大肠杆菌甘油激酶基因(glpK)和甘油脱氢酶基因(gldA)的敲除及其对甘油产量的影响

利用Red重组系统构建了大肠杆菌JM109甘油激酶基因(glpK)和甘油脱氢酶基因(gldA)缺失的双突变菌株JM109B,然后将表达酿酒酵母3-磷酸甘油脱氢酶基因(GPD1)和3-磷酸甘油酯酶基因(HOR2)的质粒pSE-gpd1-hor2转化到JM109B突变菌株中,在含1%葡萄糖的摇瓶发酵培养基中37℃发酵24 h,甘油的最高产量为5.61 g/L,是原始菌株JM109/pSE-gpd1-hor2甘油产量的1.59倍;在30 L发酵罐中发酵28 h,甘油的最高产量为103.12 g/L,是原始菌株JM109/pSE-gpd1-hor2甘油产量的1.59倍,是原始菌株BL21/pSE-gpd1-hor2甘油产量的1.41倍,葡萄糖转化率为50.39%。     

超临界CO_2萃取和水蒸汽蒸馏法研究乌药中挥发性有机物

用超临界CO2萃取法(SFE-CO2)和水蒸汽蒸馏法(SD)对乌药中挥发性有机物进行提取,并运用GC-MS法分析了2种提取物中的化学成份。结果表明:SFE-CO2法提取物的产率为6.67%,SD法提取物的产率为0.60%;两种方法提得的乌药挥发性有机物中共鉴定出58个成分,其中SFE-CO2法和SD法提取物被鉴定的成分分别为46个和36个,共有成分24个,主要有柠檬烯、龙脑、龙脑乙酸酯、β-榄香烯、α-古云烯、桉叶4(14),11-二烯、δ-愈创木烯、4,4′-二甲基-2,2′-二亚甲基双环己基-3,3′-二烯、tau-杜松醇、β-桉叶油醇、8-甲基-2-苯基-4,7-二烯-2-壬醇、(2-[2-(2,4-二甲基苯基)环丙基]呋喃)等成分,占SFE-CO2法提取物被鉴定成分的54.56%,占SD法提取物被鉴定成分的78.42%。     

军队医院医务工作者潜在的心理问题及影响因素分析*

摘要目的：近年来医务人员工作压力过重而引起的心理疾病日益突出,引起社会各界的关注。本研究针对军队医院医务人员的 心理压力及工作满意度情况展开调查,分析影响该群体心理健康的因素,探讨改善心理环境的有效方法,为提升军队医院管理提 供参考。方法：对我院312 名医务人员的基本资料、心理应激及工作满意度情况进行问卷调查,分析影响军队医院医务人员心理 健康的危险因素。结果：医务人员的心理压力主要表现为焦虑、抑郁、敏感和偏执,工作中普遍不满的是工资福利、工作负荷、晋升 及人际关系。医务人员所处的岗位和职称等级不同,其心理压力与工作满意度也不同。临床医师与护理人员的心理压力均较高, 医技与行政人员的工作满意度较高(P<0.05);初级职称与中级职称医务人员的心理压力较高,副高级职称与高级职称人员的工作 满意度较高,组间数据比较差异显著(P<0.05)。结论：军队医院的管理人员应完善管理机制,创造良好的发展平台,改善军队医院 医务人员的心理环境,促进医院的发展。     

低氧提高肿瘤细胞反义VEGF165基因表达

为了探讨反义VEGF1 65基因对食管癌的抑制作用 ,并初步探讨利用肿瘤低氧微环境改善基因治疗的效果 ,采用PCR技术和DNA重组技术构建了含低氧反应元件的真核表达载体 ,并用此载体构建了含荧光素酶报告基因和反义VEGF1 65基因的重组载体。用脂质体将重组载体导入食管癌细胞 ,体外用化学发光光度计测定低氧对报告基因表达的调节和ELISA法间接测定低氧对反义VEGF基因表达的调节作用。体内利用裸鼠皮下移植实验研究低氧对反义VEGF1 65基因抑瘤作用的影响。体外实验表明 ,用带低氧反应元件的重组真核表达载体转染食管癌细胞 ,在低氧培养下可以使报告基因的表达提高 3 780 % ,并可以显著提高反义VEGF1 65基因的表达 ,体内用带低氧反应元件的载体将反义VEGF1 65基因导入食管癌细胞中 ,其抑瘤效果显著优于不含该元件的载体 ,抑瘤率分别为 71 .7%和 5 6 .1 %。反义VEGF1 65基因能显著抑制食管癌的生长 ;利用肿瘤低氧可以实现治疗基因的自主调节 ,改善基因治疗的效果     

桔小实蝇雄成虫联系性嗅觉学习

【目的】为了探究桔小实蝇 Bactrocera dorsalis (Hendel)雄成虫的嗅觉学习能力。【方法】本研究采用经典性嗅觉条件反射训练法（classical olfactory conditioning）在室内对固定的羽化后14-17日龄的桔小实蝇雄成虫进行气味与食物的联合学习训练, 即薄荷精油和10%蔗糖溶液联合的奖赏性训练（appetitive conditioning）以及甲基丁香酚(methyl eugenol, ME)和饱和盐溶液联合的惩罚性训练（aversive conditioning）,并以伸喙反射行为（proboscis extension reflex, PER）作为学习与否的判定标准。【结果】经过奖赏性训练后,桔小实蝇雄成虫对薄荷精油的伸喙反射率可从0%增加至68%;而经过惩罚性训练后,桔小实蝇对甲基丁香酚的伸喙反射率可从100%降低至36.54%,且这种伸喙反射率的变化是通过气味条件刺激（conditioned stimulus）和食物非条件刺激（unconditioned stimulus）的对称性联合而产生的。【结论】结果表明,桔小实蝇雄性成虫具有较强的联系性嗅觉学习能力,并且两种刺激的联合是形成学习记忆的必要条件。     

低强度He-Ne激光对红细胞胞浆内游离钙离子浓度的影响

低强度He-Ne激光对红细胞变形性的影响已得到广泛的认可和应用,但其具体调节机制尚不明确,通过研究低强度He-Ne激光对红细胞胞浆内钙离子浓度的影响,探讨其对红细胞变形性影响的机制。采用A23187处理过的红细胞,分别用5 mW和9 mW激光照射后,观察红细胞胞浆内钙离子浓度变化。结果显示:低强度He-Ne激光照射后的红细胞与无照射组的红细胞相比,红细胞胞浆内钙离子浓度显著降低,但在本实验中钙离子浓度的降低与激光照射剂量无显著相关。由此得出结论:降低红细胞胞浆内钙离子浓度可能是低强度He-Ne激光调节红细胞变形性的重要机制。     

不同粘度对比剂对冠状动脉造影患者肾功能的影响*

摘要目的：对比剂肾病（CIN）是介入治疗中常见并发症之一。由于对比剂肾病发病机制复杂,其确切的机制尚不明确,有研究认 为应用渗透压相似的对比剂,高粘度组对比剂引起CIN 的几率明显高于低粘度组。本研究探讨接受不同粘度对比剂冠状动脉造 影检查的患者术后引起肾功能损害的差异及其可能的机制。方法：80 例接受冠状动脉造影检查的患者随机分为两组,分别为20 ℃碘海醇组、37 ℃碘海醇组,每组各40 例。分别于冠脉造影前8h、冠脉造影后48 h采集同一患者肘正中静脉血进行血清肌酐 （Scr）、血清胱抑素C（CysC）检测,并对数据进行统计学分析。结果：两组患者组间比较基本资料无明显差异,两组患者术后Scr、 CysC 较术前均升高,差异均有统计学意义（P<0.05）;20 ℃碘海醇组术后Scr较37 ℃碘海醇组升高不明显,差异无统计学意义 （P>0.05）;20 ℃碘海醇组术后CysC 较37 ℃碘海醇组升高明显,差异有统计学意义（P<0.05）。结论：冠脉造影检查时,对比剂对患 者的肾功能有损害;选择低粘度对比剂可能减少其对冠状动脉造影患者的肾功能的不良影响;其作用机制可能与对比剂改变血 液粘滞性,从而影响肾血流有关。     

应用变性梯度凝胶电泳和16SrDNA序列分析对kefir粒中细菌多样性的研究

以开菲尔（Kefir）粒为材料,经过DNA抽提和16SrDNA V3区PCR扩增,扩增产物经变性梯度凝胶电泳（DGGE）分离并切割电泳条带进行序列测定,并与现有的数据库进行了比较,对Kefir粒的细菌多样性进行分析。结果表明,DGGE图谱中可检测到的8条带的16SrDNA基因序列中有7个基因序列与GenBank数据库登录的相关序列的相似性大于98％,余下的1个基因序列的相似性也大于96％。相似性大于98％的7个克隆中,有3个属于鞘氨醇杆菌属（Sphingobacterium）,2个属于乳杆菌属（Lactobacillus）,其它2个分别属于肠杆菌属（Errterobacter）和不动杆菌属（Acinetobacter）。首次报道了鞘氨醇杆菌作为优势菌群存在开菲尔Kefir粒中。     

Net annual global warming potential and greenhouse gas intensity in Chinese double rice‐cropping systems: a 3‐year field measurement in long‐term fertilizer experiments

The impact of agricultural management on global warming potential (GWP) and greenhouse gas intensity (GHGI) is not well documented. A long‐term fertilizer experiment in Chinese double rice‐cropping systems initiated in 1990 was used in this study to gain an insight into a complete greenhouse gas accounting of GWP and GHGI. The six fertilizer treatments included inorganic fertilizer [nitrogen and phosphorus fertilizer (NP), nitrogen and potassium fertilizer (NK), and balanced inorganic fertilizer (NPK)], combined inorganic/organic fertilizers at full and reduced rate (FOM and ROM), and no fertilizer application as a control. Methane (CH₄) and nitrous oxide (N₂O) fluxes were measured using static chamber method from November 2006 through October 2009, and the net ecosystem carbon balance was estimated by the changes in topsoil (0–20 cm) organic carbon (SOC) density over the 10‐year period 1999–2009. Long‐term fertilizer application significantly increased grain yields, except for no difference between the NK and control plots. Annual topsoil SOC sequestration rate was estimated to be 0.96 t C ha^?1 yr^?1 for the control and 1.01–1.43 t C ha^?1 yr^?1 for the fertilizer plots. Long‐term inorganic fertilizer application tended to increase CH₄ emissions during the flooded rice season and significantly increased N₂O emissions from drained soils during the nonrice season. Annual mean CH₄ emissions ranged from 621 kg CH₄ ha^?1 for the control to 1175 kg CH₄ ha^?1 for the FOM plots, 63–83% of which derived from the late‐rice season. Annual N₂O emission averaged 1.15–4.11 kg N₂O–N ha^?1 in the double rice‐cropping systems. Compared with the control, inorganic fertilizer application slightly increased the net annual GWPs, while they were remarkably increased by combined inorganic/organic fertilizer application. The GHGI was lowest for the NP and NPK plots and highest for the FOM and ROM plots. The results of this study suggest that agricultural economic viability and GHGs mitigation can be simultaneously achieved by balanced fertilizer application.     

毛竹的花药发育研究

竹类植物因有着较长的开花周期,其生殖生物学研究的报道相对较少。该研究采用石蜡切片与野外观察的方法,对毛竹花药的发育以及花药发育与花序的关系进行了研究。结果表明:毛竹的花药壁结构包括4层细胞:表皮细胞、药室内壁细胞、中层细胞和绒毡层细胞。药室内壁和中层都只有一层细胞,而且细胞形状较扁,花药发育后期药室内壁会逐渐降解,而中层则会完全解体消失。花药壁的发育为单子叶型,绒毡层为腺质型,而且只有一层,细胞径向较长,最后也会消失。小孢子母细胞减数分裂时,胞质分裂方式为连续型。形成的小孢子经一次有丝分裂后逐渐形成成熟花粉粒,大多为二细胞型,很少产生三细胞型。此外,还发现毛竹花药的发育与花序形态变化存在着相对应的关系。野外连续观察和切片发现,随着花序形态的不断发育变化,首先花药开始形成并不断分化,药壁备层也逐渐形成;接着小孢子逐渐成熟,备层也慢慢随之解体、消失;最后花药逐渐开裂并开始散粉。该研究结果不仅丰富了毛竹和竹类生殖生物学的研究内容,而且对毛竹种质的研究也具有重要意义。