全文获取类型
收费全文 | 5903篇 |
免费 | 968篇 |
国内免费 | 3939篇 |
专业分类
10810篇 |
出版年
2024年 | 93篇 |
2023年 | 234篇 |
2022年 | 386篇 |
2021年 | 334篇 |
2020年 | 380篇 |
2019年 | 439篇 |
2018年 | 283篇 |
2017年 | 287篇 |
2016年 | 291篇 |
2015年 | 414篇 |
2014年 | 651篇 |
2013年 | 528篇 |
2012年 | 664篇 |
2011年 | 666篇 |
2010年 | 553篇 |
2009年 | 538篇 |
2008年 | 593篇 |
2007年 | 604篇 |
2006年 | 531篇 |
2005年 | 459篇 |
2004年 | 344篇 |
2003年 | 285篇 |
2002年 | 257篇 |
2001年 | 255篇 |
2000年 | 214篇 |
1999年 | 138篇 |
1998年 | 62篇 |
1997年 | 66篇 |
1996年 | 36篇 |
1995年 | 28篇 |
1994年 | 19篇 |
1993年 | 20篇 |
1992年 | 23篇 |
1991年 | 10篇 |
1990年 | 13篇 |
1989年 | 14篇 |
1988年 | 17篇 |
1987年 | 7篇 |
1986年 | 10篇 |
1985年 | 14篇 |
1984年 | 14篇 |
1983年 | 4篇 |
1982年 | 19篇 |
1981年 | 8篇 |
1980年 | 1篇 |
1965年 | 1篇 |
1950年 | 2篇 |
1948年 | 1篇 |
排序方式: 共有10000条查询结果,搜索用时 15 毫秒
71.
72.
目的:利用原核表达和蛋白质纯化技术获得高纯度的幽门螺杆菌致病岛CagL重组抗原(rCagL),利用其制备anti-CagL多克隆抗体,并分析抗体的特异性。方法:通过生物信息学软件分析rCagL的抗原结构;利用PCR长片段DNA合成技术合成不含有信号肽序列的幽门螺杆菌致病岛CagL基因,将其插入表达质粒pCzn1中,构建重组质粒pCzn1-rCagL。然后,将pCzn1-rCagL转入大肠杆菌Arctic Express中,经IPTG诱导表达后,通过Ni-IDA镍离子亲和层析纯化重组抗原rCagL,利用Western blot鉴定rCagL与His标签抗体和Anti-H. pylori抗体的免疫反应性;最后,通过rCagL辅以弗氏佐剂免疫BALB/c小鼠,制备anti-CagL多克隆抗血清,通过ELISA方法分析抗血清的特异性。结果:生物信息学软件表明重组抗原rCagL具有较好的抗原性质;重组质粒pCzn1-rCagL经双酶切和基因测序等技术鉴定,证实rCagL核苷酸序列与理论序列完全一致;基因工程菌株pCzn1-rCagL/Arctic Express在低温11℃条件经IPTG诱导表达。 SDS-PAGE实验结果证实:rCagL可实现相对高效地可溶性蛋白表达,可溶性蛋白约占包涵体的62.07%。经Ni-IDA亲和层析柱纯化,可获得高纯度rCagL,纯度约为96.6%。Western blot结果证实:重组抗原rCagL可特异性与His标签抗体和Anti-H. pylori抗体结合。ELISA结果证实:经rCagL免疫小鼠制备的多克隆抗体anti-CagL可特异性识别rCagL和H. pylori裂解物,具有较高的抗体特异性。结论:重组抗原rCagL在低温条件下可实现可溶性表达,经纯化可获得高纯度抗原蛋白;rCagL具有较好的抗原性,制备的多克隆抗体具有较好的免疫特异性,为发展H. pylori相关诊断试剂奠定了实验基础。 相似文献
73.
基于MODIS卫星火点的浙江省林火季节变化及驱动因子 总被引:3,自引:0,他引:3
研究林火变化趋势和驱动因子,可为林火预防和管理提供科学依据。本研究基于MODIS卫星火点数据,结合气象(日平均风速、日平均温度、日相对湿度、气温日较差、日累计降水)、人为(到公路距离、到铁路距离、到居民点距离、人口密度、人均GDP)、地形和植被因素(高程、坡度、植被覆盖度),运用趋势分析法、Logistic回归模型,对浙江省2001—2016年林火变化趋势和驱动因子进行研究。结果表明: 浙江省春、夏季林火呈显著上升趋势,秋、冬季林火呈先上升后下降趋势,秋季下降趋势显著。浙江省各季节林火预测模型拟合度均较高,模型预测准确率分别为75.8%(春季)、79.1%(夏季)、74.7%(秋季)和79.6%(冬季)。浙江省春、夏季林火发生与变化受气象、人为、地形和植被因素的显著影响;秋、冬季林火发生与变化主要受气象因素影响。在影响因素复杂、高火险区域分散的春、夏季,林火管理应重点加强人为活动管理和防火宣传教育;在秋、冬季,可通过在高火险区集中分布的西南地区增设瞭望塔和监控设备进行监测和管理。 相似文献
74.
目的:探索大鼠胰腺发育过程中AFP动态表达的意义.方法:采用高密度寡核苷酸芯片对胚胎12.5天(E12.5)、E15.5、E18.5、初生和成年大鼠胰腺进行基因转录水平分析.结果:AFP显著高表达于E18.5大鼠胰腺,AFP在胚胎期的动态表达趋势与胰腺功能细胞标志物以及可能介导AFP促细胞增殖效应的有关信号系统成员的表达趋势一致.结论:AFP在大鼠胰腺发育过程中动态表达的生物学意义可能在于参与胰腺发育调控. 相似文献
75.
76.
为研究CSFV强毒感染对猪外周血白细胞的影响,本研究用猪瘟病毒石门株(CSFV SM)感染60日龄仔猪后,分析外周血中CSFV核酸载量动态变化、白细胞亚群变化和白细胞SLAⅠ和SLAⅡDR分子的表达情况。实验结果显示:实验仔猪经CSFV感染后48小时体温升高并可以在血液中检测到CSFV核酸,核酸载量持续升高,在感染后6日(DPI)达到最大值,为2 DPI时核酸载量的104.84±0.98倍;WBC、LYM、PLT数量持续降低,WBC在1DPI和2DPI分别降至65.87%和50.00%,LYM在1~3DPI分别降至70.68%、47.88%和23.29%,PLT数量持续降低,6DPI时仅为初始值的34.59%;NK、γδT、Tc、Th、CD3+CD4+CD8+和CD3-CD4-CD8-淋巴细胞在感染后均不同程度的减少,其中NK细胞在1DPI时减少78.49%,而后变化与1DPI比较差异不显著,γδT、Tc、CD3-CD4-CD8-、CD3+CD4+CD8+在3DPI时分别降至41.74%、43.83%、15.87%和32.96%,Th细胞在感染后持续下降,在6DPI时减少至42.95%;感染后淋巴细胞中表达S... 相似文献
77.
目的:探讨X 连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)和survivin 在原发性肝细胞癌中的表达及两者的相关性。方法:选取本院收治的60
例原发性肝细胞癌患者,应用免疫组织化学染色的方法对肝癌组织及癌旁组织中的XIAP及survivin 的表达进行检测。结果:经
比较,肝癌组织中XAIP 及survivin 的阳性率均显著高于癌旁组织,差异有统计学意义。XIAP 和survivin 的表达强度与肿瘤的大
小无关,但随肿瘤的分化程度的降低而升高,且不同分化程度之间差异有统计学意义;XIAP 和survivin 存在正相关关系。结论:
XIAP与Survivin 在肿瘤组织中的高表达在促进肿瘤发生、增殖、转移以及耐药,并且能够降低肿瘤的分化程度,增加肝癌的恶性
程度。此外,两者可能存在协同作用,但两者的相关性及作用机制仍需进一步探讨。 相似文献
78.
目的:探讨尿液干化学法及免疫透射比浊法检测尿白蛋白结果的差异性及相关性。方法:对514例住院患者随机尿标本进行尿液干化学法及免疫透射比浊法尿蛋白的检测。结果:尿液干化学法阳性率为82.1%,免疫透射比浊法阳性率为72.8%。两种方法检测结果均为阴性标本的符合率为98.9%,为(±)的标本二者符合率为69.7%,为㈩的标本二者符合率为75.6%,为(++)的标本二者符合率为67.2%,为(卅)标本中二者符合率为42.5%,为(++H)标本二者的符合率为37.5%。两种方法的检测结果有显著性差异(P〈O.05);UmAlb/Ucr、NAG、和NAG/Ucr与UmAlb具有显著相关(P〈0.05),且UmAlb/Ucr与UmAlb的相关性最高。两种方法所得等级结果比较,++~卅之间差异有统计学意义(P〈0.05),-~±、±~+、+~++、+++~++++之间差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论:尿蛋白定性与定量检测结果存在显著性差异,而UmAlb/Ucr与UmAlb相关性较高。在泌尿系统疾病的诊断中,检测尿中UmAlb比尿常规更有意义。 相似文献
79.
王战强郭建军徐利泉夏斌裴俊贾文明张彦生 《现代生物医学进展》2012,12(9):1693-1695
目的:探讨经尿道绿激光膀胱肿瘤汽化术的手术方法、近期疗效及与其它文献方法的比较。方法:采用骶管或硬膜外腔阻滞麻醉,应用美国Laserscope公司生产的非接触式绿激光治疗系统,以30~80W功率对膀胱肿瘤进行汽化。结果:本组汽化时间10~70min,耗能12.23~86.70kJ,出血0~10 ml,术后113例未留置尿管,余67例留置尿管24~96h,膀胱冲洗0~72h,术后住院3~9d,术中均未输血,均未转为开放手术。结论:绿激光膀胱肿瘤汽化术手术安全、操作简单、手术时间短、出血少、痛苦小、留置尿管时间短、康复快,无死角、盲区,可重复性强,是一种理想的微创手术方法。 相似文献
80.