Expression of thymidine kinase and dihydrofolate reductase genes in mammalian ts mutants of the cell cycle

Thymidine kinase and dihydrofolate reductase mRNA levels and enzyme activities were determined in two temperature-sensitive cell lines, tsAF8 and ts13, that growth arrest in the G1 phase of the cell cycle at the restrictive temperature. The levels of thymidine kinase mRNA and enzyme activity increased markedly in both cell lines serum stimulated from quiescence at the permissive temperature. At the nonpermissive temperature, the levels of thymidine kinase mRNA and enzyme activity remain at the low levels of quiescent G0 cells. The levels of dihydrofolate reductase mRNA as well as the enzyme activity also increase when both cell lines are serum stimulated at the permissive temperature. When ts13 cells are serum stimulated at the nonpermissive temperature dihydrofolate reductase enzyme activity declines rapidly and dihydrofolate reductase mRNA is below detectable levels. On the contrary, when tsAF8 cells are serum stimulated at the nonpermissive temperature dihydrofolate reductase enzyme activity increases and mRNA levels are detectable slightly above G0 levels, even though the cells are blocked in the G1 phase. Studies with 2 other cDNA clones (one with an insert whose expression is cell cycle dependent and the other with an insert whose expression is not cell cycle dependent) indicate that the results are not due to aspecific toxicity or the effect of temperature. We conclude that the expression of different genes is affected differently by the ts block in G1, even when these genes are all growth-related.     

硫胺素、核黄素和烟酰胺对大鼠体重增长及脂代谢影响的实验研究

目的：B族维生素以辅酶的形式参与糖、脂肪和蛋白质代谢,本文观察硫胺素、核黄素和烟酰胺补充对高脂饲料诱导大鼠肥胖的影响。方法：采用预防肥胖模型法,2×2×2析因设计分为8组：高脂对照组（F0组）,高脂＋硫胺素（F1组）,高脂＋核黄素（F2组）,高脂＋烟酰胺（F3组）,高脂＋硫胺素＋核黄素（F4组）,高脂＋硫胺素＋烟酰胺（F5组）,高脂＋核黄素＋烟酰胺（F6组）,高脂＋硫胺素＋核黄素＋烟酰胺（F7组）,每组12只大鼠,给予高脂饲料喂养,同时硫胺素（100mg／kgbw／d）、核黄素（100mg／kgbw／d）、烟酰胺（250mg／kgbw／d）灌胃,另设正常对照组（C组）12只,普通饲料喂养,自来水灌胃,15周后,分析其体重、摄食量、体脂重量、血脂等实验前后的变化情况及各组动物之间的差别。结果：经过15周喂养后,高脂喂养大鼠体重比正常对照组平均增加了15．7％;而补充烟酰胺（F3）及联合硫胺素（F5）或核黄素（F6）以及三者联合补充（F7）组高脂喂养大鼠与高脂对照组（F0）相比,体重分别降低了35．0％,30．0％,30．1％和30．6％（P值均小于0．05）;甚至比正常对照组大鼠平均体重分别下降了22．8％,17．0％,17．0％和17．7％（P值均小于0．05）;而补充核黄素或和硫胺素组大鼠体重没有明显增加或降低（P值均大于0．05）。血脂分析结果显示高脂喂养并联合补充核黄素或／和烟酰胺和／或硫胺素组大鼠血清CHOL和LDL水平明显低于高脂对照组;而高脂喂养并联合补充烟酰胺（F3）及联合硫胺素（F5）或核黄素（F6）以及三者联合补充（F7）组大鼠LDL／HDL比值分别0．29、0．26、0．25和0．26,明显低于F0组的0．37（P值均小于0．05）。结论：大剂量烟酰胺可有效地调节血脂水平和控制肥胖大鼠的体重增长,而核黄素及硫胺素对控制肥胖     

SARS病毒核衣壳蛋白、膜蛋白在大肠杆菌中的高效表达和纯化

通过反转录PCR获得了SARS冠状病毒核衣壳蛋白(N)和膜蛋白(M)基因,其序列分析结果与加拿大多伦多株完全一致。将M基因和N基因克隆到大肠杆菌表达载体pET22b和pBV222上,并在大肠杆菌中以包涵体及可溶形式获得高效表达。通过离子交换、金属螯合层析纯化获得电泳纯制品。所获得的核衣壳蛋白具有良好的抗原性,可用于抗SARS抗体检测及亚单位疫苗研究。     

小型猪腹壁拉链模型的建立

目的建立小型猪腹壁拉链模型并对其生物学特性进行研究,为教学和科研工作的开展提供便利的研究工具。方法通过外科手术的方法将定制的生物拉链固定于小型猪体表,建立小型猪腹壁拉链模型,观察小型猪的体征和精神状态,利用全自动血液分析仪及尿液分析仪对其血液和尿液生化指标进行动态检测。结果模型建立后7-49d小型猪的活动、精神状态良好,其生理生化指标表现稳定,与对照相比无显著变化。结论本课题组建立的小型猪腹壁拉链模型建立后7-49d体征、精神状况良好,生理生化指标稳定,可以推广应用于相关的科研、教学试验。     

人脐静脉血管内皮细胞的分离、培养、鉴定及试验研究

血管内皮细胞体外培养,在血管再生、新血管生成机理、内皮细胞在心血管系统疾病中的作用、内皮细胞与造血的关系等方面的研究中有很高的应用价值。本研究借鉴了前人的工作,建立了胶原酶灌流消化获得人脐静脉血管内皮细胞并进行体外培养的方法,探讨了影响人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）分离培养的影响因素。同时应用建立的HUVEC体外培养进行了内皮抑素的抑制活性检测,证明了内皮抑素对于激活增殖的HUVEC的抑制作用,为今后的试验研究打下了基础。     

RT—PCR法检测大鼠脑组织及C6细胞中β—APP的表达

β-淀粉样蛋白(β-AP)是阿尔茨海默氏病(Alzheimer’s disease)病人老年斑的主要成分,它是β-淀粉样前体蛋白(β-APP)剪切后的产物。β-APP基因在体内存在β-APP_(695),β-APP_(751)β-APP_(770)。等几种主要的转录物,它们的区别在于Kunize丝氨酸蛋白酶抑制区(KDI)编码序列的存在和缺失。通过RT-PCR技术,用针对KPI编码区两侧序列的一种特异性引物可由总RNA样品中扩增出反映以上三种转录物的cDNA片段。实验表明,胎鼠脑组织中未检测到β-APPmRNA;6月龄大鼠海马组织,大脑皮层中只检测到β-APP_(695);在神经胶质瘤细胞系C6中存在β-APP_(695),β-APP_(751),β-APP_(770),其中β-APP_(770)占优势。     

试论长臂猿的中国起源

本文通过中国长臂猿的地理地史分布, 尤其是亚洲新第三纪(Neogene Period) 中新世(Miocene) 的上猿(Pliop ithecus)、醉猿(Diony sopithecus shuang ouensis)、池猿(L accop ithecusrobustus)、滇猿(Dianopithecus progressus) 及第四纪(Quaternary Period) 更新世(Pleistocene Epoch) 丰富的黑长臂猿(Hylobates concolor) 等化石的发现, 结合现生类群的分布和黑长臂猿的行为生态研究结果等有关资料综合论述了现生长臂猿的亚洲中国起源; 黑长臂猿则是解决这一问题的关键物种。     

太白山自然保护区羚牛分布的初步调查

羚牛（Ｂｕｄｏｒｃａｓｔａｘｉｃｏｌｏｒ）,为国家一级保护野生动物。羚牛秦岭亚种为我国特产亚种,分布于甘肃、陕西两省。在陕西省内分布于秦岭中、西段。羚牛在太白山自然保护区的分布情况,迄今仅见一些零星报道［１,２］。１９９６年６～９月,作者在太白山自然...     

渤海水母体细菌的微生态分布及弧菌生物学特性

采用稀平板法对我国辽宁渤海海域水母体中细菌的微生态分布进行了考察,结果表明,在渤海水母体中各部位均有腐生性细菌及弧菌生长,其中腐生性细菌主要存在于水母体现,而弧菌除存在于水母体表外,有的则能在水母体内深层生长,水母体细菌微生态研究结果表明,弧菌的占细菌总数的90％以上,通过改进TCBAS培养基,从水母体中分离得到6株优势类群的细菌,对其菌落特征、菌体形态、生理生化特性进行了研究,它们都具备弧菌属的共同特点：革兰氏阴性,氧化酶阳性,兼性厌氧,TCBS培养基上能生长,对O／129敏感,初步鉴定为弧菌属,研究还发现,这几株菌都能产蛋白酶,其中JF2、JF4、JF5、JF6产蛋白酶的能力明显较强,它们极有可能是导致水母捕捞后快速解体腐败的主要原因。     

锌指结构：最普遍的核酸识别元件

锌指是最大的DNA结合蛋白家庭,是识别DNA最有效、最成功的一种结构元件。其模块性结构特点及与核酸作用的相对简单性,使其成为研究蛋白-核酸相互作用的理想材料,以及人为设计筛选新的核酸结合蛋白的最佳元件。