3△ompH,为进一步研究多杀性巴氏杆菌的致病机理奠定基础. 相似文献